發(fā)布時間：2020-09-16 10:28

　　 背景腦卒中因其高發(fā)病率、高致殘率、高死亡率,對人類健康和生命安全產(chǎn)生了極大的危害。隨著科學(xué)研究和臨床實踐的不斷深入,腦卒中的防治策略也不斷完善,但腦卒中的臨床治療中仍存在諸多難題,治療時間窗窄,藥物副作用大等問題亟待解決,因此亟需尋找新的治療方法。缺血性腦卒中發(fā)生和發(fā)展的進(jìn)程極為復(fù)雜,受多種因素影響,其中氧化應(yīng)激反應(yīng)是重要的病理生理過程。氧化應(yīng)激是缺血后級聯(lián)瀑布進(jìn)程中重要的網(wǎng)絡(luò)節(jié)點,引發(fā)腦血流量進(jìn)一步降低,并攻擊生物大分子,引起細(xì)胞壞死、自噬和凋亡。電針具有經(jīng)濟(jì)實用、簡便易行、操作性強(qiáng)、副作用小等優(yōu)點,易于被患者接受,適合應(yīng)用于缺血性腦卒中的臨床方案。電針預(yù)處理減少了丙二醛等的生成,激活體內(nèi)的抗氧化系統(tǒng)。還可以提高線粒體呼吸鏈的功能和抗氧化能力,從而發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)效應(yīng)。人參皂甙Rd是一種主要的人參皂甙單體提取物。離體試驗和在體實驗均證明人參皂甙Rd對缺血性腦損傷具有良好的治療效果。人參皂甙Rd可通過直接清除活性氧、減輕自由基對細(xì)胞的損傷作用、有效抑制腦缺血過程中的過氧化反應(yīng)發(fā)揮抗氧化作用。人參皂甙Rd具有較長的血漿半衰期。具有很高的脂溶性,能夠透過生物膜,也能夠透過血腦屏障到達(dá)中樞神經(jīng)系統(tǒng),使其顯示出獨(dú)特的臨床應(yīng)用潛力,但是人參皂甙rd只有在缺血后4h使用具有治療效果,較短的治療時間窗限制了其臨床應(yīng)用。因此本研究觀察電針聯(lián)合人參皂甙rd對減輕大鼠局灶性腦缺血損傷能否發(fā)揮協(xié)同作用,并探索其具體作用機(jī)制。實驗一電針聯(lián)合人參皂甙rd對大鼠局灶性腦缺血損傷的保護(hù)作用目的:探討電針聯(lián)合人參皂甙rd對大鼠局灶性腦缺血損傷是否具有協(xié)同保護(hù)作用。方法:雄性sd大鼠64只,隨機(jī)分為對照組(mcao組)、電針組(ea組)、人參皂甙rd6h組(gsrd6h組)、人參皂甙rd8h組(gsrd8h組)、人參皂甙rd10h組(gsrd10h組)、電針聯(lián)合人參皂甙rd6h組(ea+gsrd6h組)、電針聯(lián)合人參皂甙rd8h組(ea+gsrd8h組)、電針聯(lián)合人參皂甙rd10h組(ea+gsrd10h組),每組8只。mcao組:建立大鼠mcao模型。ea組:造模成功后,在缺血即刻電針百會穴30min,電針參數(shù)為疏密波2/15hz,1-2ma。gsrd6h組:造模成功后,在缺血后6h給予gsrd50mg/kg腹腔注射。ea+gsrd6h組:造模成功后,在缺血即刻給予疏密波2/15hz,1-2ma電針百會穴30min,并在缺血后6h給予gsrd50mg/kg腹腔注射。gsrd8h組:造模成功后,在缺血后8h給予gsrd50mg/kg腹腔注射。ea+gsrd8h組:造模成功后,在缺血即刻給予疏密波2/15hz,1-2ma電針百會穴30min,并在缺血后8h給予gsrd50mg/kg腹腔注射。gsrd10h組:造模成功后,在缺血后10h給予gsrd50mg/kg腹腔注射。ea+gsrd10h組:造模成功后,在缺血即刻給予疏密波2/15hz,1-2ma電針百會穴30min,并在缺血后10h給予gsrd50mg/kg腹腔注射。神經(jīng)功能學(xué)的評分在缺血再灌注后24h進(jìn)行。評分后取大鼠腦組織,通過ttc染色計算出各組大鼠腦梗死容積百分比。結(jié)果:1)ea+gsrd6h組的神經(jīng)行為學(xué)評分明顯高于mcao組(p0.05),腦梗死容積百分比明顯低于mcao組(p0.05)。gsrd6h組與mcao組相比則沒有明顯的統(tǒng)計學(xué)差異。2)ea+gsrd8h組的神經(jīng)行為學(xué)評分明顯高于mcao組(p0.05),腦梗死容積百分比明顯低于mcao組(p0.05)。gsrd8h組與mcao組相比則沒有明顯的統(tǒng)計學(xué)差異。結(jié)論:對大鼠局灶性腦缺血損傷,電針聯(lián)合人參皂甙rd具有協(xié)同保護(hù)作用。電針可以延長人參皂甙rd的治療時間窗至缺血后8h。實驗二電針聯(lián)合人參皂甙rd的抗氧化作用的研究目的:探索電針聯(lián)合人參皂甙rd的腦保護(hù)作用是否與調(diào)控抗氧化系統(tǒng)有關(guān)。