本文選題：兒茶素沒食子酸酯　切入點：滴丸　出處：《廣州中醫(yī)藥大學》2017年碩士論文

【摘要】：目的:表兒茶素沒食子酸酯(Epigallocatechin-3-gallate,EGCG)具有抗炎、抗腫瘤、抗缺血等活性作用。劑型對發(fā)揮藥效作用具有重要意義,本實驗主要考察EGCG滴丸制備的影響因素以確定其工藝流程,并建立鑒別及含量測定的方法。觀察EGCG灌胃給藥對三硝基苯磺酸(TNBS,C3H3N3O9S)/酒精(CH3OH)誘導的大鼠實驗性結腸炎的治療作用,確定其有效劑量,為EGCG滴丸制劑的開發(fā)奠定基礎。方法:(1)通過預試驗分析EGCG滴丸制備的主要基質和影響因素,以滴丸的圓度以及拖尾形狀作為觀察指標,用單因子變量(single variable)法研究EGCG與基質配比、管口溫度、滴制溫度對EGCG滴丸成形的影響,以正交試驗法(orthogonal test)優(yōu)化工藝路線,并采用薄層色譜和高效液相色譜法分別對EGCG進行鑒別和含量測定。(2)將48只SD大鼠按照等概率隨機分6組,雌雄各半,每組8只;造模組每只腹腔注射3.5mL/kg水合氯醛,麻醉后再以50.0mg/kg三硝基苯磺酸(C3H3N3O9S)與等體積的50.0%酒精(CH3OH)混合溶液灌腸以誘發(fā)SD大鼠患結腸炎。實驗分為 EGCG 低劑量(25.0mg/kg/day)組、EGCG 中劑量(50.0mg/kg/day)組、EGCG高劑量(75.0mg/kg/day)組、柳氮磺吡啶(SASA,100.0mg/kg/day)組、正常對照組和模型對照組。1周后,進行SD大鼠疾病活動指數(shù)(DAI)、結腸組織炎癥指標(CMDI)和病理組織學(HPS)評分;NF-κBp65蛋白的表達使用S-P免疫組化法進行檢測;大鼠血清IL-4、IL-10和TNF-α和大鼠結腸組織中的髓過氧化物酶活性(MPO)均以酶聯(lián)免疫法(ELISA)檢測。結果:(1)用94gPEG6000和6g的硬脂酸混合基質,80℃水浴50.0min,加入20g的EGCG后繼續(xù)加熱1h,混合液通過2mm(內(nèi)徑)的6孔滴頭,管口溫度55℃,滴距為5～8cm,350～380滴·min-1恒速滴入二甲基硅油中得到較為理想的EGCG滴丸。薄層鑒別表明EGCG滴丸樣品與EGCG標準品在同一水平位置有黑色斑點。高效液相測定中標準品EGCG的進樣量(C)在0.06880～0.50112μg范圍內(nèi)與鋒面積(A)的線性方程為A=1214.4C-8.2478,用于測定EGCG的含量;滴丸的平均回收率和RSD分別為101%、3.91%。(2)給藥 1 周后,SASA(100.0mg/kg/day)組、EGCG(50.0mg/kg/day)組和EGCG(75.0mg/kg/day)組SD大鼠DAI評分、結腸組織CMDI和HPS評分均低于模型對照組(P0.05);SASA(100.0mg/kg/day)組、EGCG(25.0mg/kg/day)組、EGCG(50.0mg/kg/day)組、EGCG(75.0mg/kg/day)組結腸組織蛋白NF-κBp65的表達低于模型對照組(P0.05);SASA(100.0mg/kg/day)組、EGCG(50.0mg/kg/day)組、EGCG(75.0mg/kg/day)組結腸組織MPO活性低于模型對照組(P0.05),而EGCG(25.0mg/kg/day)組、模型對照組基本相同(P0.05);模型對照組的血清IL-4、TNF-α 的蛋白含量高于 SASA(100.0mg/kg/day)組、EGCG(50.0mg/kg/day)組以及 EGCG(75.0mg/kg/day)組(P0.05);SASA(100.0mg/kg/day)組、EGCG(50.0mg/kg/day)組、EGCG(75.0mg/kg/day)組與模型對照組相比血清 IL-10的蛋白含量偏高(P0.05)。結論:(1)EGCG滴丸的成形性受基質的影響較大,加入硬脂酸可提高滴丸的得率;本試驗獲得了 EGCG滴丸的工藝路線,并初步建立了鑒別及含量測定的方法;薄層鑒定和高效液相測定法與現(xiàn)有同類制劑的一致,為進一步建立EGCG滴丸質量標準提供參考。(2)90%EGCG在50.0和75.0mg/kg/day濃度下可改善SD大鼠結腸炎癥狀,降低結腸組織中NF-κBp65蛋白的表達和MPO的活性,同時降低血清IL-4、TNF-α和升高血清IL-10的水平,提示其對潰瘍性結腸炎有一定的作用。
[Abstract]:Objective : To study the effect of egcg on experimental colitis induced by trinitrobenzene sulfonic acid ( TNBS , C3H3N3O9S ) / alcohol ( CH3OH ) . (2)灝，

本文編號：1689706