【摘要】：1研究背景冠心病,又稱為缺血性心臟病,其發(fā)作率高、致殘率高、死亡率高,是嚴(yán)重威脅人類健康的疾病之一。祖國(guó)醫(yī)學(xué)對(duì)于冠心病的用藥施治,具有兩千余年的豐富實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)。雙丹方由丹參、牡丹皮組成,為活血化瘀的經(jīng)典古方之一,其系列制劑如雙丹顆粒、雙丹片、雙丹口服液、雙丹膠囊等長(zhǎng)期應(yīng)用于冠心病的臨床實(shí)踐,取得了良好的療效。然而,迄今為止,相對(duì)于廣泛開展的臨床研究而言,雙丹方的基礎(chǔ)研究則相對(duì)滯后。與多數(shù)中藥復(fù)方一樣,雙丹方所含化學(xué)成分復(fù)雜,有效成分至今尚不明了,治病的作用機(jī)理尚未闡明,限制了其進(jìn)一步的應(yīng)用及在國(guó)際上的推廣。因此,闡明雙丹方的藥效物質(zhì)成分及其治療冠心病的作用機(jī)制,不僅可以為祖國(guó)醫(yī)學(xué)復(fù)方配伍的科學(xué)合理性提供可靠的理論依據(jù),也將為開發(fā)與國(guó)際接軌的成分清楚、靶點(diǎn)和作用機(jī)制明確的中藥新藥奠定堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)。本研究擬通過血清藥物化學(xué)等研究手段,探尋雙丹方的主要有效成分,在此基礎(chǔ)上,通過對(duì)該方有效成分的藥物動(dòng)力學(xué)研究和抗心肌缺血的藥效學(xué)研究,初步闡明該方的組方原理和作用機(jī)制。2方法2.1雙丹方體外成分分析:建立雙丹凍干粉的體外指紋圖譜HPLC分析方法,色譜條件為:色譜柱ZORBAX SB C18(250 mm×4.6 mm 5μm,Agilent),柱溫30°C,流動(dòng)相為甲醇與2%冰醋酸,采用梯度洗脫程序:甲醇-2%冰醋酸(5∶95,v/v)0 min,(5∶95)10 min,(25∶75)30 min,(40∶60)50 min,(60∶40)70 min,流速1 m L·min-1,進(jìn)樣量20μL,檢測(cè)波長(zhǎng)280 nm;以建立的HPLC分析方法對(duì)雙丹凍干粉進(jìn)行指紋圖譜分析表征,確認(rèn)各物質(zhì)成分歸屬。2.2雙丹方體內(nèi)成分分析:采用血清藥物化學(xué)的研究方法,建立雙丹凍干粉經(jīng)口灌胃后大鼠血清的HPLC指紋圖譜,結(jié)合體外樣品指紋圖譜,分析比較雙丹凍干粉給藥后所得血清樣品,鑒定雙丹凍干粉大鼠血中移行成分。2.3丹參素配伍丹皮酚與獨(dú)用丹皮酚的大鼠血漿藥物動(dòng)力學(xué)及組織分布特性:建立大鼠含藥血漿及組織樣品中丹皮酚的HPLC分析方法,色譜條件為色譜柱Sino Chrom ODS BP C18(250 mm×4.6 mm 5μm,依利特),柱溫30°C,流動(dòng)相為甲醇-2%冰醋酸(70∶30,v/v),流速1 m L·min-1,進(jìn)樣量20μL,檢測(cè)波長(zhǎng)274 nm;以建立的HPLC分析方法對(duì)丹皮酚單獨(dú)給藥及丹參素配伍丹參素給藥的大鼠血漿及組織(心、肝、脾、肺、腎和腦)勻漿進(jìn)行檢測(cè),對(duì)比藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)的變化及其在組織中分布的特性。2.4丹參素配伍丹皮酚對(duì)異丙腎上腺素所致心肌損傷的保護(hù)作用及機(jī)制研究:大鼠連續(xù)給予丹參素(160 mg·kg-1)、丹皮酚(80 mg·kg-1)或丹參素配伍丹皮酚21天,于第20、21天采用皮下多點(diǎn)注射異丙腎上腺素(85 mg·kg-1)方法造成大鼠實(shí)驗(yàn)性心肌梗死模型,戊巴比妥麻醉(35 mg·kg-1)后記錄心電圖,取血和心肌組織分別檢測(cè)c Tn I、CK-MB、LDH及TBARS、SOD、CAT等系列生化指標(biāo)的變化。3結(jié)果3.1雙丹方體外成分分析:雙丹凍干粉指紋圖譜中有11個(gè)共有特征峰,其中1、6和11號(hào)峰分別為源自牡丹皮的沒食子酸、芍藥苷和丹皮酚,2、3、4、5、7、8、9和10號(hào)峰分別為源自丹參的丹參素、原兒茶酸、原兒茶醛、咖啡酸、紫草酸、迷迭香酸、丹酚酸B和丹酚酸A。3.2雙丹方體內(nèi)成分分析:大鼠口服雙丹凍干粉后經(jīng)鑒定有8種血清移行原型成分,分別為源自牡丹皮的沒食子酸、芍藥苷和丹皮酚,源自丹參的丹參素、原兒茶酸、咖啡酸、迷迭香酸和丹酚酸B,此8種成分將有可能成為雙丹方藥效作用的物質(zhì)基礎(chǔ)。3.3丹參素配伍丹皮酚與獨(dú)用丹皮酚的大鼠血漿藥物動(dòng)力學(xué)及組織分布特性:丹參素配伍丹皮酚給藥后血漿丹皮酚藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)及組織藥物濃度較丹皮酚單獨(dú)給藥有顯著改變,配伍給藥后血漿丹皮酚濃度顯著降低(P0.01),藥物平均滯留時(shí)間顯著延長(zhǎng)(P0.001),表觀分布容積顯著增大(P0.001),表明丹皮酚在心、腦及肺組織中的濃度顯著升高(P0.001)。3.4丹參素配伍丹皮酚對(duì)異丙腎上腺素所致心肌損傷的保護(hù)作用及機(jī)制研究:丹參素配伍丹皮酚對(duì)異丙腎上腺素所致的大鼠心肌損傷具有顯著的保護(hù)作用,與模型組比較,各單用組及配伍組大鼠心梗面積、血清心梗標(biāo)志物(c Tn I,CK-MB,LDH)水平、心肌組織TBARS水平、凋亡細(xì)胞數(shù)、凋亡相關(guān)Bax蛋白表達(dá)水平均顯著下降(P0.001),心肌組織抗氧化酶(SOD、CAT)活力、Ⅱ相解毒酶(GPx、GR、GST、NQO1)活力、抗凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2表達(dá)水平顯著上升(P0.001),心電圖及心肌病理形態(tài)也得到顯著改善;配伍組對(duì)各項(xiàng)指標(biāo)的改善明顯優(yōu)于單用組(P0.01或P0.001)。4結(jié)論本研究分別采用血清藥物化學(xué)、藥物動(dòng)力學(xué)手段、體內(nèi)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ偷确椒?初步明確了雙丹方的藥效物質(zhì)成分,證實(shí)了丹參素、丹皮酚配伍組合具有心肌保護(hù)作用,其機(jī)制可能與清除自由基、激活機(jī)體內(nèi)源性抗氧化通路以及對(duì)凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)的調(diào)控有關(guān)。上述研究結(jié)果為雙丹方配伍作用的原理與科學(xué)合理性提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù),也為開發(fā)與國(guó)際接軌的成分清楚、靶點(diǎn)和作用機(jī)制明確的現(xiàn)代中藥新藥奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：第四軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R284;R285

