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七氟醚對(duì)小鼠短期記憶提取及海馬PSD95、AMPA受體表達(dá)的影響

發(fā)布時(shí)間:2020-05-31 14:11
【摘要】:目的:觀察七氟醚對(duì)成年小鼠在被動(dòng)回避實(shí)驗(yàn)中潛伏期和錯(cuò)誤次數(shù)的改變以及海馬PSD95和AMPA受體表達(dá)的變化,以此評(píng)價(jià)七氟醚對(duì)短期記憶提取的影響并探討其可能機(jī)制。方法:健康清潔級(jí)昆明小鼠144只,2~3月齡,雌雄各半,體重30~35 g。按隨機(jī)數(shù)字表,將小鼠隨機(jī)分為A(n=64)、B(n=80)兩組,分別參加避暗實(shí)驗(yàn)和跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)。根據(jù)處理方法的不同,將A組隨機(jī)分為2組(n=32):對(duì)照組(吸入40%O_2 2h),七氟醚組(吸3.3%七氟醚及40%O_2 2h);將B組也分為2組(n=40):對(duì)照組,七氟醚組。根據(jù)行為學(xué)指標(biāo)測(cè)試時(shí)點(diǎn),A實(shí)驗(yàn)組中兩組小鼠分別在停止吸入七氟醚或氧氣后于12h(T_1)、24h(T_2)、48h(T_3)、72h(T_4)分別隨機(jī)抽取8只小鼠測(cè)定其步入潛伏期和5分鐘內(nèi)錯(cuò)誤次數(shù),每只小鼠只測(cè)試一次。B實(shí)驗(yàn)組中兩組小鼠分別在停止吸入七氟醚或氧氣后于12h(T_1)、24h(T_2)、48h(T_3)、72h(T_4)分別隨機(jī)抽取10只小鼠測(cè)定步下潛伏期和5分鐘內(nèi)錯(cuò)誤次數(shù),以此評(píng)價(jià)七氟醚對(duì)記憶提取能力的影響。各時(shí)點(diǎn)行為學(xué)測(cè)試完畢后處死小鼠,制備海馬組織標(biāo)本,行HE染色,光鏡下觀察海馬區(qū)病理學(xué)結(jié)果;采用免疫組化法和Western blot法測(cè)定海馬PSD95蛋白和AMPA受體的表達(dá)水平。結(jié)果:(1)行為學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果A組:與對(duì)照組比較,七氟醚組T_1和T_2時(shí)步入潛伏期縮短,5分鐘內(nèi)錯(cuò)誤次數(shù)增加,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。與基礎(chǔ)成績(jī)比較,對(duì)照組步入潛伏期和錯(cuò)誤次數(shù)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),七氟醚組T_1和T_2時(shí)步入潛伏期縮短,錯(cuò)誤次數(shù)增加,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。B組:與對(duì)照組比較,七氟醚組T_1時(shí)步下潛伏期縮短,錯(cuò)誤次數(shù)增加,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。與基礎(chǔ)成績(jī)比較,對(duì)照組步下潛伏期和錯(cuò)誤次數(shù),差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),七氟醚組T_1時(shí)步下潛伏期縮短,錯(cuò)誤次數(shù)增加,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。(2)蛋白檢測(cè)結(jié)果與對(duì)照組比較,七氟醚組T_1和T_2時(shí)海馬PSD95受體和AMPA受體表達(dá)減少,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。(3)HE染色結(jié)果七氟醚組可見(jiàn)部分神經(jīng)細(xì)胞腫脹,但未見(jiàn)明顯的錐體細(xì)胞凋亡。結(jié)論:七氟醚可抑制成年小鼠短期記憶提取能力,可能與抑制了海馬PSD95和AMPA受體表達(dá)導(dǎo)致有效的突觸傳遞減少有關(guān)。
【圖文】:

小鼠,進(jìn)洞,暗室


圖 1-1 自制小鼠麻醉箱Fig 1-1.Box was used for mice anethesia 避暗實(shí)驗(yàn)訓(xùn)練期(第 1-2 天):將小鼠放于避暗儀(見(jiàn)圖 1-2)明室中熟悉環(huán)境 3m輕打開(kāi)明室與暗室之間的滑門,記錄小鼠第一次進(jìn)洞的時(shí)間即步入潛伏期p through latency,STL),進(jìn)洞后讓其在暗室內(nèi)適應(yīng) 1min。在相同實(shí)驗(yàn),每天訓(xùn)練 3 次,,每次 5min,連續(xù)訓(xùn)練 2 天,目的為強(qiáng)化小鼠趨暗行為。文獻(xiàn)[25],若 5min 內(nèi)小鼠不進(jìn)洞,將其淘汰。

視頻記錄,小鼠,進(jìn)洞,暗室


圖 1-1 自制小鼠麻醉箱Fig 1-1.Box was used for mice anethesia實(shí)驗(yàn)期(第 1-2 天):將小鼠放于避暗儀(見(jiàn)圖 1-2)明室中熟悉環(huán)境打開(kāi)明室與暗室之間的滑門,記錄小鼠第一次進(jìn)洞的時(shí)間即步入潛ough latency,STL),進(jìn)洞后讓其在暗室內(nèi)適應(yīng) 1min。在相同實(shí)天訓(xùn)練 3 次,每次 5min,連續(xù)訓(xùn)練 2 天,目的為強(qiáng)化小鼠趨暗行[25],若 5min 內(nèi)小鼠不進(jìn)洞,將其淘汰。
【學(xué)位授予單位】:貴州醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2018
【分類號(hào)】:R614

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):2689975

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