發(fā)布時(shí)間：2017-11-11 09:35

  本文關(guān)鍵詞：針刺環(huán)跳穴不同組織部位對(duì)坐骨神經(jīng)損傷大鼠GAP-43和MAP-2表達(dá)的影響

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【摘要】：目的:基于電針在周圍神經(jīng)損傷治療中良好的臨床療效,從實(shí)驗(yàn)角度探尋電針治療周圍神經(jīng)損傷,通過針刺環(huán)跳穴所對(duì)應(yīng)的不同組織—肌肉和神經(jīng)干—觀察坐骨神經(jīng)損傷修復(fù)效果;以及坐骨神經(jīng)損傷段中生長(zhǎng)相關(guān)蛋白GAP-43和微管相關(guān)蛋白MAP-2的表達(dá)情況,比較針刺神經(jīng)干與針刺肌肉在本病治療效果上的差異。材料與方法:SPF級(jí)SD大鼠84只,體質(zhì)量200±20 g,月齡2-3個(gè)月,雌雄各均,應(yīng)用隨機(jī)數(shù)字表將其分為空白組,鉗夾模型組,橫斷模型組,鉗夾深刺(神經(jīng)干)組、鉗夾淺刺(肌肉),橫斷深刺(神經(jīng)干)組,橫斷淺刺(肌肉)組,7組,每組12只。采用改良邵金水等人的造模方法制成兩種大鼠急性坐骨神經(jīng)損傷模型:坐骨神經(jīng)鉗夾損傷模型和坐骨神經(jīng)橫斷損傷模型[1]。造模成功第4天,開始進(jìn)行電針干預(yù),空白組不做任何處理,按常規(guī)喂養(yǎng);模型組在造模成功后,保持相同條件,正常喂養(yǎng);深刺組用電針針刺至環(huán)跳穴下坐骨神經(jīng)干處,以大鼠出現(xiàn)下肢瞬間抽動(dòng)為度,淺刺組用電針針刺至環(huán)跳穴下肌肉處,大鼠不出現(xiàn)瞬間抽動(dòng)現(xiàn)象。電針治療時(shí)間20 min/次,治療10 d。治療10 d后進(jìn)行取材,10%水合氯醛(0.3 ml/100 g)腹腔注射麻醉,暴露患側(cè)坐骨神經(jīng),切取包括損傷段在內(nèi)上下各2 mm的坐骨神經(jīng),大鼠雙側(cè)腓腸肌。行為學(xué)通過斜板實(shí)驗(yàn)檢測(cè),考察大鼠經(jīng)過電針不同環(huán)跳組織部位后運(yùn)動(dòng)功能的恢復(fù);用電子天平測(cè)量雙側(cè)腓腸肌濕重,考察電針干預(yù)后大鼠肌肉組織萎縮和恢復(fù)情況;形態(tài)學(xué)用HE染色觀察受損坐骨神經(jīng)的形態(tài)變化;通過分子生物檢測(cè)法,觀察受損神經(jīng)段中GAP-43和MAP-2的表達(dá),所得結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果:1.斜板實(shí)驗(yàn)觀察斜板實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,與空白組相比,兩種模型組大鼠斜板實(shí)驗(yàn)傾斜角度均有降低(p0.01),提示坐骨神經(jīng)受到損傷后,大鼠出現(xiàn)運(yùn)動(dòng)功能障礙;與鉗夾模型組相比,橫斷模型組降低程度有明顯差異(p0.01);電針治療后,與橫斷模型組相比,橫斷淺刺組、橫斷深刺組大鼠斜板實(shí)驗(yàn)傾斜角度有提高(p0.01);與橫斷淺刺組相比,橫斷深刺組大鼠斜板實(shí)驗(yàn)傾斜角度的提升有差異(p0.05);與鉗夾模型組相比,鉗夾淺刺組、鉗夾深刺組大鼠斜板實(shí)驗(yàn)傾斜角度有明顯提高(p0.05);與鉗夾淺刺組相比,鉗夾深刺組大鼠斜板實(shí)驗(yàn)傾斜角度的提升有差異(p0.05);其中橫斷深刺組和鉗夾深刺組已接近空白組水平。2.腓腸肌濕重恢復(fù)率腓腸肌濕重結(jié)果顯示:與空白組相比,兩種模型組大鼠患側(cè)腓腸肌濕重均有一定程度的降低(p0.01);與鉗夾模型組相比,橫斷模型組降低更為明顯(p0.01);電針治療后,大鼠患側(cè)腓腸肌濕重和恢復(fù)率均有升高,與橫斷模型組相比,橫斷淺刺組、橫斷深刺組大鼠患側(cè)腓腸肌濕重和恢復(fù)率有明顯差異(p0.01);與橫斷淺刺組相比,橫斷深刺組大鼠患側(cè)腓腸肌濕重和恢復(fù)率有差異(p0.05),與鉗夾模型組相比,鉗夾淺刺組、鉗夾深刺組大鼠患側(cè)腓腸肌濕重和恢復(fù)率有明顯差異(p0.01);與鉗夾淺刺組相比,鉗夾深刺組大鼠患側(cè)腓腸肌濕重和恢復(fù)率有差異(p0.01)。