【摘要】：目的：在觀察麥粒灸“腎俞”,“足三里”對SD大鼠RA模型抗炎治療效應(yīng)基礎(chǔ)上,以慢病毒介導的IL-17A基因過表達為干預研究手段,探究麥粒灸治療RA的抗炎效應(yīng)機制,為麥粒灸治療RA的I臨床應(yīng)用提供更豐富的實驗依據(jù)。方法：以弗氏完全佐劑性關(guān)節(jié)炎作為類風濕關(guān)節(jié)炎大鼠模型,適應(yīng)性馴養(yǎng)3周后,用SPSS統(tǒng)計軟件將54只大鼠隨機分為空白組、空白艾灸組、RA組、RA艾灸組、IL-17 ↑組,IL-17 ↑艾灸組,除空白組及空白艾灸組外,均用弗氏完全佐劑造模,IL-17 ↑組、IL-17↑艾灸組在RA造模后第1天注射IL-17A基因過表達慢病毒試劑,麥粒灸實驗性RA大鼠的“腎俞”、“足三里”穴,記錄屈伸關(guān)節(jié)疼痛試驗評分(縮腿嘶鳴評分),測量大鼠右后足腫脹程度；并在療程結(jié)束后用10%水合氯醛0.35m1/100g進行腹腔麻醉,將大鼠活體取材：大鼠股動脈取血,運用ELASA(酶聯(lián)免疫吸附實驗)方法測量各組大鼠血清中細胞因子IL-1b、TNF-a、IL-17A含量；取患側(cè)踝關(guān)節(jié)組織,運用PCR(聚合酶鏈式反應(yīng))方法測量大鼠致炎側(cè)踝關(guān)節(jié)IL-17-mRNA表達量,運用WB(免疫印記法)測量IKβ-zeta蛋白活性,整個實驗均按照實驗倫理學規(guī)定進行。結(jié)果：1.造模后RA組大鼠屈關(guān)節(jié)疼痛實驗評分及足趾腫脹度明顯上升,麥粒灸治療后屈關(guān)節(jié)疼痛實驗評分及足趾腫脹度降低。2.①類風濕關(guān)節(jié)炎大鼠血清中IL-1b、TNF-a、IL-17含量及患側(cè)踝關(guān)節(jié)IL-17-mRNA表達量較空白組明顯增加(P0.01)；經(jīng)過21天治療后,空白艾灸組與空白組血清中IL-lb、 TNF-a、IL-17含量及患側(cè)踝關(guān)節(jié)IL-17-mRNA表達量比較兩組之間無顯著性差異(P0.05)；RA艾灸組與RA組比較,RA艾灸組IL-lb、TNF-a、IL-17含量及忠側(cè)踝關(guān)節(jié)IL-17-mRNA表達量顯著降低(P0.01)；②類風濕關(guān)節(jié)炎大鼠血清中IKβ-zeta蛋白活性較空白組明顯降低(P0.01)；經(jīng)過21天治療后,空白艾灸組與空白組IKβ-zeta蛋白活性比較,兩組之間無明顯差異；RA艾灸組與RA組比較,RA艾灸組IKβ-zeta蛋白活性顯著升高。3.①IL-17 ↑組與模型組比較,IL-17 ↑組IL-lb、TNF-a、IL-17含量及患側(cè)踝關(guān)節(jié)IL-17-mRNA表達量顯著升高(P0.01),IL-17 ↑艾灸組與IL-17 ↑組比較,IL-17 ↑艾灸組IL-lb、TNF-a、IL-17含量及患側(cè)踝關(guān)節(jié)IL-17-mRNA表達量顯著降低(P0.01)。②IL-17↑組與模型組比較,IL-17↑組IKβ-zeta蛋白活性顯著降低,IL-17 ↑艾灸組與IL-17 ↑組比較,IL-17 ↑艾灸組IKβ-zeta蛋白活性明顯升高。結(jié)論：1.麥粒灸可以降低屈關(guān)節(jié)疼痛實驗評分及減輕佐劑關(guān)節(jié)炎大鼠的足趾腫脹度,提示麥粒灸對實驗性RA大鼠有抗炎鎮(zhèn)痛消腫的治療作用。2.①麥粒灸可以降低RA大鼠血清中IL-lb、TNF-a、IL-17水平及患側(cè)踝關(guān)節(jié)IL-17-mRNA表達量,減少早期多種炎性因子的釋放從而減輕滑膜炎癥,改善局部癥狀。②麥粒灸可以增強RA大鼠患側(cè)踝關(guān)節(jié)IKβ-zeta蛋白活性,提示艾灸可以增強IKβ-zeta的抗炎效應(yīng)。3.①麥粒灸可以降低IL-17A過表達RA大鼠血清中IL-lb、TNF-a、IL-17含量及患側(cè)踝關(guān)節(jié)IL-17-mRNA表達量,提示麥粒灸可以通過抑制IL-17釋放,進而降低血清中IL-1b、TNF-a致炎細胞因子水平,進而達到抗炎效應(yīng)。②麥粒灸可以增強IL-17過表達RA大鼠患側(cè)踝關(guān)節(jié)IKβ-zeta蛋白活性,提示艾灸可以通過抑制IL-17釋放增強IKβ-zeta的表達。
【學位授予單位】：南京中醫(yī)藥大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R245
【圖文】：

