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低溫與二氧化碳聯(lián)合脅迫凡納濱對(duì)蝦無水;罴夹g(shù)研究

發(fā)布時(shí)間:2020-07-30 18:26
【摘要】:凡納濱對(duì)蝦(Litopenaeus vannamei)又稱南美白對(duì)蝦,肉嫩味美,營養(yǎng)豐富,深受國內(nèi)外消費(fèi)者的喜愛。凡納濱對(duì)蝦以鮮銷和冷凍加工為主,其中鮮活蝦大約是冷凍蝦價(jià)格的兩倍,因此凡納濱對(duì)蝦的;钸\(yùn)輸具有重要的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。凡納濱對(duì)蝦的活體運(yùn)輸方法主要有帶水運(yùn)輸和無水運(yùn)輸。無水;钸\(yùn)輸由于操作簡便,運(yùn)載量大,成本較低,有利于遠(yuǎn)距離的運(yùn)輸,具有廣闊市場前景。無水運(yùn)輸可以通過低溫或使用麻醉的方法使水產(chǎn)品進(jìn)入休眠狀態(tài)實(shí)現(xiàn)。單純低溫脅迫下水產(chǎn)品易出現(xiàn)應(yīng)激性損傷且猝死率較高,大多數(shù)麻醉劑的使用存在安全性問題。二氧化碳(CO2)具有無毒與安全性高等優(yōu)點(diǎn),被廣泛應(yīng)用于水產(chǎn)品無水;钛芯恐小1疚耐ㄟ^低溫與CO2聯(lián)合脅迫凡納濱對(duì)蝦研究其無水;罴夹g(shù),首先采用響應(yīng)面方法對(duì)凡納濱對(duì)蝦無水;钭罴烟幚?xiàng)l件進(jìn)行優(yōu)化,然后對(duì)凡納濱對(duì)蝦無水;钸^程中的糖酵解關(guān)鍵酶以及相關(guān)免疫指標(biāo)進(jìn)行測定,最后利用差異蛋白質(zhì)組學(xué)對(duì)凡納濱對(duì)蝦保活過程中肌肉蛋白的表達(dá)變化進(jìn)行研究。主要研究內(nèi)容及結(jié)果如下:(1)通過Box-Bohnken設(shè)計(jì)3因素3水平的響應(yīng)面試驗(yàn),研究初始溫度(A)、CO2濃度(B)、;顣r(shí)間(C)等因素對(duì)凡納濱對(duì)蝦無水保活存活率的影響。結(jié)果表明,溫度與p H之間的交互作用對(duì)凡納濱對(duì)蝦無水;畲婊盥实挠绊戯@著(p0.05),溫度與保活時(shí)間、p H和;顣r(shí)間之間的交互作用對(duì)凡納濱對(duì)蝦無水;畲婊盥视绊懖伙@著(p0.05);在保活時(shí)間為8 h的條件下,最佳無水;钐幚?xiàng)l件是:溫度為18.2℃,p H 6.08,存活率為86.4%,所得實(shí)際值與理論值的誤差為4.63%。(2)使用比色法與細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測定未處理(對(duì)照)、無水;詈蛷(fù)蘇3種狀態(tài)下,凡納濱對(duì)蝦葡萄糖(Glu)、乳酸(LD)及鰓中3種糖酵解關(guān)鍵酶、有氧代謝和無氧代謝關(guān)鍵酶、免疫相關(guān)酶及血淋巴細(xì)胞總數(shù)(THC)變化。結(jié)果顯示:無水保活中對(duì)蝦Glu濃度低于對(duì)照組,LD濃度則顯著高于對(duì)照組;己糖激酶(HK)、果糖磷酸激酶(PFK)和丙酮酸激酶(PK)這3種糖酵解關(guān)鍵酶活力均高于對(duì)照組;反映有氧代謝水平的琥珀酸脫氫酶(SDH)活力持續(xù)降低,代謝無氧代謝水平的乳酸脫氫酶(LDH)則相反;對(duì)蝦THC隨著;顣r(shí)間延長下降,超氧化歧化酶(SOD)和過氧化物酶(POD)活力不斷上升。復(fù)蘇后,HK、PK、SOD和POD恢復(fù)到對(duì)照組水平,Glu、LD、PFK、SDH、LDH和THC均與對(duì)照有顯著差異。無水;钸^程中,凡納濱對(duì)蝦糖酵解加快以及無氧代謝加強(qiáng),同時(shí)體液免疫功正常發(fā)揮作用,無水保活8 h未造成其代謝及免疫功能紊亂。(3)采用同位素標(biāo)記相對(duì)和絕對(duì)定量(iTRAQ)技術(shù)對(duì);钋昂蟮姆布{濱對(duì)蝦肌肉進(jìn)行定量蛋白質(zhì)組學(xué)研究。提取的肌肉蛋白質(zhì)樣品經(jīng)FASP酶解、同位素標(biāo)記、第一維p H-RPLC分離、第二維RPLC-MS分離分析,獲取的串聯(lián)質(zhì)譜數(shù)據(jù)通過Protein Pilot 5.0軟件搜庫進(jìn)行蛋白質(zhì)鑒定,通過蛋白質(zhì)相對(duì)定量的比較尋找差異表達(dá)蛋白;再對(duì)差異蛋白質(zhì)進(jìn)行GO、KEGG代謝通路分析。實(shí)驗(yàn)共鑒定具有定量信息蛋白質(zhì)2670個(gè);與對(duì)照組相比,實(shí)驗(yàn)組上調(diào)蛋白質(zhì)150個(gè),下調(diào)蛋白質(zhì)20個(gè);經(jīng)過生物信息學(xué)分析得到26個(gè)目標(biāo)差異蛋白,主要分為6類:與糖原分解、糖酵解、TCA循環(huán)、氧化磷酸化、ATP分解與合成以及與應(yīng)激相關(guān)的蛋白。結(jié)果顯示:相對(duì)于對(duì)照組,實(shí)驗(yàn)組中與糖原分解相關(guān)的6種蛋白質(zhì)表達(dá)均為上調(diào),與糖酵解相關(guān)的種蛋白質(zhì)表達(dá)呈現(xiàn)上調(diào)趨勢,與TCA循環(huán)以及氧化磷酸化相關(guān)的12種蛋白質(zhì)表達(dá)均為下調(diào),與免疫應(yīng)激相關(guān)的4種蛋白表達(dá)量上調(diào)。由此可知無水;钸^程中凡納濱對(duì)蝦有氧代謝減弱,無氧代謝占主導(dǎo)地位,機(jī)體抵抗不良環(huán)境的能力得到了增強(qiáng)。
【學(xué)位授予單位】:廣東海洋大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2018
【分類號(hào)】:TS254.4
【圖文】:

