本文選題：大鼠　切入點：鞘內(nèi)置管　出處：《蘇州大學(xué)》2016年博士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：第一部分腰硬聯(lián)合穿刺技術(shù)用于改良大鼠鞘內(nèi)置管術(shù)目的:大鼠鞘內(nèi)置管與給藥技術(shù)在神經(jīng)科學(xué)和疼痛研究中是一項重要的實驗方法。該技術(shù)自被報道以來不斷被加以改進,但是多年來經(jīng)驗提示仍然有許多缺陷未被有效解決。方法:我們通過對標(biāo)準(zhǔn)硬膜外穿刺針和腰麻穿刺針進行簡單改造,開發(fā)出一種類似腰硬聯(lián)合麻醉“針中針”技術(shù)的大鼠鞘內(nèi)置管方法。首先通過腰部皮膚切口將硬膜外針插入皮下,頂端抵達椎間孔;然后在硬膜外針中插入腰麻針,并在黃韌帶和珠網(wǎng)膜上鉆孔;最后通過硬膜外針體上的側(cè)孔將PE-10導(dǎo)管置入蛛網(wǎng)膜下腔。為了與傳統(tǒng)置管方法比較,椎板切除法(對照組)或我們的改良技術(shù)(改良組)被用于大鼠鞘內(nèi)置管。記錄兩組手術(shù)時間、成功率及術(shù)后并發(fā)癥的發(fā)生率。分別在術(shù)前1天和術(shù)后第1~3和5、7、14、21天測量大鼠熱縮爪潛伏期、機械縮爪閾值和運動功能變化,以評估鞘內(nèi)置管對神經(jīng)功能的影響。結(jié)果:我們的改良方法與椎板切除法相比,更加簡單方便,具有較少的手術(shù)創(chuàng)傷,較好的位置精確性,更牢固的導(dǎo)管固定,較小的死亡率。手術(shù)本身沒有干擾行大鼠神經(jīng)行為學(xué)和運動協(xié)調(diào)。結(jié)論:該改良鞘內(nèi)置管方法可較好地用于有關(guān)脊髓部位的神經(jīng)行為學(xué)和藥理學(xué)研究。第二部分HDAC和HAT抑制劑對骨癌痛大鼠痛覺過敏和BDNF介導(dǎo)的突觸可塑性的影響目的:癌性疼痛對癌癥患者產(chǎn)生不利影響,在臨床上通常很難得到有效治療。我們的既往研究表明,從脊髓小膠質(zhì)細胞釋放的腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)對于骨癌接種誘導(dǎo)的大鼠痛覺過敏是必需的。BDNF是一個重要的表觀遺傳靶基因,受組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶(HAT)和組蛋白去乙�；�(HDAC)酶之間平衡的調(diào)節(jié)。BDNF的組蛋白乙�；{(diào)控在骨癌痛發(fā)生發(fā)展中的作用還知之甚少。因此,本研究的目標(biāo)是探討HAT抑制劑-姜黃素(CUR)和HDAC抑制劑-辛二酰苯胺異羥肟酸(SAHA)對痛行為學(xué)和脊髓背角BDNF和突觸素1(SYN1)表達的影響。方法:40只雌性SD大鼠隨機分為5組:對照組、骨癌痛+溶媒組、骨癌痛+SAHA25μg組、骨癌痛+SAHA 5μg組、骨癌痛+SAHA 1μg組。大鼠左脛骨上端注入Walker256細胞制備骨癌痛模型。建模后第6~8天,SAHA各劑量組大鼠分別鞘內(nèi)注射相應(yīng)劑量的SAHA;溶媒組鞘內(nèi)注射5%DMSO 20μl。分別于術(shù)前及術(shù)后第1~18天測定大鼠機械縮足閾值(PWT)。另取32只雌性SD大鼠隨機分為4組:假手術(shù)對照組(SHAM)、骨癌痛+溶媒組(VEH)、骨癌痛+SAHA組(SAHA)、骨癌痛+CUR組(CUR)。在大鼠建模后第6~8天,SAHA組大鼠腹腔注射SAHA 50mg/kg,CUR組大鼠腹腔注射CUR 50mg/kg,VEH組大鼠腹腔注射相同容量的DMSO,1次/天,連續(xù)3天。