本文關(guān)鍵詞：加味益氣聰明湯對(duì)VD大鼠海馬神經(jīng)元突觸可塑性的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:研究加味益氣聰明湯對(duì)血管性癡呆(VD)大鼠行為學(xué)及大鼠海馬神經(jīng)元突觸結(jié)構(gòu)、海馬區(qū)膽堿能神經(jīng)遞質(zhì)乙酰膽堿(Ach)、膽堿酯酶(Ach E)、大腦皮層單胺類遞質(zhì)5-羥色胺(5-HT)、多巴胺(DA)、去甲腎上腺素(NE)的影響,初步闡明加味益氣聰明湯治療血管性癡呆的作用機(jī)制。方法:1.分組:在Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)中,通過觀察大鼠游泳軌跡及記錄相應(yīng)的時(shí)間,選擇記憶能力相似的60只雄性SD大鼠,采用隨機(jī)的原則分為12只假手術(shù)組和48只手術(shù)組:模型組、尼莫地平組(簡(jiǎn)稱“對(duì)照1組”)、復(fù)方蓯蓉益智膠囊組(簡(jiǎn)稱“對(duì)照2組”)、加味益氣聰明湯組(簡(jiǎn)稱“實(shí)驗(yàn)組”)。手術(shù)組采用一次手術(shù)先后結(jié)扎左右頸總動(dòng)脈(CCA)制備VD模型;假手術(shù)組在手術(shù)過程中只是把左右頸總動(dòng)脈與神經(jīng)分離暴露出來,不需要結(jié)扎雙側(cè)血管。2.給藥:對(duì)照1組予以尼莫地平6.25mg/kg/d灌胃,對(duì)照2組予以復(fù)方蓯蓉益智膠囊0.375g/kg/d灌胃,實(shí)驗(yàn)組選用加味益氣聰明湯以14.58g/kg/d的劑量給藥,假手術(shù)組、模型組灌胃均選用蒸餾水,按照所有藥物各自所需劑量配制成2ml/d給藥,一共持續(xù)30天。3.取材:5組內(nèi)分別隨機(jī)抽取2只(共10只)大鼠麻醉后行心臟灌注多聚甲醛內(nèi)固定取腦組織,準(zhǔn)備電鏡觀察的切片;每組各剩下的10只大鼠斷頭處死后剝離雙側(cè)海馬及大腦皮層,各自搗碎配液離心提取海馬組織勻漿及大腦皮層勻漿,保存在-20℃冰箱待測(cè)。4.指標(biāo)的檢測(cè)方法:各組大鼠的行為學(xué)變化主要通過水迷宮實(shí)驗(yàn)進(jìn)行檢測(cè);海馬區(qū)Ach的含量選用ELISA法測(cè)定;海馬區(qū)Ach E的含量選擇分光光度法測(cè)定;大腦皮層區(qū)5-HT、DA、NE的含量主要選擇熒光分光光度法測(cè)定;在電鏡下觀察各組海馬區(qū)神經(jīng)元突觸超微結(jié)構(gòu)的變化。結(jié)果:(1)行為學(xué)變化:(a)定位航行結(jié)果:與假手術(shù)組比較,模型組大鼠逃避潛伏期(EL)明顯延長(zhǎng),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01),對(duì)照1組、對(duì)照2組及實(shí)驗(yàn)組EL有所延長(zhǎng),差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);與模型組比較,對(duì)照1組、對(duì)照2組、實(shí)驗(yàn)組的EL明顯縮短,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05或P0.01);對(duì)照1組、對(duì)照2組及實(shí)驗(yàn)組各組兩兩之間比較EL有所不同,但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。(b)空間探索實(shí)驗(yàn):與假手術(shù)組比較,模型組大鼠經(jīng)過有效區(qū)及平臺(tái)的次數(shù)顯著減少,停留在平臺(tái)及有效區(qū)的時(shí)間顯著縮短,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01);與模型組相比,對(duì)照1組、對(duì)照2組、實(shí)驗(yàn)組經(jīng)過平臺(tái)及有效區(qū)的次數(shù)增多顯著,平臺(tái)及有效區(qū)停留時(shí)間延長(zhǎng)明顯,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05或P0.01);對(duì)照1組、對(duì)照2組、實(shí)驗(yàn)組各組之間兩兩比較,經(jīng)過平臺(tái)及有效區(qū)的時(shí)間以及跨越平臺(tái)及有效區(qū)的次數(shù)無明顯變化,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。