方法:spf級雄性sd大鼠60只,隨機(jī)分為假手術(shù)組(sham組)、局灶性腦缺血組(mcao組)、電針組(ea組)、人參皂甙rd組(gsrd組)、電針聯(lián)合人參皂甙rd組(ea+gsrd組),每組12只。sham組:將右側(cè)頸總、右側(cè)頸外、右側(cè)頸內(nèi)動脈分離,但不插入線栓阻塞大腦中動脈。mcao組:建立大鼠mcao模型。ea組:造模成功后,在缺血即刻電針百會穴30min,電針參數(shù)為疏密波2/15hz,1-2ma。gsrd組:造模成功后,在缺血后8h給予gsrd50mg/kg腹腔注射。ea+gsrd組:建立大鼠mcao模型,在缺血即刻給予疏密波2/15hz,1-2ma電針百會穴30min,并在缺血后8h給予gsrd50mg/kg腹腔注射。其中每組大鼠各取4只在再灌注后24h后取材提取腦組織蛋白進(jìn)行ros試劑盒和mda試劑盒檢測。另取4只在再灌注后24h提取組織dna進(jìn)行8-oh-dg試劑盒檢測。每組剩余4只大鼠于再灌注后24h在深麻醉后取材,檢測sod活力、cat活力和gsh含量。結(jié)果:1)與sham組相比,mcao組ros含量、mda的含量和8-oh-dg含量明顯升高(p0.05),與mcao組相比,ea+gsrd組ros含量、mda的含量和8-oh-dg含量降低(p0.05)。2)與sham組相比,mcao組sod活性、cat活性和gsh含量明顯下降(p0.05),與mcao組相比,ea+gsrd組的sod活性、cat活性和gsh含量升高。(p0.05)。結(jié)論:電針聯(lián)合人參皂甙rd通過調(diào)節(jié)抗氧化系統(tǒng),減輕氧化應(yīng)激反應(yīng)發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用。實驗三電針聯(lián)合人參皂甙rd的遠(yuǎn)期保護(hù)效應(yīng)目的:探索電針聯(lián)合人參皂甙rd對腦缺血再灌注損傷的遠(yuǎn)期保護(hù)效應(yīng)。方法:1)雄性sd大鼠48只,隨機(jī)分組,分為假手術(shù)組(sham組)、局灶性腦缺血組(mcao組)、電針聯(lián)合人參皂甙rd組(ea+gsrd組),每組16只。sham組:將右側(cè)頸總、右側(cè)頸外、右側(cè)頸內(nèi)動脈分離,但不插入線栓阻塞大腦中動脈。mcao組:建立大鼠MCAO模型。EA+GSRd組:建立大鼠MCAO模型,在缺血即刻給予疏密波2/15Hz,1-2mA電針百會穴30min,并在缺血后8h給予GSRd 50mg/kg腹腔注射。于再灌注后1d、3d、7d、14d每組各取4只測定體重、腦組織含水量、腦指數(shù)。2)雄性SD大鼠16只,隨機(jī)分為局灶性腦缺血組(MCAO組)和電針聯(lián)合人參皂甙Rd組(EA+GSRd組),每組8只。MCAO組:建立大鼠MCAO模型。EA+GSRd組:建立大鼠MCAO模型,在缺血即刻給予疏密波2/15Hz,1-2mA電針百會穴30min,并在缺血后8h給予GSRd 50mg/kg腹腔注射。于再灌注后1d至7d每天測定神經(jīng)行為學(xué)評分,在7d、14d進(jìn)行神經(jīng)功能學(xué)評分后取大鼠腦組織,通過TTC染色計算出各組大鼠腦梗死容積百分比。結(jié)果:與MCAO組比較,EA+GSRd組可以促進(jìn)大鼠體重的恢復(fù),明顯降低腦指數(shù),減少腦組織含水量,減少腦梗死容積百分比,增加神經(jīng)功能學(xué)評分。結(jié)論:電針聯(lián)合人參皂甙Rd對腦缺血再灌注損傷的有較好的遠(yuǎn)期保護(hù)效應(yīng)。小結(jié)1.對大鼠局灶性腦缺血損傷,電針聯(lián)合人參皂甙Rd具有神經(jīng)保護(hù)的協(xié)同作用。電針可以延長人參皂甙Rd的治療時間窗至缺血后8h。2.電針聯(lián)合人參皂甙Rd通過調(diào)節(jié)抗氧化系統(tǒng),減輕氧化應(yīng)激反應(yīng)發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用。3.電針聯(lián)合人參皂甙Rd對于腦缺血再灌注損傷具有較好的遠(yuǎn)期保護(hù)效應(yīng)。
【學(xué)位單位】：第四軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2015
【中圖分類】：R245

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本文編號：2819746