本文關(guān)鍵詞：NLRP3炎癥小體在休克腸淋巴液介導(dǎo)急性肺損傷中的作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：肺是重癥休克后最易受累和最先出現(xiàn)癥狀的靶器官,失控的全身炎癥反應(yīng)是引起急性肺損傷(acute lung injury,ALI)的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。眾多研究發(fā)現(xiàn),失血性休克后的腸淋巴液回流是引起ALI的重要機制之一,其作用機制與炎癥反應(yīng)密切相關(guān)。炎癥小體(inflammasome)是胞漿內(nèi)由多蛋白組成的復(fù)合體,是炎癥反應(yīng)的核心;NLRP(Nod-like receptor family,pyrin domain containing)3炎癥小體能被各種類型的分子、細菌或病毒所激活,在炎癥、代謝等多種疾病的發(fā)展中發(fā)揮重要作用,是目前研究最多的一種炎癥小體,在多種原因?qū)е翧LI的發(fā)病過程中均具有重要作用;最近研究表明,NLRP3炎癥小體活化也是重癥失血性休克引起ALI的重要機制之一。但是,休克腸淋巴液介導(dǎo)ALI的過程是否與NLRP3炎癥小體的活化有關(guān)?減少休克腸淋巴液回流在減輕ALI的同時,是否可降低肺組織NLRP3炎癥小體的表達?均有待深入研究。為此,本研究在已證實腸淋巴液引流減輕失血性休克引起的ALI的基礎(chǔ)上,進一步采用失血性休克小鼠模型,觀察腸淋巴液引流對失血性休克小鼠肺組織NLRP3炎癥小體及相關(guān)信號分子表達的影響,檢測休克腸淋巴液是否含有高濃度的NLRP3及炎癥介質(zhì),并進一步觀察靜脈輸入休克腸淋巴液是否可引起正常小鼠肺組織NLRP3炎癥小體的高表達,從而驗證NLRP3炎癥小體在休克腸淋巴液介導(dǎo)ALI中的作用。首先,18只雄性C57BL/6J小鼠隨機均分為:假手術(shù)組(Sham)、休克組(Shock)、休克+引流組(Shock+drainage)。腹腔注射戊巴比妥鈉全身麻醉后,行雙側(cè)股部手術(shù),右股動脈插管連接生物信號采集系統(tǒng),連續(xù)監(jiān)測平均動脈血壓,左股側(cè)動脈插管用于放血與液體復(fù)蘇;腹部手術(shù),剝離腸淋巴管,用于腸淋巴液引流。待所有手術(shù)完成、穩(wěn)定30 min后,休克組、休克+引流組小鼠常規(guī)方法復(fù)制失血性休克模型。維持低血壓90 min后,將放出的全血與林格氏液按1:1混勻,經(jīng)右側(cè)股動脈輸液復(fù)蘇,30 min完成;休克+引流組小鼠在復(fù)蘇結(jié)束后,行腸淋巴液引流,至輸液結(jié)束后3 h。假手術(shù)組進行相同的手術(shù)操作,但不放血、不輸液。各組小鼠在相當(dāng)于輸液結(jié)束后3 h這一時間點,留取肺組織,觀察肺組織形態(tài)學(xué)變化,檢測NLRP3、TLR2、TLR4、MyD88、白介素(interleukin,IL)-1β、IL-18的表達或含量。組織形態(tài)學(xué)觀察表明,假手術(shù)組小鼠肺組織結(jié)構(gòu)基本正常,休克組小鼠肺組織出現(xiàn)了炎細胞增生、肺小葉間隔增厚等表現(xiàn),休克+引流組小鼠肺組織損傷較輕。Western blotting檢測顯示,休克組小鼠肺組織NLRP3、TLR2、TLR4、MyD88的蛋白表達均顯著高于假手術(shù)組,腸淋巴液引流降低了休克小鼠肺組織NLRP3、TLR2、MyD88的蛋白表達;ELISA檢測顯示,失血性休克后小鼠肺組織IL-1?、IL-18水平顯著增加,腸淋巴液引流降低了IL-1?、IL-18的含量;q RT-PCR檢測顯示,失血性休克引起了肺組織NLRP3、TLR2、TLR4、MyD88 mRNA表達,腸淋巴液引流顯著降低了這些指標(biāo)的水平。隨后,取正常野生型小鼠,部分小鼠在麻醉狀態(tài)下,腹部手術(shù)后引流正常淋巴液1 h;部分小鼠按前述方法建立失血性休克模型、液體復(fù)蘇后引流休克腸淋巴液至3 h。應(yīng)用Western blotting技術(shù)檢測淋巴液中NLRP3表達,應(yīng)用ELISA技術(shù)檢測IL-1?、IL-18含量。研究結(jié)果顯示,休克腸淋巴液中NLRP3表達、IL-1?、IL-18含量未見統(tǒng)計學(xué)差異。上述研究表明,休克腸淋巴液引流降低了肺組織TLR2、TLR4、MyD88的蛋白或mRNA表達,從而下調(diào)NLRP3的蛋白與mRNA表達,進而降低了促炎介質(zhì)IL-1β、IL-18的水平;休克腸淋巴液中NLRP3表達、IL-1?、IL-18含量未見明顯變化�？梢�,休克腸淋巴液引起的肺組織NLRP3炎癥小體活化及其介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)是休克腸淋巴液介導(dǎo)急性肺損傷的重要機制之一。研究結(jié)果為以腸淋巴液為干預(yù)靶點,防治重癥休克導(dǎo)致的ALI提供實驗依據(jù)。
【關(guān)鍵詞】：失血性休克 腸淋巴液 NLRP3 急性肺損傷 炎癥反應(yīng) 小鼠
【學(xué)位授予單位】：河北北方學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R459.7
【目錄】：

• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-11
• 英文縮寫11-12
• 前言12-14
• 材料與方法14-26
• 結(jié)果26-28
• 附圖28-35
• 討論35-38
• 結(jié)論38-39
• 參考文獻39-43
• 綜述NLRP3炎癥小體及其在休克致器官損傷中的作用43-54
• 參考文獻49-54
• 致謝54-55
• 個人簡歷55

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 吳燕燕;王易;;Toll樣受體信號通路中MyD88的研究進展[J];免疫學(xué)雜志;2012年03期

  本文關(guān)鍵詞：NLRP3炎癥小體在休克腸淋巴液介導(dǎo)急性肺損傷中的作用，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：278095