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 于津 ,郎惠英 ,肖培根;牡丹根中的新成分——丹皮酚新甙的鑒定[J];藥學(xué)學(xué)報(bào);1986年03期

2 姜洪芳,汪國(guó)華;丹皮酚復(fù)乳型凝膠的制備[J];中成藥;2001年03期

3 姜洪芳,汪國(guó)華;丹皮酚復(fù)乳型凝膠的制備[J];中草藥;2001年08期

4 李正翔,任榮;丹皮酚-β-環(huán)糊精包合物的制備[J];中國(guó)藥學(xué)雜志;2004年04期

5 菅凌燕,楊躍輝,徐英宏,何仲貴;2-羥丙基-β-環(huán)糊精對(duì)丹皮酚的增溶作用[J];中國(guó)中藥雜志;2005年15期

6 王曄;吳劍;李端;汪海燕;金葆康;;丹皮酚的電化學(xué)氧化及其反應(yīng)機(jī)理研究[J];分析化學(xué);2006年09期

7 滕蔚然;杜寧;;丹皮酚汽療的臨床應(yīng)用[J];中國(guó)中醫(yī)骨傷科雜志;2006年05期

8 高健;相海鷹;許同桃;胡建平;吳群;;丹皮酚及其席夫堿衍生物的抑菌性研究[J];化學(xué)試劑;2007年01期

9 劉本臣;;丹皮酚的研究進(jìn)展[J];中草藥;2007年11期

10 高鑫;陳光勇;劉光明;;丹皮酚的合成研究[J];大理學(xué)院學(xué)報(bào);2008年04期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 吳婷;吳曉慧;沈奇;繆月秋;吳國(guó)榮;;丹皮酚及其包合物的理化性質(zhì)和生物學(xué)活性的比較研究[A];中國(guó)植物學(xué)會(huì)植物結(jié)構(gòu)與生殖生物學(xué)專業(yè)委員會(huì)、江蘇省植物學(xué)會(huì)2007年學(xué)術(shù)年會(huì)學(xué)術(shù)報(bào)告及研究論文集[C];2007年

2 鄭新宇;楊桂娣;;丹皮酚與牛血清蛋白相互作用的電化學(xué)研究[A];第六屆全國(guó)化學(xué)生物學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要集[C];2009年

