本文關(guān)鍵詞：小型豬可控型心臟死亡供體模型的建立及腎臟離體保存研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：在世界范圍內(nèi),供體器官的極度缺乏已經(jīng)成為制約器官移植事業(yè)發(fā)展的最主要矛盾,在我國(guó)這一情況更加突出。隨著體制改革、法律完善及人民群眾素質(zhì)提升等原因,死囚供體器官漸漸退出我國(guó)歷史舞臺(tái),無心跳供體(donation after cardiac death,DCD)逐年增多,成為我國(guó)供體器官的主要來源。DCD供體器官所受缺血再灌注損傷較重,術(shù)后發(fā)生移植物功能延遲恢復(fù)甚至原發(fā)性移植物無功能的風(fēng)險(xiǎn)明顯增加。如何減輕此類供體器官的損傷,并在移植前評(píng)估器官的活性是當(dāng)前研究的熱點(diǎn)。大動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究能夠更好地模擬人體器官的生理及病理過程,是進(jìn)行DCD供體研究的最佳模型。但針對(duì)DCD供體,前期報(bào)道中的動(dòng)物模型在死亡誘導(dǎo)方式、生理參數(shù)監(jiān)控,以及供體器官的獲取方式方面存在較大的差異。心臟死亡供體模型在死亡誘導(dǎo)方式及時(shí)間方面極為敏感,因此我們?cè)趨⒖紘?guó)內(nèi)外前期研究的基礎(chǔ)上,建立了一種較為穩(wěn)定的可控型小型豬心臟死亡供體模型。前期研究已證實(shí),機(jī)械灌注保存較傳統(tǒng)的低溫靜態(tài)保存(cold storage,CS)可有效減輕供體器官的缺血再灌注損傷。但對(duì)于DCD供體,低溫灌注與常溫灌注,哪種方式更為適用,仍有待進(jìn)一步研究。有鑒于此,我們開展了本課題的研究。目的:建立小型豬可控型無心跳供體模型,采用本實(shí)驗(yàn)室自行設(shè)計(jì)的離體器官灌注保存設(shè)備進(jìn)行體外器官灌注保存。1.建立無心跳供體的動(dòng)物模型。采用冠脈結(jié)扎的方法建立小型豬制備可控型無心跳供體的動(dòng)物模型,監(jiān)測(cè)循環(huán)衰竭前血流動(dòng)力學(xué)、血?dú)夥治黾八劳鰰r(shí)間等,在心跳停止后的不同時(shí)間切取供體器官(肝/腎),對(duì)供體肝/腎進(jìn)行病理組織穿刺活檢,分析病理?yè)p傷情況。2.分別在常溫(37℃)有氧K-H液及低溫(4℃)無氧K-H液狀態(tài)下,對(duì)DCD供腎離體機(jī)械灌注保存,比較兩種灌注方式在減輕DCD供腎損傷方面的效果。方法:1.采用3組五指山小型豬(2~4個(gè)月齡),每組3頭。全麻后輔助呼吸,開胸行心臟左降支動(dòng)脈分離術(shù),分離供肝及供腎,并經(jīng)腹主動(dòng)脈插管,連接HC-A II液預(yù)備灌注,準(zhǔn)備完畢后在深度麻醉下停止呼吸機(jī)、液體及藥物支持,并同時(shí)結(jié)扎心臟左降支動(dòng)脈,至呼吸心跳完全停止,期間記錄心率、收縮壓、舒張壓、中央靜脈壓力、血氧飽和度并定時(shí)取血進(jìn)行血?dú)夥治龅取Ｔ谛呐K停搏后分別等待0min、15min、30min,開始HC-A II液灌注,至肝腎顏色灰白之后,行肝腎聯(lián)合切取術(shù);灌注完成后對(duì)供體肝腎行組織活檢。2.供腎隨機(jī)分成兩組,一組在4℃下用K-H液離體機(jī)械灌注保存,另一組在37℃下采用新鮮配制有氧K-H液進(jìn)行離體機(jī)械灌注保存。監(jiān)測(cè)腎臟的尿量;并在灌注的不同時(shí)間采集灌注液,檢測(cè)灌注液中的LDH,穿刺取腎組織,制成均漿,檢測(cè)組織中的SOD、GSH-PX的含量,在灌注6h后的時(shí)間終點(diǎn)穿刺供體腎臟組織行病理分析。結(jié)果:1.冠狀動(dòng)脈左降支結(jié)扎同時(shí)停止呼吸機(jī)輔助呼吸后,小型豬的心率、收縮壓、舒張壓、中央靜脈壓力、血氧飽和度和二氧化碳分壓發(fā)生顯著變化,約7min左右呼吸循環(huán)衰竭而死亡。2.常溫離體機(jī)械灌注相較于低溫離體灌注的保存方式,能減輕供體器官的細(xì)胞損傷,減輕氧化應(yīng)激反應(yīng),減輕組織病理?yè)p傷。結(jié)論:1.新的供體模型呼吸循環(huán)衰竭穩(wěn)定、可控制、無藥物毒副作用,大約在7±0.17min后心跳停止后死亡。該模型適用于供體器官的進(jìn)一步研究。2.常溫離體機(jī)械灌注相較于低溫離體灌注方式,更能改善DCD供體器官的細(xì)胞缺血、缺氧狀態(tài),減輕組織細(xì)胞的損傷。
【關(guān)鍵詞】：動(dòng)物模型 無心跳供體 缺血再灌注損傷 心臟驟停 豬
【學(xué)位授予單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R-332;R617
【目錄】：

