本文關(guān)鍵詞：孕中晚期嗎啡暴露對子代成年大鼠成癮易感性影響及其伏隔核內(nèi)Netrin-1和TH的表達(dá)，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:產(chǎn)前嗎啡暴露往往會(huì)導(dǎo)致生理上和神經(jīng)生物學(xué)的改變包括大腦重量和體重的降低、認(rèn)知障礙和行為學(xué)改變。一些研究表明產(chǎn)前嗎啡暴露可導(dǎo)致子代對精神類藥物更加易感。妊娠12到18天暴露于鎮(zhèn)痛劑量的嗎啡會(huì)增加子代成年雄性大鼠伏隔核和杏仁核細(xì)胞核內(nèi)阿片受體的密度。無論是伏隔核還是杏仁核都可通過中腦邊緣多巴胺系統(tǒng)系統(tǒng)對調(diào)節(jié)藥物的獎(jiǎng)賞效應(yīng)有重要的作用。因此,我們得出假說:產(chǎn)前嗎啡暴露會(huì)導(dǎo)致子代鼠成癮易感性增強(qiáng)。實(shí)驗(yàn)是通過對子代鼠進(jìn)行嗎啡注射或生理鹽水注射來進(jìn)行的。運(yùn)用條件位置偏愛實(shí)驗(yàn)來檢測子代鼠的成癮易感性。并通過檢測伏隔核內(nèi)Netrin-1和TH的含量來探究其神經(jīng)生物學(xué)機(jī)制。本實(shí)驗(yàn)的目的包括以下幾項(xiàng)(1)建立并完善大鼠孕中晚期嗎啡暴露模型;(2)研究孕中晚期嗎啡暴露對子代鼠的體重及死亡率的影響;(3)研究孕中晚期晚期嗎啡暴露對子代成年鼠成癮易感性的影響;(4)檢測孕中晚期嗎啡暴露的子代成年子代大鼠伏隔核內(nèi)神經(jīng)軸突導(dǎo)向因子(Netrin-1)和酪氨酸羥化酶(TH)的含量,并和生理鹽水暴露組作出比較;(6)檢測CPP實(shí)驗(yàn)后子代鼠伏隔核內(nèi)神經(jīng)軸突導(dǎo)向因子(Netrin-1)和酪氨酸羥化酶(TH)的含量,并和生理鹽水組作出比較。探索孕中晚期嗎啡暴露導(dǎo)致子代鼠成年期成癮易感性增加的神經(jīng)化學(xué)機(jī)制。方法:將懷孕的SD大鼠隨機(jī)分為嗎啡暴露組(M組)和生理鹽水(N組)。M組孕鼠從孕12天到18天每天9:00AM及5:00PM各兩次皮下注射嗎啡,嗎啡的初始劑量為2mg/kg,以后每天遞增1mg/kg,直至5mg/kg維持。N組懷孕大鼠于同樣的時(shí)間點(diǎn)每天注射等容量的生理鹽水。(1)稱量兩組子代鼠出生時(shí)的體重、4周體重、8周體重并記錄出生后3天死亡率、4周死亡率、8周死亡率;(2)隨機(jī)從M組和組的子代鼠中各取16只,進(jìn)行條件位置偏愛實(shí)驗(yàn)(CPP):1)實(shí)驗(yàn)前三天讓大鼠在CPP箱內(nèi)每天自由活動(dòng)兩小時(shí),以適應(yīng)環(huán)境;2)第1-3天,每天讓大鼠在CPP箱內(nèi)自由活動(dòng)15min,檢測大鼠自然偏愛的一側(cè);3)第4-10天建立CPP和藥物注射,上午注射嗎啡,下午注射生理鹽水[嗎啡(3mg/kg,i.p.)/生理鹽水(1mg/kg,i.p)];4)第11天,檢測并記錄大鼠用藥后的位置偏愛;(3)M組N組子代鼠飼養(yǎng)至八周每組隨機(jī)取出8只大鼠,麻醉后斷頭取其伏隔核組織;(4)兩組子代鼠經(jīng)CPP檢測后分為兩組,即孕中晚期嗎啡暴露組子代大鼠(CPPM組),一組為孕中晚期生理鹽水暴露組子代大鼠(CPPN組)。每組隨機(jī)取出8只大鼠,麻醉后斷頭取其伏隔核組織;(5)Western-blot法檢測各組子代大鼠伏隔核內(nèi)Netrin-1和TH的含量(6)免疫熒光法檢測各組子代大鼠伏隔核內(nèi)Netrin-1和TH的含量。