保活,無水,存活率,響應(yīng)面


究日本對(duì)蝦無水;钸\(yùn)輸,依然是采用低溫休眠處理后充氧包裝運(yùn)輸,經(jīng)(10~1h ,存活率高達(dá) 90%以上[4],在相對(duì)濕度較高的環(huán)境進(jìn)行無水;,時(shí)間會(huì)更長、活率更高[78]。這可能是不同種類蝦的生理構(gòu)造存在差異,抗逆能力不同,對(duì)環(huán)的適應(yīng)能力不同。凡納濱對(duì)蝦甲殼薄,對(duì)外界應(yīng)激較為敏感,使得凡納濱對(duì)蝦無水;顣r(shí)間相對(duì)較短,存活率較低。周翠平[74]研究羅非魚 CO2麻醉無水;钪,根據(jù)正交試驗(yàn)所得的最佳條蝦下進(jìn)行處理,羅非魚無水; 5 h 的存活率為 100%。人工養(yǎng)殖的鯽魚經(jīng)使丁香酚麻醉后在低溫(8 ℃)下進(jìn)行無水保活 38 h 后的復(fù)活率為 100%,40 h 復(fù)活率為 88.89%,42 h 的復(fù)活率為,77.78%[13]。低溫脅迫黃顙魚休眠后在 2充氧條件下可無水; 24 h,丁香酚麻醉后,在 2℃充氧條件下,無水;羁36 h[15]。這些魚類;顣r(shí)間長,存活率高,可能是因?yàn)椋?)這些魚類的;钣诤愣ǖ蜏叵逻M(jìn)行保活,其代謝速率減緩,體內(nèi)的能量物質(zhì)消耗減慢。本實(shí)驗(yàn)保活條件的溫度較高,對(duì)蝦代謝速率較高,能量物質(zhì)消耗得快。(2)魚的呼與蝦的呼吸方式有差異,除了通過鰓呼吸,還有其他呼吸器官輔助從空氣吸取氣。

等高線圖,;,響應(yīng)面,無水


圖 2-2 溫度與;顣r(shí)間對(duì)凡納濱對(duì)蝦無水保活存活率影響的等高線圖(左)和響應(yīng)面圖(右Fig. 2-2 Contour plot (left) and three-dimensiona curved surface (right) for effect ofwaterless-transportion duration and temperature on survival rate圖 2-3 保活時(shí)間與 pH 對(duì)凡納濱對(duì)蝦無水;畲婊盥视绊懙牡雀呔圖(左)和響應(yīng)面圖(右Fig. 2-3 Contour plot (left) and three-dimensiona curved surface (right) for effect ofwaterless-transportion duration and pH on survival rate2.2.3 驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果

等高線圖,;,響應(yīng)面,無水


低溫與二氧化碳聯(lián)合脅迫凡納濱對(duì)蝦無水保活技術(shù)研究圖 2-2 溫度與;顣r(shí)間對(duì)凡納濱對(duì)蝦無水;畲婊盥视绊懙牡雀呔圖(左)和響應(yīng)面圖(右Fig. 2-2 Contour plot (left) and three-dimensiona curved surface (right) for effect ofwaterless-transportion duration and temperature on survival rate

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):2775912

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