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酶育牛黃對血脂異常小鼠高密度脂蛋白功能的改善作用

發(fā)布時間:2019-02-24 20:00
【摘要】:目的探討酶育牛黃(CBCG)對高脂食物誘導(dǎo)的血脂異常小鼠高密度脂蛋白(HDL)功能的影響。方法7~8周齡雄性C57BL/6J小鼠41只,隨機(jī)分三組:對照組(溶媒組,n=14)、CBCG高劑量組[2.25 g/(kg·d),n=14]、CBCG中劑量組[0.75 g/(kg·d),n=13]。高脂(15.8%)高膽固醇(1.25%)飲食,自由飲水。連續(xù)灌胃12周后,禁食12 h,麻醉,小鼠內(nèi)眥靜脈取血,通過超速離心法獲得低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)。通過膽固醇逆向轉(zhuǎn)運(yùn)(RCT)功能實驗檢測HDL對巨噬細(xì)胞源性泡沫細(xì)胞的膽固醇溢出的影響;通過HDL對Cu2+誘導(dǎo)的LDL氧化程度的保護(hù)作用,檢測HDL的抗氧化功能;通過MTT比色法檢測內(nèi)皮細(xì)胞存活率,檢測HDL抗內(nèi)皮細(xì)胞凋亡功能;通過單核細(xì)胞黏附實驗檢測HDL抗炎功能。另外,40只7~8周齡雄性Apo E-/-小鼠隨機(jī)分為四組:對照組(溶媒組,n=10)、CBCG低、中及高劑量組[0.25 g/(kg·d)、0.75 g/(kg·d)、2.25 g/(kg·d),n=10]。給予高脂(15.8%)高膽固醇(1.25%)飲食,自由飲水。連續(xù)灌胃8周末,禁食12 h,麻醉,小鼠內(nèi)眥靜脈取血,取材。ELISA檢測血漿炎癥因子白細(xì)胞介素6(IL-6)和腫瘤壞死因子α(TNF-α)水平,分光光度計法檢測血漿丙二醛(MDA)和對氧磷酶1(PON-1)水平;ELISA測定CBCG血漿活性成分膽紅素和牛磺酸水平;酶法測定血漿總膽固醇(TC)、高密度脂蛋白膽固醇(HDLC)水平。結(jié)果 CBCG可顯著改善C57BL/6J小鼠血漿HDL功能,主要表現(xiàn)在促進(jìn)巨噬細(xì)胞內(nèi)3H標(biāo)記膽固醇的溢出;抑制Cu2+誘導(dǎo)的LDL氧化作用;抑制單核細(xì)胞黏附作用和改善內(nèi)皮細(xì)胞保護(hù)作用。另外,血漿IL-6和TNF-α水平顯著降低;血漿氧化生物指標(biāo)MDA顯著降低,PON-1顯著升高;CBCG高劑量組血漿膽紅素水平顯著高于對照組,血漿;撬崴匠噬呲厔,但差異無統(tǒng)計學(xué)意義。CBCG治療組TC和非高密度脂蛋白膽固醇(non-HDLC)水平變化無統(tǒng)計學(xué)意義,HDLC水平顯著升高。結(jié)論 CBCG能改善C57BL/6J小鼠HDL功能,包括促進(jìn)膽固醇溢出、抗氧化、抗凋亡、抗黏附和內(nèi)皮保護(hù)作用。這種對HDL功能的改善作用可能與CBCG的血漿抗氧化作用有關(guān)。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of (CBCG) on the function of high density lipoprotein (HDL) in hyperlipidemic mice induced by high fat food. Methods 41 male C57BL/6J mice aged 7 weeks and 8 weeks old were randomly divided into three groups: control group (medium group, high dose group of 14), CBCG) [2.25 g / (kg d), nong14] and middle dose group of CBCG [0.75 g / (kg d), nong13]. High fat (15.8%), high cholesterol (1.25%) diet, free drinking water. After 12 weeks of continuous gastric perfusion, fasting for 12 hours, anesthetized, the blood was taken from the inner canthus vein of mice, and the low density lipoprotein (LDL),) high density lipoprotein (HDL).) was obtained by ultracentrifugation. The effect of HDL on cholesterol spillover of macrophage derived foam cells was detected by cholesterol reverse transport (RCT) function test, and the antioxidant function of HDL was detected by the protective effect of HDL on the degree of LDL oxidation induced by Cu2. MTT colorimetric assay was used to detect the survival rate of endothelial cells and the anti-apoptotic function of HDL, and the anti-inflammatory function of HDL was detected by monocyte adhesion assay. In addition, 40 7-week-old male Apo E-r-mice were randomly divided into four groups: control group (solvent group, 10), CBCG low, middle and high dose group [0.25 g / (kg d), 0.75 g / (kg d),]). 2.25g / (kg d), 10]. Give high fat (15. 8%), high cholesterol (1. 25%) diet and free drinking water. After 8 weeks of gastric perfusion, fasting for 12 hours, blood was taken from the inner canthus vein of mice. Plasma levels of inflammatory factor interleukin 6 (IL-6) and tumor necrosis factor 偽 (TNF- 偽) were measured by ELISA. Plasma malondialdehyde (MDA) and paraoxonase 1 (PON-1) levels were measured by spectrophotometer. The levels of bilirubin and taurine in plasma of CBCG were determined by ELISA, and the levels of (TC), high density lipoprotein cholesterol (HDLC) in plasma by enzymatic method. Results CBCG could significantly improve the plasma HDL function of C57BL/6J mice, mainly in promoting the release of 3H-labeled cholesterol in macrophages, inhibiting the oxidation of LDL induced by Cu2, inhibiting monocyte adhesion and improving the protective effect of endothelial cells. In addition, plasma IL-6 and TNF- 偽 levels were significantly decreased, plasma oxidative biological index MDA was significantly decreased, and PON-1 was significantly increased. The level of plasma bilirubin in CBCG high dose group was significantly higher than that in control group, but there was no significant difference in plasma taurine level, but there was no significant difference in TC and non-high density lipoprotein cholesterol (non-HDLC) levels in CBCG treatment group. The level of HDLC increased significantly. Conclusion CBCG can improve the HDL function of C57BL/6J mice, including promoting cholesterol overflow, antioxidation, anti-apoptosis, anti-adhesion and endothelium protection. The improvement of HDL function may be related to the plasma antioxidation of CBCG.
【作者單位】: 山東省高校動脈粥樣硬化重點(diǎn)實驗室泰山醫(yī)學(xué)院動脈粥樣硬化研究所泰山醫(yī)學(xué)院護(hù)理學(xué)院;
【基金】:山東省泰山學(xué)者專項基金項目(zd056和zd057)
【分類號】:R589.2

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