本文關(guān)鍵詞：Mdx小鼠骨骼肌中炎癥反應和mpeg1的表達，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:進行性肌營養(yǎng)不良(progressive muscular dystrophy,PMD)是一組以進行性加重的肌無力、肌萎縮為主要臨床表現(xiàn)的遺傳性骨骼肌疾病的總稱。由于患者編碼肌細胞相關(guān)蛋白的基因變異,造成蛋白缺陷或功能障礙,導致肌細胞的完整性遭到破壞,其中Duchenne肌營養(yǎng)不良(Duchenne muscular dystrophy,DMD)在各類肌營養(yǎng)不良中發(fā)病率最高,約為1/3500男嬰,且無地域和種族間明顯差異。DMD是一種X連鎖隱性遺傳性疾病,其致病基因位于X染色體的Xp21區(qū),為編碼dystrophin蛋白的基因發(fā)生缺失、插入和點突變,dystrophin蛋白的功能缺失引起肌纖維的變性和壞死。女性多為致病基因攜帶者,發(fā)病者罕見,且癥狀較輕。DMD發(fā)病年齡偏小,起病隱襲,且病死率高,受到廣泛關(guān)注。目前關(guān)于DMD的發(fā)病機制尚不清楚,涉及到很多常見的機制,例如鈣離子內(nèi)流,炎癥細胞浸潤,促炎和促進纖維化細胞因子的激活,各種蛋白水解酶的活化,自噬的缺陷和細胞凋亡等。研究顯示局部的炎癥反應是肌肉纖維化和脂肪組織滲透的觸發(fā)點,最終導致肌細胞纖維化并由脂肪組織替代,失去功能。在炎癥反應中,巨噬細胞浸潤起著關(guān)鍵作用,如激活的巨噬細胞能產(chǎn)生NO來裂解肌細胞,同時作為主要的促炎因子,通過激活蛋白水解酶系統(tǒng)和抑制肌肉再生引起肌肉萎縮等。巨噬細胞表達基因1(Macrophage expressed gene 1,mpeg1)是首個被發(fā)現(xiàn)高表達于人類和鼠科動物巨噬細胞內(nèi)的基因。先前的實驗顯示在斑馬魚中轉(zhuǎn)入mpeg1基因后巨噬細胞系反應明顯增加,這就使得嗜中性粒細胞與巨噬細胞得以分別被研究,說明mpeg1特異性表達于巨噬細胞內(nèi)。C57BL/10Sc Sn Dmd mdx/JNju小鼠(X-linked muscular dystrophy mouse,X-連鎖肌萎縮小鼠,簡稱mdx小鼠)為編碼dystrophin蛋白的3185位基因自發(fā)突變,使該位點編碼谷氨酰胺的密碼子變成了終止密碼子,導致基因的表達提前終止,造成其編碼的蛋白縮短。該模型鼠與DMD患者有相同的遺傳基礎(chǔ),已經(jīng)被廣泛用于DMD研究的各個領(lǐng)域。本實驗欲通過組織化學染色方法觀察mdx小鼠不同骨骼肌的病理改變,利用基因芯片技術(shù)篩選與炎癥相關(guān)基因在疾病不同時期的動態(tài)表達,進一步通過實時定量PCR(q RT-PCR)技術(shù)觀察mpeg1在mdx小鼠及對照鼠中的表達。