痛瀉要方對腹瀉型腸易激綜合征模型大鼠血清5-HT及VIP含量的影響
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【摘要】:目的:腹瀉型腸易激綜合征(IBS-D)是臨床上常見的胃腸功能紊亂性疾病,中醫(yī)在其辨證論治上獨具優(yōu)勢。肝郁脾虛證是常見中醫(yī)證型,采用痛瀉要方治療本病在臨床上應(yīng)用廣泛。目前實驗研究缺乏公認(rèn)的中醫(yī)證型動物模型,成功建立中醫(yī)肝郁脾虛證型IBS-D模型是治療該疾病的首要前提;大量的臨床研究已經(jīng)證實痛瀉要方治療IBS-D有效,但缺乏深入的中醫(yī)理論實驗研究。本研究為中醫(yī)證候模型的制備及痛瀉要方治療IBS-D提供實驗支持,并進(jìn)一步完善腸易激綜合征的理論研究,為臨床治療選藥提供理論和實驗支持。方法:選用健康SPF級SD大鼠120只,雌雄各半,8周齡,體重190±l0g。適應(yīng)性飼養(yǎng)一周后,隨機(jī)抽取12只(雌雄各半)作為正常組(N);余下大鼠開始造模。結(jié)合呂紅等、譚潔等描述的造模方法,采用慢性多因素不可預(yù)見性應(yīng)激聯(lián)合高脂高糖高熱飲食、高溫高濕環(huán)境建立起接近臨床患者病癥的中醫(yī)肝郁脾虛IBS-D大鼠模型。選用大鼠一般狀態(tài)及體重變化情況、糞便性狀評分、痛閾值和腸道敏感性、敞箱行為評分以及糖水偏嗜度作為鑒定模型成功的標(biāo)準(zhǔn)。按照以上四項綜合積分排序,選用符合標(biāo)準(zhǔn)的大鼠隨機(jī)分為模型組(M)、痛瀉要方7天治療組(T7)、雙歧桿菌7天治療組(B7)、痛瀉要方14天治療組(T14)、雙歧桿菌14天治療組(B14),每組12只(雌雄各半)。藥物干預(yù):N組、M組,每日均給予同等容量生理鹽水灌胃,連續(xù)14天;T,組給予痛瀉要方水煎液(7.5g/kg. d-1)灌胃,連續(xù)7天;B7組每日給予雙歧桿菌混懸液(2×107CFU/ml.d-1)灌胃,連續(xù)7天;T14組給予痛瀉要方水煎液(7.5g/kg. d-1)灌胃,連續(xù)14天;B14組每日給予雙歧桿菌混懸液(2×107CFU/ml. d-1)灌胃,連續(xù)14天。樣本取材及處理:治療結(jié)束后,水合氯醛麻醉大鼠,心臟取血,3000r/10min離心取上清液,采用酶聯(lián)免疫法測試血清5-HT和VIP的含量變化。實驗過程中所得數(shù)據(jù)均采用SPSS17.0進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析,計量資料滿足正態(tài)性分布,所得數(shù)據(jù)采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示:多組間比較運用單因素方差分析,方差齊性組間比較用LSD法,方差不齊時組間比較用DunnettT3法。結(jié)果:1、大鼠一般狀態(tài):大鼠造模前,其毛色光滑,反應(yīng)迅速敏捷,精神佳,大便正常。造模結(jié)束后,與正常組比較,模型組大鼠毛色欠光澤,甚至有豎毛、活動量減少、食欲減退、喜蜷縮、扎堆、反應(yīng)遲緩,大便變軟或不成形,肛門部或有糞便污物附著等。治療結(jié)束后,與模型組比較,痛瀉藥方組及雙歧桿菌組大鼠一般狀態(tài)均有較大的改善,食欲增強(qiáng)、活動力增加、反應(yīng)相對靈敏,稀便減少或有成型。2、體重變化情況:(1)造模結(jié)束后,與正常組比較,模型組大鼠體重增長緩慢,體重增長有統(tǒng)計學(xué)差異(p=0.00,p0.05)。(2)7天治療結(jié)束后,與正常組比較,模型組有顯著統(tǒng)計學(xué)差異(p=0.00,p0.01),痛瀉要方組及雙歧桿菌組有統(tǒng)計學(xué)差異(p=0.04,0.02,p0.05);與模型組比較,痛瀉要方組及雙歧桿菌組無統(tǒng)計學(xué)差異(p0.05);與痛瀉要方組比較,雙歧桿菌組無統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05)。(3)14天治療結(jié)束后,與正常組比較,模型組有顯著統(tǒng)計學(xué)差異(p=0.00,p0.01),痛瀉要方組及雙歧桿菌組無統(tǒng)計學(xué)差異(p=0.06,0.07,p0.05);與模型組比較,痛瀉要方組和雙歧桿菌組體重增長較快,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05);與痛瀉要方組比較,雙歧桿菌組無統(tǒng)計學(xué)差異(p0.05)。3、大鼠模型鑒定結(jié)果:(1)造模期間大鼠體重變化:造模14天以后,模型組體重增長緩慢。與正常組比較,模型組體重開有統(tǒng)計學(xué)差異(p=0.02,p0.05);造模第28天,與正常組比較,各模型組大鼠體重均有顯著統(tǒng)計學(xué)差異(p=0.00,p0.01)。(2)大鼠糞便性狀評分的變化:造模結(jié)束后,各模型組大鼠糞便性狀積分值顯著高于正常對照組(p=0.00);與正常對照組比較,各模型對照組差異有顯著性統(tǒng)計學(xué)意義(p0.01)。