發(fā)布時間：2018-03-29 18:39

  本文選題：糖尿病視網膜病變　切入點：外生型內皮祖細胞　出處：《南昌大學》2014年碩士論文

【摘要】：背景及目的介紹： 糖尿病視網膜病變（Diabetic retinopathy，DR）是糖尿病并發(fā)的主要微血管病變之一，已經成為全球成人致盲四大主因之一。而目前針對DR的治療有藥物、激光及抗VEGF治療等，這種治療只能起到防止病變繼續(xù)惡化的作用，因此尋找DR的根治方法成為世界性的難題。DR是視網膜微血管內皮細胞損傷的一類疾病，，因此治療DR修復微血管成為關鍵。近年發(fā)現(xiàn)外生型內皮祖細胞（Outgrowthendothelial cells，OECs）在微血管疾病中起到修復作用。AGEs-RAGE系統(tǒng)在糖尿病微血管病變中的重要作用已經得到明確，而內源分泌型RAGE（endogenoussecretory RAGE，esRAGE）作為RAGE中一種新型剪接異構體，能阻斷AGEs介導的炎癥反應。 本文旨在探索esRAGE基因修飾OECs干預DR大鼠的治療作用，觀察該細胞對DR大鼠視網膜的影響以及對視網膜組織VEGF與TGF-β的表達的影響。 方法： 健康雄性SD大鼠50只，按照隨機數字表隨機分成4組，正常組8只，其余按1%鏈脲佐菌素（STZ）腹腔注射誘導造成DM模型（55mg/kg），正常對照組注射同等體積的檸檬酸緩沖液，飼養(yǎng)3個月后成DR模型，飼養(yǎng)過程中，死亡9只，再隨機分為每組10只。通過眼底造影觀察3個月、6個月DR的病變情況后，再進行分組，各組分別為正常對照組（CON），糖尿病視網膜病變組（DR），注射OECs組（OECs），注射esRAGE-OECs組（esRAGE-OECs），通過玻璃體注射等量體積等數量細胞溶液，于4周后行眼底造影觀察眼底病變情況；麻醉、心臟灌注后摘取眼球，HE染色觀察各組大鼠視網膜各層細胞病理改變；免疫組織化學技術檢測VEGF和TGF-β在大鼠視網膜的表達情況等； 結果： （1）3、6個月DR大鼠均現(xiàn)不同程度的視網膜眼底病變，前者出現(xiàn)明顯滲漏，后者更加嚴重；（2）組織病理學提示：CON組：視網膜各層次結構規(guī)則整齊，形態(tài)正常；DR組：視網膜各層出現(xiàn)不同程度水腫，節(jié)細胞層微血管擴張充血，神經纖維層間距增大，垂直纖維斷裂，內、外核層細胞結構疏松、排列紊亂，胞核增大，內核層相對較薄，神經節(jié)細胞層、內核層可見明顯新生血管；注射OECs組：內叢狀層、神經節(jié)細胞層水腫有減輕，內、外核層細胞排列較緊湊，仍然可見較多擴張血管；esRAGE-OECs組：視網膜組織水腫減輕，各層細胞較清晰規(guī)整，擴張血管有明顯減少，并且周圍有內皮細胞環(huán)繞；（3）免疫組織化學檢測提示：與CON組比較，DR組、OECs組、esRAGE-OECs治療組VEGF和TGF-β、的表達明顯增多，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；與OECs組和DM組相比較，esRAGE-OECs組VEGF、TGF-β的表達下降，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。 結論： 在DR中，玻璃體注射esRAGE基因修飾的OECs能減少VEGF、TGF-β的表達，可能改善視網膜組織的供血，起到治療DR的作用。
[Abstract]:Background and objectives:Diabetic retinopathy (DRR) is one of the major microvascular lesions in diabetes mellitus and has become one of the four major causes of blindness in adults worldwide.At present, there are drugs, laser and anti- VEGF therapy for Dr. This kind of treatment can only prevent the disease from getting worse.Therefore, finding a radical cure for Dr becomes a worldwide problem. Dr is a kind of disease of retinal microvascular endothelial cell injury, so the treatment of Dr repair microvascular becomes the key.In recent years, it has been found that exogenous endothelial progenitor cells (OECs) play an important role in the repair of microvascular diseases. The important role of AGEs-RAGE system in diabetic microangiopathy has been clarified, while endogenous secretory RAGE(endogenoussecretory RAGEG is a new splicing isomer in RAGE.It can block the inflammatory response mediated by AGEs.The aim of this study was to explore the therapeutic effect of esRAGE gene modified OECs on Dr rats, and to observe the effect of the cells on the retina of Dr rats and the expression of VEGF and TGF- 尾 in retina.Methods:Fifty male Sprague-Dawley rats were randomly divided into 4 groups: normal group (n = 8). The rest were induced by intraperitoneal injection of 1% streptozotocin (STZ) to induce DM model. The normal control group was injected with the same volume of citric acid buffer.The pathological changes of Dr were observed by fundus angiography for 3 months and 6 months, and then divided into groups.Each group was divided into normal control group, diabetic retinopathy group, OECs group and esRAGE-OECs group, respectively. After 4 weeks, fundus angiography was performed to observe the fundus lesion.The histopathological changes of retinal cells in each group were observed by HE staining after cardiac perfusion, and the expression of VEGF and TGF- 尾 in the retina of rats were detected by immunohistochemistry.Results:Different degrees of retinopathy were found in Dr rats at 6 months. The former showed obvious leakage, and the latter was more serious. Histopathology suggested that the structure of the retina was regular, and the structure of the retina was regular.In Dr group with normal morphology, edema appeared in various layers of retina, microvascular dilatation and hyperemia in ganglion cell layer, increase of nerve fiber layer spacing, rupture of vertical fiber, loose structure of inner and outer nuclear layer, disorder of arrangement and enlargement of nucleus.The nuclear layer was relatively thin, the ganglion cell layer and the nuclear layer were obviously neovascularization. In the OECs injection group, the edema of the ganglion cell layer was alleviated, and the cells in the inner and outer nuclear layer were arranged compactly.There were still more dilated vessels in esRAGE-OECs group: the edema of retinal tissue was alleviated, the cells in each layer were clear and regular, and the vasodilation was obviously decreased.The difference was statistically significant (P < 0.05).Conclusion:In Dr, vitreous injection of OECs modified by esRAGE gene can reduce the expression of VEGF TGF- 尾, and may improve the blood supply of retina and play a role in the treatment of Dr.
【學位授予單位】：南昌大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R587.2