探討巨噬細胞相關(guān)性炎癥在mdx小鼠中的作用,進而通過抑制巨噬細胞相關(guān)性炎癥反應來改善肌肉質(zhì)量,為DMD提供新的治療靶點。方法:選取雄性C57BL/10Sc Sn-Dmdmdx/JNju鼠(購于南京大學模式動物研究所)為實驗組,對照組為雄性C57BL/6Sc Sn小鼠,根據(jù)年齡分為2w、4w、8w、12w。每組各時間點選取6只,3只用于常規(guī)組織化學染色,3只用于基因芯片檢測和q RT-PCR測定。以10%水合氯醛(350mg/Kg體重)腹腔注射麻醉,取小鼠股四頭肌、腓腸肌、脛骨前肌、肱二頭肌、心肌,進行包埋冰凍處理。設(shè)置切片厚度為8um,做連續(xù)切片。分別對冰凍切片行常規(guī)染色,包括HE染色、MGT染色、ACP染色觀察其光鏡下的形態(tài)學變化,總結(jié)mdx小鼠骨骼肌炎性病理變化;小鼠麻醉后,取小鼠股四頭肌迅速投入液氮冷凍,之后保存于-80℃冰箱,用于m RNA提取,基因芯片的檢測及mpeg1的q RT-PCR檢測,結(jié)果應用spss13.0對數(shù)據(jù)進行分析。結(jié)果:1利用常規(guī)組織化學方法,我們觀察到2w的mdx小鼠股四頭肌、腓腸肌、脛骨前肌和肱二頭肌中肌細胞大小基本一致,偶見高度濃染的肌纖維,未見肌細胞壞死,炎癥細胞浸潤;4w可見巨噬細胞吞噬現(xiàn)象散在分布,偶見小灶樣分布;8w時炎細胞浸潤灶融合成片,12w時炎性病灶面積減小;mdx小鼠心肌中未見到變性、壞死和炎細胞浸潤;同齡對照鼠各骨骼肌中未見上述病理改變;2利用基因芯片技術(shù)對mdx小鼠股四頭肌進行m RNA測定,篩選出有關(guān)炎癥反應的基因30余個,結(jié)果顯示與2w相比,炎癥反應相關(guān)基因隨疾病進展表達量增加,在8w時達到峰值,12w有所下降,但較2w時仍有升高,差別具有統(tǒng)計學意義(P0.05);3利用q RT-PCR技術(shù)對mpeg1基因進行定量分析,結(jié)果顯示在2w時,mdx小鼠與對照鼠之間mpeg1的含量無差別;從4w開始,mdx小鼠中mpeg1的含量逐漸增加,8w時含量最高,與對照鼠同周齡間差別有統(tǒng)計學意義(P0.05),但mdx小鼠4w、8w、12w之間表達量差別無統(tǒng)計學意義;而對照鼠各周齡間差別無統(tǒng)計學意義;結(jié)論:1炎癥反應參與mdx小鼠疾病的發(fā)生發(fā)展:從2周開始出現(xiàn),8周達到高峰,12周趨于平穩(wěn);2 Mpeg1在mdx小鼠炎癥反應中發(fā)揮了一定的作用。
【關(guān)鍵詞】：Duchenne肌營養(yǎng)不良 mdx小鼠 炎癥反應 病理特點 基因芯片 mpeg1
【學位授予單位】：河北醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R746.2
【目錄】：

