本文關(guān)鍵詞：κ阿片受體對復蘇后大鼠心功能障礙保護作用的信號通路機制，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：研究目的觀察K阿片受體(kappa opioid receptor,KOR)調(diào)節(jié)復蘇后心功能障礙的信號通路,探討K阿片受體對復蘇后心功能障礙保護作用的機制,為K阿片受體用于改善復蘇后心功能障礙提供理論依據(jù)。研究方法健康雄性SD大鼠(300-350g)隨機分為對照組(C)、激動劑組(U)、抑制劑組(G),每組隨機分為5個亞組(分別為1h組、2h組、6h組、12h組、24h組),每個亞組8只,常規(guī)稱重、麻醉、固定、手術(shù)區(qū)域備皮、氣管插管、股動靜脈置管、股動脈置管接壓力換能器,四肢接肢體導聯(lián)連至多導生物分析系統(tǒng)(bioMPA2000),抽取血氣分析后適應性機械通氣20分鐘(吸入氧濃度21%,呼吸頻率70次／分,潮氣量8ml/kg,吸呼比1：1)。使用氣管插管封堵法窒息,至收縮壓降至25mmHg以下(判斷心搏停止)并持續(xù)6min后開始機械通氣及胸外心臟按壓(按壓頻率200次／分按壓幅度為1/3胸廓前后徑),在開始心肺復蘇前1分鐘對照組、激動劑組以及抑制劑組分別通過股靜脈置管給予生理鹽水(1.0ml/kg)、U50488H(1.5mg/kg)、 GNTI(0.3mg/kg),復蘇成功后持續(xù)記錄心率、收縮壓、舒張壓、平均動脈壓等指標,并分別在復蘇后1h、2h、6h、12h、24h,5個時間點處死SD大鼠,取心室肌組織用RT-PCT法測定GRK3和K阿片受體的mRNA表達水平,Western blot法測定K阿片受體總蛋白、磷酸化K阿片受體蛋白、GRK3總蛋白、ERK1/2和磷酸化ERK1/2蛋白以及AKT和磷酸化AKT蛋白表達水平。結(jié)果1.復蘇前各組的體重、麻藥使用量、心率、血壓、動脈氧分壓、動脈二氧化碳分壓、動脈碳酸氫根、乳酸等均無統(tǒng)計學差異。2.復蘇后激動劑組各時間點的心率、收縮壓、舒張壓以及平均動脈壓與對照組比較均無統(tǒng)計學差異。復蘇后1.5h抑制劑組的心率高于對照組(p0.05),復蘇后1h、1.5h、2h抑制劑組收縮壓、舒張壓、平均動脈壓均高于對照組(p0.01)。3.復蘇后κ阿片受體總蛋白的變化趨勢為復蘇成功后κ阿片受體逐漸升高,至復蘇后6小時其表達量達到高峰,之后逐漸降低。激動劑組和抑制劑組變化趨勢均與對照組相似,復蘇后各時間點激動劑組以及抑制劑組分別與對照組進行比較,均無統(tǒng)計學差異。在mRNA水平復蘇后各時間點K阿片受體mRNA表達水平較基線水平有明顯升高,復蘇后激動劑組表達量高于對照組(配對t檢驗,p0.05),抑制劑組表達水平低于對照組。復蘇后磷酸化K阿片受體開始升高,復蘇后2小時達到峰值之后持續(xù)下降至復蘇后12小時,在復蘇后24小時再次達到高峰。激動劑組變化趨勢同對照組,抑制劑組一直處于低水平。復蘇后兩小時以后每個時間點的激動劑組表達量高于對照組,抑制劑組表達量低于對照組。4.復蘇后GRK3的總蛋白表達一過性降低至復蘇后2小時達到低谷之后逐漸上升,激動劑組變化趨勢同對照組,抑制劑組的表達一直處于低水平。復蘇后5個時間點激動劑組總體表達量高于對照組(配對t檢驗,p0.05)。復蘇后各時間點抑制劑組表達量明顯低于對照組。復蘇后GRK3 mRNA的表達呈緩慢上升至復蘇后6h達到峰值,之后緩慢下降。激動劑組和對照組相比較在各時間點均無統(tǒng)計學差異。復蘇后6h以及復蘇后24h兩個時間點抑制劑組明顯低于對照組(p0.05)。復蘇后各時間點的K阿片受體和GRK3 mRNA表達量分別配對后行相關(guān)性分析,兩者具呈線性相關(guān)(r=0.0542,p0.001)4.復蘇后磷酸化ERK開始升高,復蘇后2小時達到峰值之后逐漸下降低至復蘇后12小時,在復蘇后24小時再次達到高峰。激動劑組變化趨勢同對照組,抑制劑組一直處于低水平。復蘇后各時間點的激動劑組表達水平高于對照組,抑制劑組表達水平低于對照組。復蘇后磷酸化AKT逐漸升高,復蘇后12小時達到峰值之后逐漸下降低。激動劑組至復蘇后6小時達到高峰,之后逐漸下降,抑制劑組一直處于低水平。復蘇后各時間點的激動劑組磷酸化AKT表達量均高于對照組,復蘇后2小時至24h各時間點的抑制劑組表達量明顯低于對照組。結(jié)論1.窒息致心搏驟停一心肺復蘇心肌組織中κ阿片受體被激活,其變化趨勢為復蘇后2h磷酸化κ阿片受體表達量達到峰值,此后有所下降,至24h再次升高。2.復蘇后心肌組織κ阿片受體mRNA和蛋白表達水平明顯升高,且與GRK3間有相關(guān)性。3.激動K阿片受體后ERK1/2和PI3K/AKT通路被激活,κ阿片受體對復蘇后心功能障礙的保護作用可能通過以上兩條信號通路實現(xiàn)的。
【關(guān)鍵詞】：心肺復蘇 κ阿片受體 ERK1/2 PI3K/AKT GRK3
【學位授予單位】：第二軍醫(yī)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R459.7
【目錄】：

• 中文摘要5-7
• Abstract7-9
• 縮略詞表9-11
• 前言11-14
• 材料與方法14-25
• 一、實驗材料14-16
• 二、實驗方法16-25
• 實驗結(jié)果25-39
• 一、一般情況25
• 二、復蘇前血氣分析25-26
• 三、血流動力學參數(shù)26-31
• 四、復蘇后各時間點KOR、GRK3在mRNA水平的表達31-35
• 五、心肺復蘇后KOR、GRK3及信號通路關(guān)鍵蛋白的表達35-39
• 討論39-42
• 結(jié)論42-43
• 參考文獻43-49
• 文獻綜述49-63
• 參考文獻57-63
• 攻讀學位期間發(fā)表的論文63-64
• 致謝64

【共引文獻】

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 王紅鑫;鹽酸納美芬對急性顱腦損傷患者腦保護作用的臨床研究[D];中南大學;2013年

  本文關(guān)鍵詞：κ阿片受體對復蘇后大鼠心功能障礙保護作用的信號通路機制，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號：282274