【摘要】：目的:通過建立小鼠腦缺血再灌注模型,探究枸杞葉總黃酮對小鼠腦缺血再灌注的保護作用,并從其抗氧化活性和對ATP酶活性影響方面探討可能機制,以期為枸杞葉總黃酮作為保護腦缺血藥物的應用提供藥理學的參考。方法:出生2月齡的60只健康雄性昆明小鼠,隨機分為6個小組(每組10只),假手術組、模型組、枸杞葉總黃酮低劑量組(30mg/kg)、枸杞葉總黃酮中劑量組(100mg/kg)、枸杞葉總黃酮高劑量組(300mg/kg)和尼莫地平組(20mg/kg)。枸杞葉總黃酮組和尼莫地平組小鼠灌胃給藥(0.1ml/10g),假手術組、模型組小鼠給予雙蒸水(0.1ml/10g),每天一次,連續(xù)給藥十四天后,小鼠用10%的水合氯醛腹腔注射麻醉后進行雙側頸總動脈結扎,缺血15分鐘后復灌10分鐘,再缺血15分鐘復灌24小時后處死,取腦稱重,計算腦指數(shù),然后在110℃烤至恒重,計算腦含水量。通過試劑盒檢測小鼠腦組織中SOD活性、MDA含量及Na~+-K~+-ATP酶和Ca~(2+)-ATP酶的活性。通過HE染色觀察大腦皮質及海馬CA1區(qū)的神經(jīng)元形態(tài)學變化。結果:1.枸杞葉總黃酮對小鼠缺血再灌注后腦指數(shù)和腦含水量的影響:在腦缺血再灌注模型中,高劑量的枸杞葉總黃酮能夠有效降低小鼠的腦指數(shù)和腦含水量(與模型組相比,P0.05,n=10)。2.枸杞葉總黃酮對小鼠缺血再灌注后大腦脂質過氧化程度的影響:假手術組SOD活力和MDA含量水平分別為110±3.9Uml和6.1±0.4nmol/ml。模型組腦組織的SOD活力降低至99.7±4.1Uml(與假手術組相比P0.05,n=10),MDA含量水平升高至9.9±0.9 nmol/ml(與假手術組相比P0.05,n=10)。高劑量的枸杞葉總黃酮預處理后能顯著減輕大腦的脂質過氧化程度,小鼠腦組織內(nèi)的SOD活性明顯提高(與模型組相比,P0.05,n=10),MDA的含量水平降低(與模型組相比,P0.05,n=10)。3.枸杞葉總黃酮對小鼠缺血再灌注后腦組織中Na~+-K~+-ATP酶、Ca~(2+)-ATP酶的影響:假手術組Na~+-K~+-ATP酶、Ca~(2+)-ATP酶水平分別為1.77±0.50μmol/mgprot/h和1.85±0.47μmol/mgprot/h。模型組腦組織的Na~+-K~+-ATP酶活力降低至1.07±0.30μmol/mgprot/h(與假手術組相比P0.05,n=10),Ca~(2+)-ATP酶活力降低至1.16±0.27μmol/mgprot/h(與假手術組相比P0.05,n=10)。高劑量的枸杞葉總黃酮預處理后能顯著抑制Na~+-K~+-ATP酶、Ca~(2+)-ATP酶活性下降(與模型組相比,P0.05,n=10)。4.枸杞葉總黃酮對缺血再灌注小鼠大腦皮質以及海馬神經(jīng)元形態(tài)學的影響:小鼠雙側頸總動脈結扎(2VO)缺血15分鐘再灌注24小時后,取小鼠腦組織進行HE染色發(fā)現(xiàn)模型組的小鼠大腦皮質及海馬CA1區(qū)神經(jīng)元有明顯的損害,可觀察到細胞核濃縮、核消失、神經(jīng)元缺失等現(xiàn)象,正常的神經(jīng)元數(shù)目減少。枸杞葉總黃酮預處理后則明顯減輕了大腦皮質及海馬CA1區(qū)神經(jīng)元的損傷情況。結論:枸杞葉總黃酮對于腦缺血具有保護作用,能夠有效減輕腦缺血再灌注所引起的神經(jīng)元損傷。其腦缺血的保護作用機制可能與提高機體抗氧化應激水平、保護腦組織ATP酶活性和改善離子轉運有關。
【學位授予單位】：蘭州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R285.5

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本文編號：2767294