3 趙瑜;楊華武;譚新良;黎艷玲;陳雄;朱卓越;蘇利霞;劉建福;;液相色譜法測(cè)定卷煙煙絲和煙氣中的丹皮酚[A];全國(guó)生物醫(yī)藥色譜學(xué)術(shù)交流會(huì)（2010景德鎮(zhèn)）論文集[C];2010年

4 李鴻賓;孫國(guó)平;徐淑萍;吳成義;王華;魏偉;;丹皮酚的藥理作用研究進(jìn)展[A];中醫(yī)藥理論與應(yīng)用研究——安徽中醫(yī)藥繼承與創(chuàng)新博士科技論壇論文集[C];2008年

5 劉繼勇;韓盈;王崢濤;胡晉紅;陳凱先;;基于皮膚、血液同步微透析技術(shù)的丹皮酚經(jīng)皮給藥藥代動(dòng)力學(xué)研究[A];2010年中國(guó)藥學(xué)大會(huì)暨第十屆中國(guó)藥師周論文集[C];2010年

6 唐玉春;劉洋;柯典典;陳曉嵐;朱海生;屈凌波;;丹皮酚氨基磷酸酯衍生物的合成[A];中國(guó)化學(xué)會(huì)第28屆學(xué)術(shù)年會(huì)第19分會(huì)場(chǎng)摘要集[C];2012年

7 許玲;金傳山;吳德玲;;不同加工工藝對(duì)丹皮中丹皮酚和丹皮總苷含量的影響[A];中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)中藥炮制分會(huì)2011年學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2011年

8 張永梅;梁紅;楊玉梅;;丹皮酚對(duì)大鼠血液學(xué)和血液生化指標(biāo)的影響[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第七次全國(guó)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議資料匯編[C];2008年

9 張雅珩;李加忠;任翠領(lǐng);王小茹;盛芬玲;陳興國(guó);;丹皮酚和人血清白蛋白的相互作用研究[A];第十五屆全國(guó)分子光譜學(xué)術(shù)報(bào)告會(huì)論文集[C];2008年

10 王偉;戴敏;;丹皮酚對(duì)血管平滑肌細(xì)胞增殖作用部分機(jī)制的研究[A];中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)中藥實(shí)驗(yàn)藥理分會(huì)第七屆學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要匯編[C];2007年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前2條

1 張健萍 李連珍 趙紅江;牡丹皮藥理作用廣泛[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2006年

2 少軒;秀外慧中牡丹花[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2002年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前6條

1 張蕾;丹皮酚對(duì)炎性環(huán)境下腫瘤惡性生物學(xué)行為的影響及分子機(jī)制[D];南京中醫(yī)藥大學(xué);2012年

2 李驊;雙丹方成分分析及其主要成分丹參素配伍丹皮酚對(duì)心肌損傷的保護(hù)作用及機(jī)制研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2015年

3 宋藝君;丹皮酚對(duì)大鼠肝癌前病變的預(yù)防作用及其藥動(dòng)學(xué)研究[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2013年

4 胡靜;丹參素聯(lián)合丹皮酚對(duì)糖尿病大鼠基底動(dòng)脈的保護(hù)作用及機(jī)制研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2013年

5 卜今;丹皮酚抑制黑素合成相關(guān)分子機(jī)制的研究及KC-MC共培養(yǎng)體系中細(xì)胞因子對(duì)黑素合成的反饋調(diào)節(jié)[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2008年

6 李秀英;丹皮酚和山奈酚抑制巨噬細(xì)胞泡沫化機(jī)制的比較研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2014年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 褚紅珊;丹皮酚對(duì)阿爾茨海默病模型大鼠抗氧化應(yīng)激損傷機(jī)制的研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

2 田廣軒;丹皮酚和1,8-萘亞酰胺衍生物的合成及其生物活性研究[D];云南師范大學(xué);2015年

3 邵作敏;牡丹皮中丹皮酚提取工藝優(yōu)化及藥理作用的研究[D];安徽農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

4 王莉莉;丹皮酚對(duì)人肝癌細(xì)胞株HepG2藥物轉(zhuǎn)運(yùn)體表達(dá)及功能的影響[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2015年

5 鞏偉民;丹皮酚衍生物的合成及其抗腫瘤與抗輻射活性的研究[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2009年

6 劉瑾;丹皮酚干預(yù)兔實(shí)驗(yàn)性動(dòng)脈粥樣硬化的實(shí)驗(yàn)研究[D];山東中醫(yī)藥大學(xué);2009年

7 曾玲;丹皮酚調(diào)控過氧化物酶體增殖物激活受體δ對(duì)心肌保護(hù)作用的研究[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2014年

8 黃珍輝;乙酰阿魏酸丹皮酚酯的合成及抗氧化研究[D];湖南中醫(yī)藥大學(xué);2013年

9 陳群;冰片對(duì)丹皮酚藥代動(dòng)力學(xué)及透血腦屏障的影響[D];浙江大學(xué);2005年

10 宋寧寧;丹皮酚對(duì)大鼠海馬神經(jīng)元缺糖缺氧再灌注損傷的保護(hù)作用[D];山東大學(xué);2007年

，

本文編號(hào)：2371744