(3)大鼠痛閾值及腸道敏感性變化:造模結(jié)束后,各模型對照組大鼠痛閾值降低,腸道敏感性增高(p=0.00);與正常對照組比較,差異有顯著性統(tǒng)計學(xué)意義(p0.01)。(4)敝箱實驗評分結(jié)果:造模結(jié)束后,各模型組大鼠敞箱運動分值降低(p=0.00);與正常組比較,差異有顯著性統(tǒng)計學(xué)意義(p0.01)。(5)糖水偏嗜度變化:造模結(jié)束后,各模型組大鼠糖水?dāng)z取量降低(p=0.00);與正常組比較,糖水偏嗜度有顯著性統(tǒng)計學(xué)差異(p0.01)。4、大鼠血清5-HT及VIP含量的變化:(1)7天治療結(jié)束后,各組大鼠血清5-HT、VIP的含量變化:正常組最低,模型組最高。與正常組比較,模型組、痛瀉要方組及雙歧桿菌組5-HT、VIP含量有顯著統(tǒng)計學(xué)差異(p0.01);與模型組比較,痛瀉要方組及雙歧桿菌組無統(tǒng)計學(xué)差異(p0.05);與痛瀉要方組比較,雙歧桿菌組無統(tǒng)計學(xué)差異(p0.05)。(2)治療14天結(jié)束后,各組大鼠血清5-HT、VIP含量變化:模型組最高,痛瀉要方組和雙歧桿菌組接近正常組。與正常組比較,模型組5-HT、VIP含量有顯著統(tǒng)計學(xué)差異(p0.01);與模型組比較,雙歧桿菌組和痛瀉要方組血清5-HT、VIP含量降低,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05);與痛瀉要方組比較,雙歧桿菌組無統(tǒng)計學(xué)差異(p0.05)。結(jié)論:1、慢性輕度不可預(yù)見性應(yīng)激聯(lián)合高脂高糖高熱飲食、高溫高濕環(huán)境同步造?梢越儆谥嗅t(yī)證型的肝郁脾虛IBS-D動物模型。通過痛瀉要方治療IBS-D“以方測證”,中醫(yī)治療肝郁脾虛證IBS-D有效。2、本實驗研究發(fā)現(xiàn),在治療7天后,雙歧桿菌組及痛瀉要方組血清指標(biāo)5-HT、VIP濃度值仍高于正常組水平,接近模型組水平;在第14天治療后,痛瀉要方組及雙歧桿菌組血清指標(biāo)5-HT、VIP濃度值接近正常組水平。提示中醫(yī)痛瀉要方及雙歧桿菌治療IBS-D有效。
【關(guān)鍵詞】:腹瀉型腸易激綜合征(IBS-D) 痛瀉要方5羥色胺(5-HT) 血管活性腸肽(VIP)
【學(xué)位授予單位】:成都中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:R285.5
【目錄】:
- 中文摘要2-5
- Abstract5-9
- 英文縮略詞表9-12
- 引言12-20
- 1. 現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對腹瀉型腸易激綜合征的認(rèn)識12-15
- 1.1 腹瀉型腸易激綜合征(IBS-D)的病理因素12-14
- 1.2 西醫(yī)對腹瀉性腸易激綜合征(IBS-D)的治療14-15
- 2. 中醫(yī)對腹瀉型腸易激綜合征(IBS-D)的研究15-20
- 2.1 IBS-D的病因病機(jī)16-17
- 2.2 IBS-D的臨床研究17-18
- 2.3 IBS-D的治法治則18-20
- 材料與方法20-41
- 1 實驗材料20-24
- 1.1 實驗動物及飼料20
- 1.2 實驗藥物與試劑20-22
- 1.3 實驗儀器設(shè)備22
- 1.4 試劑配制22-23
- 1.5 實驗動物設(shè)施條件23
- 1.6 實驗平臺23-24
- 2 實驗方法24-31
- 2.1 大鼠動物模型24-28
- 2.2 實驗分組28-29
- 2.3 給藥方法29
- 2.4 樣本采集及處理29
- 2.5 樣本指標(biāo)檢測29-30
- 2.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計方法30-31
- 3 實驗結(jié)果31-41
- 3.1 IBS-D大鼠一般狀態(tài)31
- 3.2 IBS-D模型鑒定結(jié)果31-36
- 3.3 治療結(jié)束后,各組大鼠體重變化情況36-38
- 3.4 血清指標(biāo)檢測38-41
- 討論41-48
- 1 建立和評價IBS-D肝郁脾虛大鼠模型41-44
- 1.1 以中醫(yī)病因病機(jī)為背景建立的大鼠模型41-43
- 1.2 本研究大鼠肝郁脾虛模型制備43-44
- 2 中醫(yī)對痛瀉要方治療腸易激綜合征的認(rèn)識44-45
- 3 本實驗研究實驗室指標(biāo)選擇45-47
- 3.1 五-羥色胺(5-HT)45-46
- 3.2 血管活性腸肽(VIP)46-47
- 4 腸易激綜合征進(jìn)一步的研究47-48
- 結(jié)論48-49
- 問題與展望49-50
- 致謝50-51
- 參考文獻(xiàn)51-57
- 附件57-67
- 附件一:綜述57-64
- 參考文獻(xiàn)61-64
- 附件二:實驗圖片64-66
- 附件三:在讀期間公開發(fā)表的論著及取得的科研成果66-67
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本文編號:269809
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