機械痛閾值測定同前。另取48只雌性大鼠,分組和處理同前。在造模后第9天,各組分別取4只大鼠進行免疫熒光雙標(biāo)染色、Western blots和Real-time PCR實驗以檢測BDNF、SYN1、ac H3K9和ac H4K16在脊髓組織表達。結(jié)果:造模后6-18天,大鼠機械痛閾值顯著降低。鞘內(nèi)注射不同劑量的SAHA組呈劑量依賴性地提高PWT值。免疫熒光雙標(biāo)顯示BDNF分別與神經(jīng)元和小膠質(zhì)細胞共表達,而ACH3k9、ACH4k16和SYN1只存在于神經(jīng)元。接種后6~8天連續(xù)腹腔注射SAHA能夠逆轉(zhuǎn)BCP誘導(dǎo)的機械痛敏,增加H3K9和H4k16的乙�；�,減少脊髓背角BDNF/SYN1的表達。應(yīng)用CUR對大鼠機械痛閾和BDNF/SYN1表達沒有顯著影響。結(jié)論:HDAC抑制劑以一種間接的方式下調(diào)骨癌痛大鼠脊髓BDNF/SYN1表達,而發(fā)揮抗痛覺過敏作用。第三部分表觀遺傳調(diào)控對骨癌痛大鼠認知障礙和海馬組織BDNF/SYN1表達的影響目的:既往研究表明,長期慢性疼痛刺激通過下調(diào)BDNF表達對學(xué)習(xí)記憶產(chǎn)生顯著影響。BDNF是一個重要的表觀遺傳調(diào)控靶基因。本研究采用大鼠骨癌痛動物模型,觀察HAT抑制劑-姜黃素(CUR)和HDAC抑制劑-辛二酰苯胺異羥肟酸(SAHA)治療對骨癌接種后認知功能和海馬組織BDNF/SYN1表達的影響,旨在為預(yù)防癌痛誘發(fā)的認知功能障礙提供實驗依據(jù)。方法:28只雌性SD大鼠隨機分為7組:正常對照組、假手術(shù)組和造模后第3、6、12、18天組。于大鼠左脛骨上端注入Walker256細胞制備骨癌痛模型。Western blots檢測每個時間點海馬組織BDNF/SYN1表達量。另取4只大鼠在造模后第12天組行BDNF、SYN1、ac H3k9和ac H4K16分別與神經(jīng)細胞標(biāo)記物(GFAP、OX42、Neu N)的免疫熒光雙標(biāo)染色。另有32只雌性SD大鼠隨機分為4組:假手術(shù)對照組(SHAM)、骨癌痛+溶媒組(VEH)、骨癌痛+SAHA組(SAHA)、骨癌痛+CUR組(CUR)。在造模后第10~13天,VEH組、SAHA組和CUR組分別腹腔注射相應(yīng)的藥物,1次/天,連續(xù)4天。Morris水迷宮實驗和神經(jīng)認知功能評分被用來測量大鼠空間學(xué)習(xí)記憶能力。Western blots或Real-time PCR用來檢測海馬組織BDNF/SYN1表達。結(jié)果:海馬SYN1/BDNF在造模后3天有一個升高的過程,之后則迅速下降。免疫熒光結(jié)果顯示,海馬組織BDNF和ac H3K9主要分布于小膠質(zhì)細胞。在造模后第11~13天(水迷宮實驗第2~4天),VEH組大鼠隱藏平臺潛伏期和游泳距離平均值與SHAM組相比顯著延長。連續(xù)4天應(yīng)用SAHA能顯著逆轉(zhuǎn)這一趨勢。在參照記憶任務(wù)中,SAHA組與VEH組比較,在目標(biāo)象限所花費的時間百分比顯著增加。在造模后14天,SAHA能夠顯著改善骨癌痛誘導(dǎo)的海馬組織BDNF\SYN1表達的下調(diào)。CUR治療組與VEH組相比并沒有顯著差異。結(jié)論:骨癌痛可導(dǎo)致大鼠認知功能障礙,可能與海馬BDNF/SYN1的表達下調(diào)有關(guān)。而SAHA可以通過表觀遺傳機制上調(diào)BDNF/SYN1表達而改善骨癌痛大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R614