逡逑圖１．２致炎側(cè)足趾縮腿嘶鳴評分折線圖逡逑１６．００逡逑１４．００邐Ｊ逡逑：：邐邐邐邐逡逑（２．００）邐Ｉ邐５邐１２邐２０邐２６逡逑（４．００）逡逑—空白一＊—ＲＡ邋—ＩＬ－１７邋過一？—ＩＬ－１７邋過艾逡逑表１，圖１．１可知大鼠經(jīng)ＦＣＡ致敏后第５天，各實驗組縮腿嘶鳴評分與空白組比較己逡逑明顯升高（Ｐ＜邋０．０１），麥粒灸治療第３天，ＲＡ模型組足趾縮腿嘶鳴評分繼續(xù)升高，ＲＡ艾逡逑灸組則明顯下降，兩組組間有非常顯著性差異（Ｐ＜０．０１），治療第１１天ＲＡ模型組足趾縮逡逑腿嘶鳴評分下降，治療第１７天ＲＡ模型組縮腿嘶鳴評分繼續(xù)回升，而ＲＡ艾灸組在治療逡逑第ｎ天、第１７天趨于穩(wěn)定，其中治療第１７天ＲＡ模型組與ＲＡ艾灸組間有非常明顯差逡逑異（Ｐ＜０．０１），ＲＡ艾灸組與空白組間有顯著性差異（Ｐ＜＾０５），提示麥粒灸在本實驗弗氏逡逑佐劑關(guān)節(jié)炎早期及后期有降低關(guān)節(jié)炎疼痛作用，在后期麥粒灸效果趨于穩(wěn)定。逡逑表１

注：與空白組比較，＆Ｐ＜0．0５，邋＆＆Ｐ＜０．０１，與ＲＡ模型組比較，巧＜０．０５，邋＊＊Ｐ＜０．０１，與正－１７逡逑Ｉ邋組比較，＃Ｐ＜０．０５，邋＃＃Ｐ＜０．０１。逡逑圖３各組大鼠血清正－ｌｂ邋（ｐｍｏｌ／Ｌ）含量比較逡逑４００．００邐邐逡逑巧咕盛扣：強ｊｉ巧巧姐巧；；；堪；巧ｊ．；．；。竭；：３！吊；巧ｌｉ記立吊：試逡逑３５０．００邋；｜b\0灥感ｉ墖b\0ｉ灥媝闃o姦廮

本文編號：2770593