本文關鍵詞：羅格列酮對哮喘大鼠caspase-3、TGF-β1的作用及氣道重塑的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:研究羅格列酮對哮喘大鼠caspase-3、TGF-β1表達的影響。成功建立哮喘大鼠模型,檢測肺組織及血清中caspase-3、TGF-β1水平,并結合氣道壁厚度及平滑肌厚度反映氣道重塑;通過對比羅格列酮干預后caspase-3、TGF-β1水平及氣道壁厚度的變化,探討羅格列酮對哮喘氣道重塑的作用。方法:將30只清潔級SD大鼠(雌性,6周齡,體重120-150g之間)隨機分成3組,分別是正常對照組、哮喘模型組和羅格列酮干預組,每組10只。其中哮喘模型組方法制備,分別于實驗第1、8天對大鼠腹腔注射OVA100mg和氫氧化鋁100mg(混于生理鹽水2m L中)進行致敏,第15天起將大鼠置于自制的非完全密閉霧化吸入箱內(nèi),給予OVA溶液霧化吸入(OVA濃度由1%逐漸遞增,每激發(fā)4次增加一次,分別為:1%、1.5%、2%、2.5%、3%),隔日1次,每次30min,共激發(fā)20次。當大鼠出現(xiàn)煩躁、嗆咳、呼吸急促、活動量下降等典型的哮喘發(fā)作的表現(xiàn)時為激發(fā)成功。而羅格列酮組則在每次OVA霧化吸入前30min按5mg/kg經(jīng)口腔灌服方式給予小鼠羅格列酮,正常對照組以生理鹽水代替OVA;以上兩組致敏和激發(fā)方法與哮喘組相同。在最后一次激發(fā)24小時后,將大鼠以1%戊巴比妥鈉麻醉,取材。收集支氣管肺泡灌洗液,計數(shù)細胞總數(shù)、中性粒細胞、淋巴細胞及嗜酸性粒細胞;部分肺組織行病理切片,HE染色;免疫組化方法測定肺組織caspase-3表達水平測定;ELISA法測定血清中TGF-β1的濃度;并應用圖像分析軟件技術測量caspase-3的相對表達強度;應用計算機圖像分析技術測定氣道壁厚度;采用SPSS統(tǒng)計學方法,測定哮喘小鼠支氣管管壁厚度與肺組織caspase-3表達的相關性及哮喘小鼠支氣管管壁厚度與血清中TGF-β1表達的相關性。結果:1支氣管肺泡灌洗液(BALF)中細胞總數(shù)計數(shù)及各個細胞分類計數(shù)結果(×106/L):正常對照組分別是9.49±0.10、0.52±0.08,哮喘模型組分別是35.21±0.51、3.53±0.06,羅格列酮組分別是14.98±0.67、1.27±0.06。根據(jù)統(tǒng)計結果,三個組中哮喘組的細胞總數(shù)高于正常對照組和羅格列酮組(F=7563.975,P0.01);哮喘組的中性粒細胞數(shù)高于正常對照組和羅格列酮組(F=664.996,P0.01);哮喘組中的淋巴細胞計數(shù)高于正常對照組和羅格列酮組(F=1966.297,P0.01);哮喘組的嗜酸性粒細胞計數(shù)高于正常對照組和羅格列酮組(F=5294.103,P0.01)。2病理結果:哮喘組大鼠肺組織病理切片可見支氣管粘膜下及肺組織間質(zhì)可見大量炎性細胞浸潤,支氣管壁增厚,支氣管黏膜明顯增厚、氣道平滑肌明增厚、血管增生、血管壁增厚。羅格列酮組的炎性細胞浸潤程度,支氣管壁增厚程度、支氣管平滑肌增厚及血管增生程度等均較哮喘組減輕。正常對照組的大鼠肺組織病理切片為大致正常肺組織,偶爾可見炎性細胞、支氣管管腔規(guī)則,支氣管黏膜上皮、黏膜肌層未見增厚、肺組織結構完整。3圖像分析結果:哮喘組大鼠的氣道壁厚度(μm2/μm)與平滑肌厚度(μm2/μm)(98.49±2.58;45.29±2.26)均高于羅格列酮組(86.03±2.63;33.54±1.35),有統(tǒng)計學意義(P0.01);兩組又均高于對照組(70.75±2.10;17.62±1.12),有統(tǒng)計學意義(F=323.150,P0.01;F=704.562,P0.01)。4免疫組化法結果:哮喘組大鼠肺組織中caspase-3的平均光密度值(0.0789±0.0529)低于羅格列酮組(0.1429±0.0435),有統(tǒng)計學意義(P0.01);兩組均低于對照組(0.2499±0.0835),有統(tǒng)計學意義(F=19.219,P0.01)。5 ELISA法測定血清中TGF-β1的含量(ng/ml):哮喘組大鼠血清中的TGF-β1含量(30.63±1.76)高于羅格列酮組(23.57±0.97),有統(tǒng)計學意義(P0.01),兩組均高于對照組(17.13±1.13),有統(tǒng)計學意義(F=257.16,P0.01)。6相關性分析結果:氣道壁厚度與肺組織caspase-3表達成負相關。(r=-0.782,P0.01),氣道壁平滑肌厚度與肺組織中TGF-β1的表達水平呈顯著正相關(r=0.986,P0.01),caspase-3與TGF-β1表達呈負相關(r=-0.771,P0.01)。結論:1哮喘組大鼠氣道中存在明顯的炎性細胞浸潤,提示哮喘是由多種炎性細胞參與的氣道炎癥的疾病,而羅格列酮可明顯減輕氣道炎癥。2羅格列酮可明顯減輕哮喘大鼠肺組織中的炎癥細胞浸潤、腺體增生、氣道壁增厚、氣道重塑等病理改變,明顯降低氣道壁厚度及氣道平滑肌厚度,且氣道壁厚度與平滑肌厚度呈顯著正相關,而羅格列酮可明顯減輕氣道重塑。3羅格列酮組肺組織中caspase-3的表達較哮喘組高。哮喘組及羅格列酮組血清中TGF-β1的表達較正常對照組高,但羅格列酮組較哮喘組血清中TGF-β1的表達低;故羅格列酮可抑制TGF-β1的活性和表達,并可上調(diào)caspase-3的表達。4相關分析結果顯示支氣管管壁厚度與caspase-3表達呈負相關,支氣管平滑肌厚度與血清中TGF-β1的表達呈正相關。羅格列酮減輕哮喘氣道重塑,抑制TGF-β1的活性和表達,并可上調(diào)caspase-3的表達。羅格列酮能起到減輕氣道炎癥及氣道重塑作用的。
【關鍵詞】：哮喘 氣道重塑 caspase-3 TGF-β1 羅格列酮
【學位授予單位】：河北醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R562.25
【目錄】：

• 中文摘要4-7
• 英文摘要7-11
• 英文縮寫11-12
• 前言12-13
• 材料與方法13-18
• 結果18-21
• 附圖21-30
• 附表30-32
• 討論32-37
• 結論37
• 參考文獻37-40
• 綜述 PPAR-γ 受體激動劑對哮喘大鼠氣道重塑的影響40-49
• 參考文獻45-49
• 致謝49-50
• 個人簡歷50

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 何曉燕;張敏;陳智超;游泳;田蕾;鄒萍;;PPAR-γ在肺癌中的表達及在肺癌凋亡中的作用研究[J];中國肺癌雜志;2006年01期

  本文關鍵詞：羅格列酮對哮喘大鼠caspase-3、TGF-β1的作用及氣道重塑的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：299676