【相似文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 黃靄蓮;癌痛酊治療癌痛38例觀察[J];華夏醫(yī)學(xué);2003年02期

2 倪家驤;癌痛的診斷與治療[J];實用醫(yī)學(xué)雜志;2003年04期

3 姚東旭;癌痛是怎樣產(chǎn)生的?[J];中國疼痛醫(yī)學(xué)雜志;2003年03期

4 ;2012癌痛專家中國行在京穗滬三地舉行(英文)[J];Chinese-German Journal of Clinical Oncology;2012年07期

5 王晶;胡衛(wèi);詹玲;萬信念;焦良波;陳濤;;癌痛形成機制及模型研究進展[J];安徽醫(yī)藥;2013年08期

6 陶慶玲;;對成人癌痛的評定[J];國外醫(yī)學(xué)(內(nèi)科學(xué)分冊);1989年09期

7 高萍，，李芝秀;癌痛的中醫(yī)藥治療[J];貴陽醫(yī)學(xué)院學(xué)報;1995年03期

8 付星辰;周連富;周黎明;吳利;;癌痛克治療癌痛的療效觀察[J];廣東醫(yī)學(xué);1996年11期

9 鄒麗娟,韓秀敏,周明臣,常鐵君;癌痛綜合征的治療[J];醫(yī)師進修雜志;1997年04期

10 楊克勤;;遭遇癌痛怎么辦?[J];藥物與人;2005年06期

相關(guān)會議論文 前10條

1 陳偉;韋若梨;;癌痛控制的現(xiàn)狀與體會[A];第六屆中國癌癥康復(fù)與姑息醫(yī)學(xué)大會大會論文集和專題講座[C];2010年

2 王羽豐;趙金奇;張燦珍;聶俊;楊梅;陳云蘭;;對云南省3331位醫(yī)生癌痛控制的調(diào)查[A];2009醫(yī)學(xué)前沿論壇暨第十一屆全國腫瘤藥理與化療學(xué)術(shù)會議論文集[C];2009年

3 俞衛(wèi)鋒;;基于癌痛機理研究的不同階段的綜合治療策略[A];2006年中華醫(yī)學(xué)會全國麻醉學(xué)術(shù)年會知識更新講座[C];2006年

4 ;北京市癌痛狀況調(diào)查[A];第七屆全國癌癥康復(fù)與姑息醫(yī)學(xué)大會大會論文集和專題講座[C];2011年

5 黃靜;丁紀(jì)元;;探析中醫(yī)治療癌痛的經(jīng)驗[A];2013年第六屆國家級分子靶點藥物治療新進展學(xué)習(xí)班暨浙江省腫瘤化療學(xué)術(shù)年會論文集[C];2013年

6 徐兵;;腫瘤患者癌痛的護理[A];中華護理學(xué)會全國腫瘤護理學(xué)術(shù)交流暨專題講座會議論文匯編[C];2009年

7 詹漢麗;;癌癥患者疼痛的護理[A];中華護理學(xué)會全國腫瘤護理學(xué)術(shù)交流暨專題講座會議論文匯編[C];2009年

8 李信明;周強;李定明;魏安寧;;頑固性癌痛的的病因分析研究[A];中華醫(yī)學(xué)會疼痛學(xué)分會第八屆年會暨CASP成立二十周年論文集[C];2009年

9 施志明;劉嘉湘;趙麗紅;李和根;劉苓霜;;癌痛靈鎮(zhèn)痛實驗研究[A];第八屆全國中西醫(yī)結(jié)合腫瘤學(xué)術(shù)會議論文集[C];2000年

10 羅健;李倩;;關(guān)于中國癌痛綜合治療與藥物治療進展及發(fā)展的幾點思考[A];第六屆中國癌癥康復(fù)與姑息醫(yī)學(xué)大會大會論文集和專題講座[C];2010年