• 中文摘要4-7
• 英文摘要7-11
• 英文縮寫11-12
• 前言12-13
• 材料與方法13-18
• 結(jié)果18-20
• 附圖20-25
• 附表25-26
• 討論26-30
• 結(jié)論30
• 參考文獻30-35
• 綜述 肌營養(yǎng)不良的發(fā)病機制35-48
• 參考文獻41-48
• 致謝48-49
• 個人簡歷49

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 ;我國科學家發(fā)現(xiàn)調(diào)節(jié)人體炎癥反應新機制[J];中國科技產(chǎn)業(yè);2007年08期

2 ;健康老人抑郁癥狀與炎癥反應相關(guān)[J];浙江中西醫(yī)結(jié)合雜志;2010年04期

3 唐宏;;炎癥反應 中國科學家談科學[J];科學觀察;2009年04期

4 張熒熒;李淵越;韓家淮;;炎癥反應,健康衛(wèi)士還是癌癥幫兇?[J];中國基礎(chǔ)科學;2012年02期

5 ;發(fā)展炎癥反應概念——哺乳動物抗菌肽及其基因表達調(diào)控研究[J];中國病理生理雜志;2001年08期

6 段金成;丁志峰;和紅兵;;炎癥反應介質(zhì)對炎癥影響機制的探討[J];昆明醫(yī)學院學報;2009年S2期

7 彭代智;;燒傷后炎癥反應的病因、分子機制及防治對策[J];中華燒傷雜志;2005年06期

8 李成龍;屠偉峰;;炎癥反應在胃黏膜防御中的作用[J];實用醫(yī)學雜志;2008年03期

9 趙紅梅;阮海華;;不同鹽離子對單核細胞炎癥反應的影響[J];安徽農(nóng)業(yè)科學;2011年10期

10 吳錦鴻;許國根;徐芝君;徐遠勝;顧清;;全身炎癥反應綜合征患者血小板活化與炎癥反應的相關(guān)性研究[J];全科醫(yī)學臨床與教育;2011年03期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 姜勇;;炎癥反應的研究現(xiàn)狀與未來[A];中國病理生理學會受體、腫瘤和免疫專業(yè)委員會聯(lián)合學術(shù)會議論文匯編[C];2010年

2 歐陽文;何慧娟;王意;;圍術(shù)期炎癥反應與術(shù)后認知功能障礙(英文)[A];中華醫(yī)學會第二十次全國麻醉學術(shù)年會論文匯編[C];2012年

3 張衛(wèi)茹;侯凡凡;劉尚喜;郭志堅;周展眉;;晚期糖基化終產(chǎn)物增加動脈粥樣硬化部位的炎癥反應[A];“中華醫(yī)學會腎臟病學分會2004年年會”暨“第二屆全國中青年腎臟病學術(shù)會議”論文匯編[C];2004年

4 濮紅梅;尹忠誠;劉秉成;李勝開;馮錦紅;;血液透析患者血清IL-10與炎癥反應及營養(yǎng)狀況的關(guān)系研究[A];中華醫(yī)學會腎臟病學分會2006年學術(shù)年會論文集[C];2006年

5 陸志偉;黃慧;姜純國;徐作軍;;輔助性T淋巴細胞與特發(fā)性肺間質(zhì)纖維化關(guān)系的初步研究[A];中華醫(yī)學會呼吸病學年會——2011（第十二次全國呼吸病學學術(shù)會議）論文匯編[C];2011年

6 俞佳;王仲;;內(nèi)源性氣體信號分子硫化氫與炎癥反應[A];中華醫(yī)學會急診醫(yī)學分會第十三次全國急診醫(yī)學學術(shù)年會大會論文集[C];2010年

7 周曉艷;徐營營;謝兆宏;許繼平;畢建忠;;炎癥反應與神經(jīng)系統(tǒng)變性疾病的研究進展[A];2011全國老年癡呆與衰老相關(guān)疾病學術(shù)會議第三屆山東省神經(jīng)內(nèi)科醫(yī)師（學術(shù)）論壇論文匯編[C];2011年

8 張會云;崔克亮;曹書華;;炎癥反應,凝血機制與MODS的發(fā)病機理的關(guān)系[A];中華醫(yī)學會急診分會第五屆全國危重病學術(shù)交流會論文匯編[C];2004年

9 燕艷麗;邱海波;楊毅;許紅陽;王麗;孫輝明;;急性呼吸窘迫綜合征家兔肺部及肺外器官炎癥反應的變化[A];第六屆全國危重病學術(shù)交流大會論文匯編[C];2005年

10 周曉艷;徐營營;謝兆宏;許繼平;畢建忠;;炎癥反應與神經(jīng)系統(tǒng)變性疾病的研究進展[A];山東省第三次中西醫(yī)結(jié)合神經(jīng)內(nèi)科學術(shù)研討會論文匯編[C];2011年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 楊一唯邋記者 王春;我科學家發(fā)現(xiàn)調(diào)節(jié)人體炎癥反應新機制[N];科技日報;2007年

