發(fā)布時間：2017-04-06 21:22

  本文關(guān)鍵詞：腸梗阻大鼠空腸組織腐胺的測定與腸炎寧的作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:建立相對簡便、快速的腐胺測定方法,定量測定生物樣品中腐胺的含量。觀測腸炎寧對單純性粘連性腸梗阻大鼠腸組織形態(tài)學(xué)變化和腐胺水平的影響,探討其對單純性腸梗阻的作用。方法:1.模型制備將健康SD大鼠,雌雄各半,隨機(jī)分為正常對照組(正常組)、腸梗阻模型對照組(模型組),頭孢克肟陽性藥物對照組(頭孢克肟組)、腸炎寧治療組(腸炎寧組)。將四組大鼠禁食12小時,不禁水,腹腔注射10%水合氯醛進(jìn)行麻醉。將大鼠固定,脫毛,消毒,鋪無菌紗布,上腹部正中切2 cm切口,分離空腸,后三組每隔5 mm用有齒鑷夾傷腸管,送回腹腔,正常對照組(亦即假手術(shù)組)手術(shù)過程與模型組大致相同,只是開腹后不鉗夾,逐層縫合,再消毒。將四組大鼠于術(shù)后第一天早晨起分別給予生理鹽水、生理鹽水、等容量頭孢克肟(3.2mg·mL-1)和腸炎寧(0.1075 g·mL-1)灌胃,灌胃體積皆為10 mL·kg-1,每日一次,連續(xù)七天。2.HPLC法測定大鼠腸組織中腐胺水平正常組和模型組各15只大鼠,于第七天灌胃給藥后3 h處死。頭孢克肟組和腸炎寧組分別于第七天灌胃給藥后的3、6、12、24 h各處死6只。取空腸組織樣品,先后加入5-磷酸吡哆醛酶提取液和鳥氨酸鹽酸鹽使其反應(yīng)產(chǎn)生腐胺。以苯甲酰氯對腐胺進(jìn)行柱前衍生,采用高效液相色譜法測定各組大鼠腸組織腐胺濃度。3.腸炎寧對粘連性腸梗阻大鼠的作用另取正常組、模型組、頭孢克肟組及腸炎寧組大鼠,每組各15只。分別進(jìn)行動物一般狀況觀察;腸組織大體觀察,按Phyllips分級標(biāo)準(zhǔn)對粘連程度進(jìn)行分級;HE染色,光鏡下空腸組織形態(tài)學(xué)觀察,評價腸炎寧的作用。4.統(tǒng)計方法:等級資料采用Ridit分析;定量資料方差齊性時用單因素方差分析,方差不齊時用非參數(shù)檢驗。結(jié)果:1.單純粘連性腸梗阻模型造模成功:正常組大鼠,飲食、排便如常,體重增加。模型組大鼠術(shù)后食欲差,不排便,活動少,體重降低,毛發(fā)稀疏,可見腹形,開腹后有廣泛粘連,分離困難、出血多。2.建立柱前衍生-hplc法測定腸組織中腐胺的含量,以c18柱作為色譜柱,采用甲醇:水(60:40)為流動相;紫外檢測器檢測波長為232nm;檢測靈敏度為0.002(aufs)。該法簡單、可靠,適合生物樣品中腐胺的測定。腐胺變化:最后一次用藥后,頭孢克肟組腐胺水平逐漸降低;腸炎寧組用藥3h后腐胺降低的幅度較大,且6h時的腐胺水平低于頭孢克肟組,但個別時間點較之前的臨近時間點腐胺水平有輕度回升,觀察終點上腸炎寧組與頭孢克肟組腐胺水平無顯著性差異,并且與模型組進(jìn)行比較,在用藥七天后同時間點的用藥各組腐胺水平均較模型組明顯減低。3.腸炎寧對單純性粘連性腸梗阻大鼠的作用動物一般狀況觀察:正常組:飲食、排便正常,體重增加;模型組:術(shù)后不思飲食,不排便,精神萎靡,毛發(fā)不榮,體重減輕,可見腹形;頭孢克肟組:術(shù)后食欲不振,不排便,給藥后排便短、小、細(xì),體重緩慢增加;腸炎寧組:術(shù)后食欲不佳,不排便,給藥后飲食逐漸增多,排便增加,體重緩慢回升。腸組織大體觀察:正常組:腸組織未見異常改變,無腸粘連等改變;模型組:有廣泛粘連,分離困難、分離時出血較多,以3級和4級粘連居多;頭孢克肟組:粘連面積多數(shù)未超過創(chuàng)面百分之二十,以2級居多;腸炎寧組:粘連面積多數(shù)未超過創(chuàng)面百分之十,用手指可分離,分離時無出血。光鏡下觀察:各組大鼠空腸腸壁結(jié)構(gòu)清晰,形態(tài)正常。正常組:腸絨毛規(guī)整,未見破壞、水腫,偶見炎細(xì)胞浸潤。模型組:腸絨毛變短、不規(guī)則,小腸腺增多,可見較多潘氏細(xì)胞,杯狀細(xì)胞增多,間質(zhì)急、慢性炎細(xì)胞浸潤,伴纖維組織增生。頭孢克肟組:腸絨毛明顯增粗,部分融合,杯狀細(xì)胞增多,可見散在淋巴小結(jié),間質(zhì)炎細(xì)胞減少,纖維組織明顯增生。腸炎寧組:腸絨毛增粗,變長,部分融合,小腸腺形態(tài)較好,呈長指狀,杯狀細(xì)胞增多,間質(zhì)炎細(xì)胞減少,纖維組織明顯增生。結(jié)論:1.成功建立測定生物樣品中腐胺含量的柱前衍生-hplc法。該方法簡便、準(zhǔn)確,重復(fù)性好。適用于生物樣品中腐胺的測定。2.模型組大鼠空腸組織腐胺水平升高,用藥后可使之降低,腸組織腐胺水平的變化可在一定范圍內(nèi)反映腸損傷程度變化。3.腸炎寧能降低腸梗阻大鼠空腸組織中腐胺水平,減輕組織病理損傷,可使腸絨毛及小腸腺趨于正常,而且降低腸粘連程度的作用較為明顯,也能減輕腸梗阻的癥狀。腸炎寧對大鼠單純性粘連性腸梗阻具有一定的作用。
【關(guān)鍵詞】：高效液相色譜法 柱前衍生 鳥氨酸脫羧酶 腐胺 粘連性腸梗阻
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R285.5
【目錄】：