• 摘要6-8
• ABSTRACT8-11
• 常用縮寫詞中英文對(duì)照表11-12
• 前言12-13
• 第一部分 制備無心跳供體的動(dòng)物模型13-28
• 1 材料與方法13-21
• 1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物13
• 1.2 主要藥物13-14
• 1.3 主要耗材及實(shí)用儀器14-15
• 1.4 實(shí)驗(yàn)分組15
• 1.5 術(shù)前準(zhǔn)備及麻醉15-17
• 1.6 豬手術(shù)模型制作17-19
• 1.7 豬腎供體器官修整19-20
• 1.8 主要觀察指標(biāo)20
• 1.9 統(tǒng)計(jì)分析20-21
• 2 結(jié)果21-25
• 3 討論25-27
• 4 結(jié)論27-28
• 第二部分 體外灌注系統(tǒng)灌注保存獲取供腎28-37
• 1 材料與方法28-32
• 1.1 實(shí)驗(yàn)器官28
• 1.2 主要藥物28
• 1.3 主要實(shí)驗(yàn)儀器28-30
• 1.4 豬供體腎臟實(shí)驗(yàn)分組30
• 1.5 豬供體腎臟實(shí)驗(yàn)方法30-31
• 1.6 主要觀察指標(biāo)31
• 1.7 計(jì)學(xué)分析31-32
• 2 結(jié)果32-35
• 3 討論35-36
• 4 結(jié)論36-37
• 參考文獻(xiàn)37-41
• 綜述41-59
• 參考文獻(xiàn)49-59
• 致謝59-60
• 在學(xué)期間承擔(dān)/參與的科研課題與研究成果60-61
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷61

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前4條

1 張悅,余小舫,姜浩力;不同灌注方法對(duì)保存期大鼠供肝膽管細(xì)胞的影響[J];實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志;2005年20期

2 田彥璋;韓振國(guó);趙浩亮;劉建生;王晉喜;;機(jī)器灌注保存供肝在大鼠肝移植中的實(shí)驗(yàn)研究[J];中國(guó)藥物與臨床;2008年06期

3 李幼平;移植動(dòng)物模型的歷史、現(xiàn)狀、問題和展望[J];中華器官移植雜志;2001年05期

4 楊春華;陳雪霞;謝文鋒;陳麗;鄭東華;丁玉偉;;器官捐獻(xiàn)與供體維護(hù)[J];新醫(yī)學(xué);2013年06期

  本文關(guān)鍵詞：小型豬可控型心臟死亡供體模型的建立及腎臟離體保存研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：305277