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大鼠踝關(guān)節(jié)骨關(guān)節(jié)炎動(dòng)物模型的建立

發(fā)布時(shí)間:2017-03-20 05:09

  本文關(guān)鍵詞:大鼠踝關(guān)節(jié)骨關(guān)節(jié)炎動(dòng)物模型的建立,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:目的:世界成年人口中有1%人群患有踝關(guān)節(jié)的骨關(guān)節(jié)炎(osteoarthritis,OA)。病因?qū)W顯示78%的踝關(guān)節(jié)OA由創(chuàng)傷引起,其中內(nèi)踝骨折較為常見(jiàn)。臨床上以內(nèi)踝骨折伴脫位最為常見(jiàn)。為了更好的診斷、治療踝關(guān)節(jié)OA,研究者需要一個(gè)合適的踝關(guān)節(jié)OA動(dòng)物骨折模型,而目前國(guó)際上仍缺乏這一模型。設(shè)計(jì)一個(gè)簡(jiǎn)單可行的造模方法,對(duì)于臨床踝關(guān)節(jié)炎的診斷治療有著至關(guān)重要的意義。方法:38只8周齡成年雄性SD大鼠,體重約200g,分為骨折脫位組及單純骨折組各19只,每組右側(cè)踝關(guān)節(jié)為手術(shù)側(cè),非手術(shù)側(cè)作為對(duì)照組。手術(shù)方式:1.10%水合氯醛腹腔注射麻醉,取仰臥位,術(shù)側(cè)屈膝90°,充分外展髖關(guān)節(jié),消毒鋪單。2.于內(nèi)踝處自下而上切開(kāi)皮膚,切口長(zhǎng)1cm左右,鈍性分離皮下筋膜及肌腱,暴露內(nèi)踝。3.小骨鑿與角度固定器(37°)組合后置于脛骨遠(yuǎn)端,中等力度將骨鑿敲入內(nèi)踝,感受到明顯的落空感后,即為內(nèi)踝骨折。4.3-0線縫合傷口。脫位組另需使足部?jī)?nèi)翻,之后立即復(fù)位。5.使用小動(dòng)物X線成像系統(tǒng)拍攝踝關(guān)節(jié)正位片確認(rèn)骨折累及關(guān)節(jié)面。8周后通過(guò)X線、熒光分子斷層成像系統(tǒng)(fluorescence molecular tomography,FMT)、組織切片染色、免疫組化、實(shí)時(shí)熒光定量PCR、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)等檢測(cè)方法觀察OA癥狀是否出現(xiàn)。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用配對(duì)t檢驗(yàn),兩個(gè)實(shí)驗(yàn)組之間的番紅O染色評(píng)分選用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn),統(tǒng)計(jì)結(jié)果采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)誤表示,P0.05認(rèn)為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果:1.X線可以觀察到8周時(shí)實(shí)驗(yàn)組踝關(guān)節(jié)間隙變窄并出現(xiàn)軟骨下骨硬化。2.FMT顯示8周時(shí)兩個(gè)實(shí)驗(yàn)組基質(zhì)金屬蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)的信號(hào)強(qiáng)度高于對(duì)照組(即對(duì)側(cè))。3.番紅O染色評(píng)分(改良OARSI法):骨折脫位組分?jǐn)?shù)為12.45±1.21,其對(duì)側(cè)為1.73±0.33,P0.05;單純骨折組分?jǐn)?shù)為11.45±0.85,其對(duì)側(cè)為1.27±0.27,P0.05;但是兩組之間無(wú)顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,P0.05。4.免疫組化結(jié)果顯示兩個(gè)實(shí)驗(yàn)組的II型膠原著色較對(duì)照組淺,而X型膠原與MMP-13著色較對(duì)照組深。5.PCR數(shù)據(jù)顯示兩個(gè)實(shí)驗(yàn)組的II型膠原與聚蛋白聚糖的m RNA表達(dá)量均低于其對(duì)照組,而兩個(gè)實(shí)驗(yàn)組MMP-13的m RNA表達(dá)量均高于其對(duì)照組。6.ELISA檢測(cè)關(guān)節(jié)液灌洗液中的MMP-13:兩組實(shí)驗(yàn)組的MMP-13濃度均高于對(duì)照組。結(jié)論:實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明,兩種方法均可成功誘導(dǎo)大鼠踝關(guān)節(jié)OA,且通過(guò)比較兩實(shí)驗(yàn)組的改良OARSI評(píng)分認(rèn)為兩種方法效果相似,對(duì)今后踝關(guān)節(jié)OA的診斷治療有重大意義。
【關(guān)鍵詞】:踝關(guān)節(jié) 骨關(guān)節(jié)炎 動(dòng)物模型 骨折
【學(xué)位授予單位】:山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號(hào)】:R684.3;R-332
【目錄】:
  • 中文摘要6-8
  • 英文摘要8-10
  • 常用縮寫(xiě)詞中英文對(duì)照表10-11
  • 前言11-12
  • 1 材料與方法12-19
  • 1.1 主要實(shí)驗(yàn)儀器12
  • 1.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑及耗材12-13
  • 1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物13
  • 1.4 手術(shù)方法13-14
  • 1.5 小動(dòng)物X線成像系統(tǒng)14
  • 1.6 熒光分子斷層成像系統(tǒng)14-15
  • 1.7 番紅O染色及評(píng)分15
  • 1.8 免疫組織化學(xué)15-16
  • 1.9 實(shí)時(shí)熒光定量PCR16-17
  • 1.10 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)17-18
  • 1.11 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法18-19
  • 2 結(jié)果19-27
  • 2.1 小動(dòng)物X線成像系統(tǒng)結(jié)果19-20
  • 2.2 熒光分子斷層成像系統(tǒng)結(jié)果20
  • 2.3 番紅O染色及評(píng)分結(jié)果20-21
  • 2.4 免疫組織化學(xué)結(jié)果21-24
  • 2.5 實(shí)時(shí)熒光定量PCR結(jié)果24-26
  • 2.6 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)結(jié)果26-27
  • 3 討論27-29
  • 4 結(jié)論29-30
  • 參考文獻(xiàn)30-32
  • 綜述32-45
  • 參考文獻(xiàn)40-45
  • 致謝45-46
  • 在學(xué)期間承擔(dān)/參與的科研課題與研究成果46-47
  • 個(gè)人簡(jiǎn)歷47

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  本文關(guān)鍵詞:大鼠踝關(guān)節(jié)骨關(guān)節(jié)炎動(dòng)物模型的建立,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號(hào):257217

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