【共引文獻】

相關期刊論文 前10條

1 李才,侯芳玉,張國軍,苗春生,鄒雅斌;糖尿病大鼠腎皮質糖基化終產物含量與纖溶酶原激活物抑制物-1表達的關系[J];吉林大學學報(醫(yī)學版);2002年06期

2 石芊;彭秀軍;;干細胞移植治療視網膜疾病的研究現(xiàn)狀[J];國際眼科雜志;2008年05期

3 徐巍;徐國興;;間充質干細胞在視網膜疾病研究中的應用[J];國際眼科雜志;2011年02期

4 謝燕丹;劉元生;;骨髓間充質干細胞在骨髓移植中的應用[J];廣西醫(yī)學;2007年02期

5 ;Mesenchymal stem cells for retinal diseases[J];International Journal of Ophthalmology(English Edition);2011年04期

6 洪玉;徐國興;;骨髓間充質干細胞與視網膜色素上皮細胞的蛋白質組學比較[J];福建醫(yī)科大學學報;2012年06期

7 李宏松;鄒俊;;脂肪干細胞在眼科的應用及研究進展[J];國際眼科雜志;2013年11期

8 戎欣;侯慧媛;郭庚;張暉;;干細胞移植在視網膜神經節(jié)細胞損傷修復中的應用[J];國際眼科雜志;2014年07期

9 石珂;趙璐;楊玉蘭;王盈盈;汪昌運;;靶向抑制GLUT1對糖尿病視網膜病變中視錐細胞的保護作用[J];第三軍醫(yī)大學學報;2014年15期

10 石芊;彭秀軍;;新生小鼠視網膜光感受器前體細胞的體外培養(yǎng)及鑒定[J];解放軍醫(yī)學雜志;2009年11期

相關博士學位論文 前10條

1 洪玉;骨髓間充質干細胞體外誘導分化為光感受器樣細胞的蛋白質組學研究[D];福建醫(yī)科大學;2011年

2 夏欣;糖化終末產物受體參與糖尿病視網膜病變機制及其干預研究[D];復旦大學;2004年

3 姚海舟;TGF-β1調節(jié)PA活性及PAI-1表達在糖尿病腎病進展中的作用[D];吉林大學;2006年

4 杜曉霞;晚期糖基化終末產物誘導人腎小管上皮細胞表達結締組織生長因子和纖維連接蛋白[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學;2005年

5 崔彥;線粒體活性氧與糖尿病視網膜病變關系及機制的研究[D];復旦大學;2006年

6 李曉魯;線粒體偶聯(lián)因子6在糖尿病中的臨床意義及其機制研究[D];山東大學;2007年

7 李冬松;VEGF基因修飾脂肪干細胞對糖尿病骨質疏松性骨缺損修復作用的研究[D];吉林大學;2008年

8 王晨;JAK/STAT信號通路抑制因子SOCS-1/3對糖尿病腎病作用及其機制的研究[D];河北醫(yī)科大學;2008年

9 宋可新;黑色素細胞與骨髓間充質干細胞復合構建組織工程皮膚的初步研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學;2008年

10 晁煒靜;人脂肪間充質干細胞分化為視網膜細胞及對視網膜變性疾病治療的實驗研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學;2008年

相關碩士學位論文 前10條

1 衛(wèi)佳;干細胞因子修飾的臍帶間充質干細胞對造血干細胞的作用[D];北京協(xié)和醫(yī)學院;2011年

2 韓冰;非瓣膜性房顫患者纖溶因素的變化及抗凝治療的影響[D];中南大學;2011年

3 張克劍;pEGFP/Ang-1轉染大鼠BMSCs視網膜下移植對糖尿病大鼠視網膜血管滲漏的影響[D];遼寧醫(yī)學院;2011年

4 王嬋嬋;視網膜分支靜脈阻塞及高度近視與非對稱性糖尿病視網膜病變關系[D];南昌大學;2011年

5 劉翔飛;人脂肪間充質干細胞治療糖尿病腎病大鼠的研究[D];大連醫(yī)科大學;2011年

6 陳培紅;2型糖尿病白蛋白尿與大血管病變的關系研究[D];蘇州大學;2011年

7 蔡虹靜;klotho基因在糖尿病腎病患者體內表達狀況的研究[D];山東大學;2011年

8 王麟;血管緊張素Ⅱ對高糖培養(yǎng)大鼠血管平滑肌細胞核轉錄因子κB活化的影響[D];中國醫(yī)科大學;2004年

9 白曉麗;血栓調節(jié)蛋白、纖溶酶原激活物抑制物-1與糖尿病腎病中的作用[D];山西醫(yī)科大學;2006年

10 姚麗;糖心康對糖尿病大鼠心肌NF-κB表達的影響[D];黑龍江中醫(yī)藥大學;2006年

本文編號：1682353