本文選題：己烯雌酚　切入點(diǎn)：枸杞多糖　出處：《河北農(nóng)業(yè)大學(xué)》2014年碩士論文

【摘要】：本實(shí)驗(yàn)旨在研究己烯雌酚（Diethylstilbestrol，DES）對(duì)成年雄性倉(cāng)鼠生殖損傷的作用機(jī)制及枸杞多糖（Lyciumbar barum polysaccharide，LBP）的緩解作用。將66只成年雄性倉(cāng)鼠隨機(jī)分為空白對(duì)照組（A），DES組（B），1mg/kg、10mg/kg及50mg/kg LBP組（C，D，E）及VC+VE組（F）（n=11）。除對(duì)照組外，其余5組均皮下注射己烯雌酚，對(duì)照組注射等劑量的橄欖油，連續(xù)用藥7d，同時(shí)C、D、E組分別灌胃1、10、50mg/kg的LBP，F(xiàn)組灌服100mg/kg的VC及200IU/kg的VE，A、B組灌服等劑量的生理鹽水。于末次給藥24h后，乙醚麻醉倉(cāng)鼠，心臟采血，分離血清，分別用于氧化指標(biāo)SOD、GSH-Px、MDA及激素T、LH、FSH的檢測(cè)；分別摘取兩側(cè)睪丸、附睪、精囊腺，迅速去除周?chē)炯敖Y(jié)締組織稱(chēng)量并計(jì)算臟器指數(shù)；于波恩氏液固定睪丸制成切片觀察組織學(xué)變化，并進(jìn)行免疫組化Bax、Fas、FasL及Caspase-3的檢測(cè)；取睪丸迅速保存于液氮中進(jìn)行RT-PCR及Western-blot檢測(cè)，確定Bcl-2、Bax、Fas、FasL及Caspase-3的表達(dá)。 結(jié)果顯示DES顯著降低倉(cāng)鼠體重、器官重量及器官指數(shù)，而10/50mg/kg LBP及維生素對(duì)其有顯著緩解作用（P0.05）；DES處理組倉(cāng)鼠睪丸組織結(jié)構(gòu)嚴(yán)重?fù)p傷，LBP作用后其損傷顯著減輕，其中以10/50mg/kg LBP的作用最為明顯，VC+VE也對(duì)其有的緩解作用，且50mg/kg LBP組與VC+VE組無(wú)顯著差異。通過(guò)免疫組織化學(xué)、RT-PCR及Western-blot的方法檢測(cè)睪丸組織Bcl-2、Bax、Fas、FasL及Caspase-3的表達(dá)，結(jié)果顯示DES顯著降低Bcl-2的表達(dá)（P0.01），提高Bax、Fas、FasL及Caspase-3的表達(dá)（P0.05）；給予不同劑量的LBP后，Bcl-2的表達(dá)呈劑量依賴(lài)性增加，以50mg/kg LBP增加最為顯著（P0.01），Bax、Fas、FasL及Caspase-3的表達(dá)呈LBP劑量依賴(lài)性降低，以50mg/kg LBP組表達(dá)最低（P0.01）；與VC+VE組相比，50mg/kg LBP對(duì)凋亡蛋白的調(diào)節(jié)作用差異不顯著；在抗氧化指標(biāo)檢測(cè)中，DES顯著性降低血清SOD、GSH-Px水平（P0.01），增加MDA水平（P0.01）；補(bǔ)充不同劑量的LBP后，血清SOD、GSH-Px水平增加（P0.01），而MDA水平下降（P0.01），VC+VE組對(duì)機(jī)內(nèi)抗氧化指標(biāo)的作用要優(yōu)于LBP組；對(duì)血清生殖激素的檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，，血清FSH、LH和T的水平在DES作用下降低（P0.01）；而LBP對(duì)血清中激素的水平有不同程度的提高，其中以50mg/kg作用最顯著（P0.01）。 結(jié)論：本實(shí)驗(yàn)證實(shí)，DES通過(guò)降低機(jī)體抗氧化酶活性，擾亂生殖內(nèi)分泌系統(tǒng)，激活體內(nèi)的生殖凋亡途徑導(dǎo)致成年雄性倉(cāng)鼠生殖損傷；補(bǔ)充不同劑量的LBP后，LBP降低睪丸組織的脂質(zhì)過(guò)氧化水平，升高抗氧化酶活性；提高生殖激素FSH、LH和T的水平；抑制Bax、Fas、FasL及Caspase-3凋亡因子的表達(dá)，而促進(jìn)Bcl-2的表達(dá)，結(jié)果提示10mg/kg或50mg/kg LBP能夠有效緩解DES誘導(dǎo)的成年雄性倉(cāng)鼠的生殖損傷。
[Abstract]:The aim of this study was to study the mechanism of diethylstilbestrol diethylstilbene (Diethylstilbene) on reproductive injury in adult male hamsters and the effect of Lycium barbarum barum polysaccharide on LBP.The 66 adult male hamsters were randomly divided into control group (1 mg / kg) and 50mg/kg LBP group (10 mg / kg) and VC. In VE group, there was no significant difference between the two groups, except for the control group. The other five groups were subcutaneously injected with diethylstilbestrol, while the control group was injected with olive oil of the same dose for 7 days. Meanwhile, the control group was given intragastric administration of VC of 100mg/kg and the group of 200IU/kg was given saline of the same dose 24 hours after the last administration. The rats were anesthetized with ether, the blood was collected