相關(guān)重要報紙文章 前10條

1 中日友好醫(yī)院疼痛科 楊克勤;遭遇癌痛怎么辦[N];家庭醫(yī)生報;2005年

2 成都中醫(yī)藥大學(xué) 蒲昭和 副研究員;中藥止癌痛有哪些優(yōu)點?[N];上海中醫(yī)藥報;2012年

3 天津市腫瘤醫(yī)院疼痛科主任 王昆 李運紅 朱蕓 整理;治療癌痛 不必擔(dān)心嗎啡成癮[N];光明日報;2013年

4 身體周刊記者 屠俊;微創(chuàng)緩解癌痛[N];東方早報;2013年

5 張福泉;女性癌痛如何控制[N];家庭醫(yī)生報;2007年

6 北京協(xié)和醫(yī)院腫瘤放療科 張福泉;緩解癌痛可用放射方法[N];健康報;2007年

7 記者夏冰冰采寫;癌痛是可以分擔(dān)的[N];醫(yī)藥導(dǎo)報;2009年

8 湖南省腫瘤醫(yī)院 趙江洪 王明德;癌痛需要綜合治[N];大眾衛(wèi)生報;2002年

9 重慶市第七人民醫(yī)院 陳永久;中醫(yī)止癌痛一得[N];民族醫(yī)藥報;2000年

10 盧慧;安神止痛法治癌痛[N];農(nóng)村醫(yī)藥報（漢）;2006年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 徐錢;TGF-β敏化初級感覺神經(jīng)元TRPV1受體：介導(dǎo)骨癌痛的分子機制[D];復(fù)旦大學(xué);2012年

2 張曉萌;基質(zhì)金屬蛋白酶-9介導(dǎo)骨癌痛的外周機制[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

3 周友浪;背根神經(jīng)節(jié)中嘌呤能受體P2X3R介導(dǎo)骨癌痛的表觀調(diào)控機制研究[D];蘇州大學(xué);2016年

4 程偉;UCHL1/ubiquitin在脛骨癌痛大鼠脊髓的改變及其對膠質(zhì)細胞活化的影響[D];山東大學(xué);2016年

5 侯永恒;表觀遺傳調(diào)控對骨癌痛大鼠痛覺過敏與認知障礙以及BDNF介導(dǎo)的突觸可塑性的影響[D];蘇州大學(xué);2016年

6 夏小萍;脊髓谷氨酸轉(zhuǎn)運體在小鼠癌痛發(fā)病機制中的作用的研究[D];中國醫(yī)科大學(xué);2007年

7 王麗娜;腦源性神經(jīng)營養(yǎng)分子在大鼠骨癌痛中的作用及其神經(jīng)免疫機制[D];蘇州大學(xué);2012年

8 李婷婷;脊髓MAPK參與大鼠轉(zhuǎn)移性骨癌痛的機制[D];復(fù)旦大學(xué);2010年

9 杭黎華;大鼠脊髓TDAG8及其下游信號通路在骨癌痛中的作用[D];蘇州大學(xué);2013年

10 陳莎莎;重構(gòu)型自發(fā)活化Caspase3基因的構(gòu)建及其在骨癌痛大鼠的鎮(zhèn)痛效應(yīng)研究[D];華中科技大學(xué);2010年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 胡粉娟;MrgC受體對大鼠骨癌痛的調(diào)制作用[D];福建師范大學(xué);2015年

2 程三珍;新型癌痛膏貼的制備及臨床研究[D];湖北中醫(yī)藥大學(xué);2015年

3 張輝;米諾環(huán)素對脛骨癌痛大鼠嗎啡耐受的作用及機制初探[D];復(fù)旦大學(xué);2011年

4 孫艷;MCP-1/ERK信號通路參與骨癌痛的作用機制[D];蘇州大學(xué);2013年

5 彭艷;鞘內(nèi)注射氟代檸檬酸對骨癌痛大鼠的鎮(zhèn)痛作用[D];蘇州大學(xué);2008年

6 趙倩倩;脛骨癌痛大鼠痛覺敏化的形成及其脊髓機制[D];山東大學(xué);2012年

7 鄭小艷;鞘內(nèi)注射單核細胞趨化蛋白-1中和抗體緩解大鼠骨癌痛[D];蘇州大學(xué);2012年

8 肖柳;癌痛貼毒性實驗及三種劑型的臨床研究[D];湖北中醫(yī)藥大學(xué);2012年

9 王妙苗;大鼠骨移植癌痛模型的建立及其機制的初步研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2008年

10 梅喜;NR2B在骨癌痛小鼠的前扣帶回和脊髓中的分布與表達[D];中南大學(xué);2010年

本文編號：1627586