本文關(guān)鍵詞： 間質(zhì)性膀胱炎 TGFβ MAPK 硫酸魚精蛋白 乙酰半胱氨酸 大鼠膀胱炎 SP600125　出處：《第三軍醫(yī)大學(xué)》2014年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：研究背景及目的： 間質(zhì)性膀胱炎（interstitil cystitis，IC）是一種累及膀胱壁全層的慢性炎性疾病，主要臨床表現(xiàn)為下尿路癥狀伴恥骨上區(qū)的疼，膀胱容量進(jìn)行縮小，其病因至今不明。目前國內(nèi)外對IC逼尿肌病變?nèi)匀狈ρ芯浚瑢?dǎo)致IC肌層的分子生物學(xué)甚至是形態(tài)學(xué)研究幾乎是一片空白。TGFβ被認(rèn)在多種纖維化疾病的發(fā)生中起到重要作用，而MAPK通路是參與炎癥及纖維化調(diào)節(jié)的重要信號(hào)通路。本實(shí)驗(yàn)研究了人類間質(zhì)性膀胱炎膀胱形態(tài)學(xué)及TGFβ，MAPK信號(hào)通路相關(guān)蛋白的表達(dá)水平，并探索NAC及JNK通路抑制劑對大鼠膀胱炎模型的治療作用及可能機(jī)制。 方法： 本實(shí)驗(yàn)選取了11例間質(zhì)性膀胱炎膀胱標(biāo)本及9例膀胱癌癌旁正常組織。形態(tài)學(xué)采用H.E.染色觀察粘膜上皮缺損，膀胱間質(zhì)炎癥浸潤；甲苯胺藍(lán)染色觀察肥大細(xì)胞數(shù)量；Masson染色觀察膀胱壁膠原纖維沉積。使用免疫組化染色觀察TGFβ，Smad2/3，p-Smad2/3，CTGF表達(dá)及分布。使用Westernblot檢測TGFβ，Smad2/3，p-Smad2/3，CTGF，JNK，p-JNK，c-jun，p-c-jun，ERK1/2，p-ERK1/2，P38，p-P38，IL-6，TNF-α表達(dá)量。 采用雌性SD大鼠112只，隨機(jī)分為正常對照組，生理鹽水灌注組，硫酸魚精蛋白灌注組，硫酸魚精蛋白灌注+生理鹽水注射組，PPCES注射+硫酸魚精蛋白灌注組，SP600125注射+硫酸魚精蛋白灌注組，乙酰半胱氨酸注射+硫酸魚精蛋白灌注組。每組16只大鼠。所有大鼠每周處理三次，持續(xù)一個(gè)月。模型成功后，每組大鼠隨機(jī)選取8只行麻醉下膀胱尿動(dòng)力學(xué)檢測。記錄大鼠膀胱基壓，BP,膀胱峰壓PP,收縮間歇ICI,膀胱容量BC。取大鼠膀胱行H.E.染色觀察粘膜上皮缺損，膀胱間質(zhì)炎癥浸潤；甲苯胺藍(lán)染色觀察肥大細(xì)胞數(shù)量。Westernblot檢測JNK，p-JNK，c-jun，p-c-jun，IL-6，TNF-α表達(dá)量。 結(jié)果： 1. H.E.染色，甲苯胺藍(lán)染色，Masson染色顯示人間質(zhì)性膀胱炎膀胱較正常組織，上皮變薄，，肥大細(xì)胞浸潤明顯，逼尿肌肌束間膠原纖維沉積明顯。 2.免疫組化染，Westernblot檢測提示人間質(zhì)性膀胱炎膀胱TGFβ，Smad2/3，p-Smad2/3，CTGF， p-JNK，IL-6，TNF-α表達(dá)量較正常組織明顯升高（P〈0.05）。Westernblot檢測提示ERK1/2，p-ERK1/2表達(dá)下降（P〈0.05）；P38，p-P38，JNK表達(dá)無差異（P〉0.05）。 3.動(dòng)物實(shí)驗(yàn)H.E.染色，甲苯胺藍(lán)染色提示NAC，SP600125能夠降低膀胱炎癥（P〈0.05），減少肥大細(xì)胞浸潤（P〈0.05）。尿動(dòng)力學(xué)檢測提示NAC，SP600125能改善收縮間歇ICI（P〈0.05）,膀胱容量BC（P〈0.05），但對膀胱基壓，BP,膀胱峰壓PP改善不明顯（P〈0.05）。 4.動(dòng)物實(shí)驗(yàn)Westernblot檢測提示NAC能夠降低p-c-jun，IL-6，TNF-α（P〈0.05）。提示NAC能夠降低JNK通路活性來降低炎癥因子釋放。 進(jìn)一步的，SP600125干預(yù)組大鼠膀胱p-JNK，p-c-jun，IL-6，TNF-α表達(dá)均較對照組降低（P〈0.05），提示SP600125能夠降低JNK通路活性來降低炎癥因子釋放。 結(jié)論： 在人類間質(zhì)性膀胱炎，膀胱纖維化及炎癥可能和TGFβ及MAPK通路的激活有關(guān)。在硫酸魚精蛋白誘導(dǎo)的大鼠膀胱炎模型，NAC能緩解膀胱炎癥改善尿動(dòng)力參數(shù)，其機(jī)制可能是降低JNK通路活性減少IL-6，TNF-α炎癥因子表達(dá)。而進(jìn)一步使用JNK通路抑制劑SP600125干預(yù)模型大鼠提示降低JNK通路活性能明顯減少炎癥因子釋放，改善膀胱炎癥及尿動(dòng)力學(xué)參數(shù)。
[Abstract]:Research background and purpose:
Interstitial cystitis (interstitil cystitis IC) is a kind of bladder wall involving chronic inflammatory disease, the main clinical manifestations of lower urinary tract symptoms associated with suprapubic pain, bladder capacity was reduced, its etiology is still unknown. At home and abroad on the IC is still lack of research on these changes, resulting in molecular biology IC muscle and even morphological research is almost a blank.TGF beta is considered to play an important role in the occurrence of a variety of fibrotic diseases, while the MAPK pathway is an important signaling pathway involved in the regulation of inflammation and fibrosis. The experimental study of human interstitial cystitis bladder morphology and TGF beta, the expression level of MAPK signaling pathway protein, and to explore the therapeutic effect of NAC and JNK pathway inhibitor on rat cystitis model and its possible mechanism.
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本文編號(hào)：1493943