from the heart, the serum was isolated and used for the detection of the oxidation index SODX GSH-PxX MDA and the hormone TLHH FSH, the testis, epididymis and seminal vesicle were removed, the surrounding fat and connective tissue were removed rapidly and the visceral index was calculated. The specimens of testis were fixed in Bonn's fluid to observe the histological changes, and the expression of FasL and Caspase-3 in Bax-2P Bax-Fas-FasL and Caspase-3 were determined by immunohistochemical staining, and the RT-PCR and Western-blot of the testis were rapidly preserved in liquid nitrogen to determine the expression of FasL and Caspase-3. The results showed that DES significantly reduced the body weight, organ weight and organ index of hamsters, and that 10/50mg/kg LBP and vitamin could significantly alleviate the damage to the testis of hamsters treated with P0.05DES. The effect of 10/50mg/kg LBP was the most obvious, and there was no significant difference between the 50mg/kg LBP group and the VC VE group. The expression of Bcl-2 LBP FasL and Caspase-3 in testicular tissue was detected by immunohistochemistry RT-PCR and Western-blot. The results showed that DES significantly decreased the expression of Bcl-2 and increased the expression of FasL and Caspase-3 in LBP, and increased the expression of Bcl-2 in a dose-dependent manner, especially in 50mg/kg LBP. Compared with VC VE group, the effect of 50 mg / kg LBP on apoptosis protein in 50mg/kg LBP group was lower than that in VC VE group, and DES significantly decreased serum SDS-GSH-Px level and increased MDA level (P0.01). The level of GSH-Px in serum increased P0.01, while the level of MDA in VC VE group was better than that in LBP group. The levels of serum FSH LH and T decreased under the action of DES, while LBP increased the levels of serum hormones to varying degrees, among which 50mg/kg played the most significant role in P0.01. Conclusion: this study demonstrated that des could induce reproductive injury in adult male hamsters by reducing the activity of antioxidant enzymes, disrupting the reproductive endocrine system and activating the pathway of reproductive apoptosis in vivo. After different doses of LBP supplementation, LBP decreased the level of lipid peroxidation in testis, increased the activity of antioxidant enzymes, increased the levels of FSH LH and T, inhibited the expression of FasL and Caspase-3 apoptosis factor, and promoted the expression of Bcl-2. The results suggest that 10mg/kg or 50mg/kg LBP can effectively alleviate the reproductive injury induced by DES in adult male hamsters.
【學(xué)位授予單位】：河北農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類(lèi)號(hào)】：S853.7

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本文編號(hào)：1659315