結(jié)果:(1)子代鼠出生體重M組小于N組(P0.01),M組子代雌雄鼠出生4周及8周體重均小于N組(P0.01)。子代鼠出生3天、4周、8周死亡率M組均明顯高于N組(P0.01)。(2)經(jīng)過連續(xù)注射7天的嗎啡后,M組子代鼠在伴藥側(cè)停留時(shí)間明顯延長(P0.01),而N組子代鼠在伴藥側(cè)停留時(shí)間明顯延長(P0.05)。(3)M組子代鼠伏隔核內(nèi)Netrin-1及TH的含量高于N組(P0.05)。(4)CPPM組子代鼠伏隔核內(nèi)Netrin-1及TH的含量高于CPPN組(P0.05)。結(jié)論:(1)孕中晚期嗎啡暴露會(huì)導(dǎo)致不同年齡段子代鼠體重減輕而且會(huì)增加子代鼠生長發(fā)育過程中各個(gè)時(shí)期的的死亡率。(2)孕中晚期嗎啡暴露可增加子代鼠的成癮易感性。(3)孕中晚期嗎啡暴露導(dǎo)致子代鼠成年期成癮易感性增加可能與其伏隔核內(nèi)Netrin-1和TH含量增加有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：嗎啡暴露 子代 體重 死亡率 Netrin-1 TH CPP
【學(xué)位授予單位】：皖南醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R614
【目錄】：

• 英文縮略詞5-8
• 摘要8-10
• Abstract10-13
• 前言13-18
• 材料與方法18-27
• 1. 研究材料18-21
• 1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物18-19
• 1.2 主要實(shí)驗(yàn)藥物試劑19-20
• 1.3 主要儀器20-21
• 2. 實(shí)驗(yàn)方法21-26
• 2.1 孕中晚期嗎啡暴露對子代鼠體重及死亡率影響21
• 2.1.1 孕中晚期嗎啡暴露模型建立21
• 2.1.2 測量子代鼠體重并計(jì)算死亡率21
• 2.2 條件位置偏愛實(shí)驗(yàn)21-22
• 2.2.1 實(shí)驗(yàn)裝置21-22
• 2.2.2 實(shí)驗(yàn)過程22
• 2.3 Western-blot法檢測子代成年鼠伏隔核內(nèi)Netrin-1 及TH表達(dá)22-24
• 2.3.1 實(shí)驗(yàn)過程22-23
• 2.3.2 提取蛋白23
• 2.3.3 Western操作流程23-24
• 2.4 免疫熒光法檢測子代成年鼠伏隔核內(nèi)Netrin-1 及TH表達(dá)24-26
• 2.4.1 制作伏隔核標(biāo)本24-25
• 2.4.2 免疫熒光步驟25-26
• 3 統(tǒng)計(jì)方法26-27
• 結(jié)果27-38
• 1 孕中晚期嗎啡暴露對子代鼠體重及死亡率的影響27-28
• 2 孕中晚期嗎啡暴露對子代成年大鼠CPP實(shí)驗(yàn)的影響28-30
• 3 孕中晚期嗎啡暴露子代鼠成年期伏隔核內(nèi)Netrin-1 和TH表達(dá)30-38
• 3.1Western-blot結(jié)果30-34
• 3.2 免疫熒光結(jié)果34-38
• 討論38-45
• 結(jié)論45-46
• 參考文獻(xiàn)46-55
• 綜述55-67
• 參考文獻(xiàn)62-67
• 作者簡介及讀研期間主要科研成果67-68
• 感謝68

  本文關(guān)鍵詞：孕中晚期嗎啡暴露對子代成年大鼠成癮易感性影響及其伏隔核內(nèi)Netrin-1和TH的表達(dá)，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號(hào)：269996