• 中文摘要4-7
• Abstract7-13
• 縮略語/符號說明13-14
• 前言14-19
• 研究現(xiàn)狀、成果14-18
• 研究目的、方法18-19
• 一、高效液相色譜法測定大鼠腸梗阻模型腐胺濃度19-35
• 1.1 材料與動物19-20
• 1.1.1 實驗儀器19
• 1.1.2 實驗試劑19-20
• 1.1.3 模型建立20
• 1.2 實驗方法20-23
• 1.2.1 溶液配置20-21
• 1.2.2 樣品處理21-22
• 1.2.3 色譜條件22
• 1.2.4 色譜實驗方法22-23
• 1.3 結(jié)果23-30
• 1.3.1 系統(tǒng)適用性試驗23-25
• 1.3.2 線性試驗25-26
• 1.3.3 回收率實驗26-27
• 1.3.4 日內(nèi)差試驗27
• 1.3.5 日間差試驗27
• 1.3.6 重復(fù)性實驗27-28
• 1.3.7 質(zhì)量控制實驗28
• 1.3.8 樣品的測定28-30
• 1.4 討論30-34
• 1.4.1 模型的建立30
• 1.4.2 酶提取液的配制與反應(yīng)過程30-31
• 1.4.3 柱前衍生條件選擇31-32
• 1.4.4 ODC的表達(dá)32
• 1.4.5 空腸組織腐胺水平的變化32-34
• 1.5 小結(jié)34-35
• 二、腸炎寧對粘連性腸梗阻大鼠模型的作用35-46
• 2.1 材料與動物35-36
• 2.1.1 實驗儀器35
• 2.1.2 動物與試劑35-36
• 2.2 實驗方法36-38
• 2.2.1 模型制備36
• 2.2.2 動物一般表現(xiàn)觀察36
• 2.2.3 腸粘連情況大體觀察36-37
• 2.2.4 包埋流程37
• 2.2.5 染色實驗流程37-38
• 2.3 結(jié)果38-43
• 2.3.1 動物一般觀察38-39
• 2.3.2 腸粘連情況大體觀察39-40
• 2.3.3 鏡下觀察40-43
• 2.4 討論43-45
• 2.4.1 腸黏膜鏡下觀察結(jié)果分析43-44
• 2.4.2 腸炎寧的成分及作用44-45
• 2.5 小結(jié)45-46
• 結(jié)論46-47
• 參考文獻(xiàn)47-54
• 發(fā)表論文和參加科研情況說明54-55
• 綜述55-66
• 參考文獻(xiàn)62-66
• 致謝66

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王立新,史宗道,趙一鳴,汪欣,蔣斌,顧晉,姜可偉,周孝思;急性機(jī)械性絞窄性腸梗阻預(yù)測模型的建立和檢驗[J];北京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2000年02期

2 徐斌;周振理;;腸梗阻病因及治療分析[J];吉林醫(yī)學(xué);2012年14期

3 白洋;傅衛(wèi);袁國紅;陶明;張同琳;;模擬絞窄性腸梗阻發(fā)展過程的大鼠模型的建立[J];實驗動物科學(xué);2010年03期

4 蔡衛(wèi)華;曹東明;;石蠟油聯(lián)合芒硝外敷保守治療老年不全性腸梗阻的臨床療效觀察[J];臨床合理用藥雜志;2015年15期

5 何秀兵;;腸梗阻的病因及臨床特征分析[J];基層醫(yī)學(xué)論壇;2011年01期

6 趙奎君，，徐國鈞，金蓉鸞，徐珞珊，張蒲芝;狼毒類中藥對結(jié)核桿菌抗菌作用的比較[J];中國藥科大學(xué)學(xué)報;1995年02期

7 王東紅;李亮;盛麗;柳淵潔;黃小玲;王自立;唐曉勇;;漿膜剝脫法建立大鼠粘連性不完全性腸梗阻模型[J];中國普外基礎(chǔ)與臨床雜志;2011年04期

8 劉湘新,孫志良,馮崎華,盛忠梅;地錦草化學(xué)成分及抗菌作用研究[J];中國獸醫(yī)雜志;1996年08期

9 曹瑞玲;大戟科植物地錦草的藥效學(xué)研究探討[J];中醫(yī)藥學(xué)刊;2003年06期

10 金哲;;粘連性腸梗阻的中醫(yī)治療體會[J];中國中醫(yī)急癥;2007年05期

  本文關(guān)鍵詞：腸梗阻大鼠空腸組織腐胺的測定與腸炎寧的作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：289718