2 王蔚;我國科學家發(fā)現(xiàn)調(diào)節(jié)人體炎癥反應新機制[N];大眾科技報;2007年

3 記者 徐瑞哲;第三者“插足”抑制炎癥反應[N];解放日報;2007年

4 記者白毅;炎癥反應中淋巴結(jié)重塑新機制被揭示[N];中國醫(yī)藥報;2011年

5 記者 耿挺;尋找炎癥反應蛋白[N];上�？萍紙�;2007年

6 信文;“IL-10”蛋白調(diào)節(jié)炎癥反應[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2002年

7 知陶;把炎癥反應排除在外[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2002年

8 韓秀霞;Capase-12蛋白參與炎癥反應[N];中國醫(yī)藥報;2005年

9 范曉艷;免疫系統(tǒng)“出錯” 救星變?yōu)男荹N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2003年

10 高春東;軟組織挫傷用抗生素無效[N];大眾衛(wèi)生報;2004年

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 段二珍;HMGB1在PRRSV感染中的作用及Glycyrrhizin抗PRRSV活性研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學;2014年

2 韋超;GIT2抑制TLR介導的炎癥反應[D];北京協(xié)和醫(yī)學院;2013年

3 楊瀟;草魚白細胞介素1β誘導表達的負調(diào)控機制及其在炎癥反應中的意義[D];電子科技大學;2014年

4 王超;豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV）調(diào)控NLRP3介導的炎癥反應的分子機制研究[D];西北農(nóng)林科技大學;2015年

5 趙力;MiR-214與腺苷A2A受體相互調(diào)控的分子機制及其在炎癥反應中的作用研究[D];第三軍醫(yī)大學;2015年

6 李吉林;Toll-like receptor2/4在冠狀動脈內(nèi)皮細胞炎癥反應調(diào)控中的作用[D];南方醫(yī)科大學;2011年

7 柳楠;腸道病毒分子流行病學及腸道病毒71型感染致炎癥反應機制研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院;2014年

8 溫雅;旋覆花內(nèi)酯通過調(diào)制miR-155介導的炎癥反應對缺血性腦組織發(fā)揮保護作用[D];河北醫(yī)科大學;2015年

9 徐佳;HMGB1內(nèi)化介導的晚期炎癥反應的分子機制研究[D];南方醫(yī)科大學;2011年

10 楊朝暉;糖皮質(zhì)激素誘導的亮氨酸拉鏈蛋白在炎癥反應中作用的初步研究[D];華中科技大學;2009年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 要萌萌;Mdx小鼠骨骼肌中炎癥反應和mpeg1的表達[D];河北醫(yī)科大學;2015年

2 張曉瑩;去鐵胺對脂多糖誘發(fā)的小鼠中樞神經(jīng)炎癥反應與記憶損傷的改善作用[D];中國人民解放軍醫(yī)學院;2015年

3 陳凱;纈沙坦對糖尿病大鼠腎臟內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激及炎癥反應的抑制作用[D];安徽醫(yī)科大學;2015年

4 張凱;MiR-322負調(diào)控LPS誘導炎癥反應的機制研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學;2015年

5 李雪寒;HSPA12B在抑制LPS所致內(nèi)皮細胞炎癥反應中的必要性研究[D];南京醫(yī)科大學;2015年

6 曹春琪;麥冬不同部位對巨噬細胞炎癥反應的調(diào)節(jié)作用及其物質(zhì)基礎(chǔ)研究[D];北京中醫(yī)藥大學;2016年

7 穆衛(wèi)濤;LPS誘導雞幾個炎癥反應相關(guān)基因的表達調(diào)控研究[D];哈爾濱師范大學;2016年

8 趙蘭婷;NOTCH信號通路對慢性阻塞性肺疾病炎癥反應的影響及機制研究[D];蘭州大學;2015年

9 徐士欣;活化血小板在急性缺血性腦卒中后炎癥反應中作用機制的研究[D];天津醫(yī)科大學;2007年

10 劉宏;線粒體DNA編碼蛋白質(zhì)在炎癥反應中作用的初步探討[D];中國人民解放軍醫(yī)學院;2013年

  本文關(guān)鍵詞：Mdx小鼠骨骼肌中炎癥反應和mpeg1的表達，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：269480