(2)ELISA檢測(cè)結(jié)果:與假手術(shù)組比較,模型組大鼠海馬區(qū)Ach含量明顯降低,而海馬區(qū)Ach E含量明顯增多,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01),對(duì)照1組、對(duì)照2組及實(shí)驗(yàn)組較假手術(shù)組大鼠海馬區(qū)Ach含量降低,而在海馬區(qū)的Ach E含量增高,差別均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01);與模型組相比,對(duì)照1組、對(duì)照2組及實(shí)驗(yàn)組大鼠海馬區(qū)Ach含量增多較為顯著,而Ach E含量降低明顯,差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01);與對(duì)照1組比較,對(duì)照2組大鼠海馬區(qū)Ach含量降低明顯,而海馬區(qū)Ach E的含量升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05或P0.01),實(shí)驗(yàn)組大鼠海馬區(qū)Ach含量降低,Ach E含量有所增高,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);與對(duì)照2組比較,實(shí)驗(yàn)組海馬區(qū)Ach含量輕微增高,Ach E含量稍有降低,但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。與假手術(shù)組比較,模型組大鼠皮層區(qū)NE、DA、5-HT明顯降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01),對(duì)照1組、對(duì)照2組以及實(shí)驗(yàn)組大鼠皮層區(qū)NE、DA、5-HT含量減低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01);與模型組比較,對(duì)照1組、對(duì)照2組、實(shí)驗(yàn)組大鼠皮層區(qū)NE、DA、5-HT明顯增多,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01);與對(duì)照1組比較,對(duì)照2組大鼠皮層區(qū)NE、DA、5-HT含量減少,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05或P0.01),實(shí)驗(yàn)組大鼠皮層區(qū)NE、DA、5-HT含量有所降低,但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。對(duì)照2組與實(shí)驗(yàn)組之間皮層區(qū)NE、DA、5-HT含量變化不大,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)(3)電鏡結(jié)果:假手術(shù)組大鼠海馬區(qū)突觸密集度高,結(jié)構(gòu)清晰,突觸的各組成成分可被清楚辨認(rèn),在突觸后致密區(qū)可見較深的染色,密度高。模型組突觸前膜內(nèi)的線粒體嵴變得模糊、腫脹明顯,突觸結(jié)構(gòu)模糊欠清,突觸數(shù)目減少甚多,在突觸后致密區(qū)可見較淺的染色,密度不高。與假手術(shù)組相比,模型組大鼠海馬區(qū)突觸數(shù)目減少明顯,突觸間隙增寬,突觸后致密區(qū)染色變淺;與模型組相比,對(duì)照1組、對(duì)照2組和實(shí)驗(yàn)組大鼠海馬區(qū)突觸顯著增多,突觸間隙寬度變小,突觸后致密區(qū)染色變深、突觸活性區(qū)長(zhǎng)度變長(zhǎng);假手術(shù)組與對(duì)照1組、對(duì)照2組、實(shí)驗(yàn)組之間兩兩比較,上述突觸結(jié)構(gòu)參數(shù)之間的變化較小。結(jié)論:1.結(jié)扎雙側(cè)CCA可成功制備與海馬區(qū)相關(guān)的學(xué)習(xí)記憶障礙的VD模型。2.加味益氣聰明湯可改善VD大鼠的學(xué)習(xí)記憶功能以及大鼠海馬區(qū)神經(jīng)元的突觸結(jié)構(gòu)與功能。3.加味益氣聰明湯對(duì)VD的作用機(jī)制可能:改善海馬區(qū)神經(jīng)元突觸結(jié)構(gòu)的缺血缺氧狀態(tài),恢復(fù)突觸的正常結(jié)構(gòu)及提高突觸傳遞效能;通過促進(jìn)海馬區(qū)膽堿能神經(jīng)遞質(zhì)對(duì)Ach的釋放以及抑制海馬區(qū)對(duì)Ach E的合成,從而增加海馬區(qū)Ach的含量和減少Ach E的含量;促進(jìn)修復(fù)后的突觸囊泡對(duì)NE、DA、5-HT的釋放,從而提高其在大腦皮層內(nèi)的含量;并且可通過降低海馬區(qū)Ach E的含量,達(dá)到維持海馬神經(jīng)元的信息傳遞功能的完整性的目的,從而起到改善學(xué)習(xí)記憶的能力。
【關(guān)鍵詞】：加味益氣聰明湯 血管性癡呆 突觸可塑性 作用機(jī)制
【學(xué)位授予單位】：四川醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R285.5
【目錄】：

• 中文摘要4-8
• 英文摘要8-14
• 前言14-21
• 材料與方法21-30
• 結(jié)果30-41
• 討論41-59
• 結(jié)論59-60
• 參考文獻(xiàn)60-69
• 英漢縮略詞對(duì)照表69-70
• 致謝70-71
• 突觸可塑性的中醫(yī)藥調(diào)控研究進(jìn)展（綜述）71-94
• 參考文獻(xiàn)85-94

【參考文獻(xiàn)】

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中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

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本文編號(hào)：284022