3.坐骨神經(jīng)HE染色觀察坐骨神經(jīng)HE染色結(jié)果顯示:空白組坐骨神經(jīng)內(nèi)軸突及雪旺細(xì)胞排列整齊;兩種模型組內(nèi)軸突及雪旺細(xì)胞不規(guī)則排列,雪旺細(xì)胞出現(xiàn)腫脹、破潰、甚則崩裂現(xiàn)象,橫斷模型組甚于鉗夾模型組;電針治療后,各組軸突及雪旺細(xì)胞排列、腫脹變性程度均有好轉(zhuǎn),橫斷深刺組優(yōu)于橫斷淺刺組,鉗夾深刺組優(yōu)于鉗夾淺刺組。4.免疫組化檢測(cè)生長(zhǎng)相關(guān)蛋白GAP-43:空白組中GAP-43在坐骨神經(jīng)內(nèi)少量表達(dá),陽性胞核呈藍(lán)色,胞漿呈棕褐色;與空白對(duì)照組比較,其余各組大鼠坐骨神經(jīng)中GAP-43蛋白表達(dá)水平上調(diào)有顯著差異(p0.01);電針治療后,與橫斷模型組相比,橫斷深刺組蛋白表達(dá)水平上調(diào)有明顯差異(p0.01);與橫斷淺刺組相比,橫斷深刺組蛋白表達(dá)水平上調(diào)有明顯差異(p0.01);與鉗夾模型組相比,鉗夾淺刺組、鉗夾深刺組蛋白表達(dá)水平上調(diào)有明顯差異(p0.01);與鉗夾淺刺組相比,鉗夾深刺組蛋白表達(dá)水平上調(diào)有明顯差異(p0.01)。微管相關(guān)蛋白MAP-2:空白組中MAP-2在坐骨神經(jīng)內(nèi)少量表達(dá);與空白對(duì)照組比較,其余各組大鼠坐骨神經(jīng)中MAP-2蛋白表達(dá)水平上調(diào)有明顯差異(p0.01);電針治療后,與橫斷模型組相比,橫斷深刺組蛋白表達(dá)水平上調(diào)有明顯差異(p0.01);與橫斷淺刺組相比,橫斷深刺組蛋白表達(dá)水平上調(diào)有明顯差異(p0.01);與鉗夾模型組相比,鉗夾淺刺組、鉗夾深刺組蛋白表達(dá)水平上調(diào)有明顯差異(p0.01);與鉗夾淺刺組相比,鉗夾深刺組蛋白表達(dá)水平上調(diào)有明顯差異(p0.01)。5.western blot檢測(cè)生長(zhǎng)相關(guān)蛋白GAP-43:空白組中GAP-43在坐骨神經(jīng)內(nèi)少量表達(dá);與空白對(duì)照組比較,其余各組大鼠坐骨神經(jīng)中GAP-43蛋白表達(dá)水平上調(diào)有明顯差異(p0.01);電針治療后,與橫斷模型組相比,橫斷深刺組蛋白表達(dá)水平上調(diào)有明顯差異(p0.01);與橫斷淺刺組相比,橫斷深刺組蛋白表達(dá)水平上調(diào)有明顯差異(p0.05);與鉗夾模型組相比,鉗夾淺刺組、鉗夾深刺組蛋白表達(dá)水平上調(diào)有明顯差異(p0.01);與鉗夾淺刺組相比,鉗夾深刺組蛋白表達(dá)水平上調(diào)有明顯差異(p0.05)。微管相關(guān)蛋白MAP-2:空白組中MAP-2在坐骨神經(jīng)內(nèi)少量表達(dá);與空白對(duì)照組比較,其余各組大鼠坐骨神經(jīng)中MAP-2蛋白表達(dá)水平上調(diào)有明顯差異(p0.01);電針治療后,與橫斷模型組相比,橫斷深刺組蛋白表達(dá)水平上調(diào)有明顯差異(p0.01);與橫斷淺刺組相比,橫斷深刺組蛋白表達(dá)水平上調(diào)有明顯差異(p0.01);與鉗夾模型組相比,鉗夾淺刺組、鉗夾深刺組蛋白表達(dá)水平上調(diào)有明顯差異(p0.01);與鉗夾淺刺組相比,鉗夾深刺組蛋白表達(dá)水平上調(diào)有明顯差異(p0.01)。結(jié)論:1.針刺環(huán)跳穴不同組織部位,可以提高坐骨神經(jīng)損傷大鼠腓腸肌的肌力,防止肌肉萎縮,促進(jìn)坐骨神經(jīng)損傷大鼠運(yùn)動(dòng)功能恢復(fù),深刺組療效優(yōu)于淺刺組。2.針刺環(huán)跳穴不同組織部位,可以減少神經(jīng)元的變性和死亡,促進(jìn)軸突生長(zhǎng),加快損傷神經(jīng)的修復(fù),深刺組療效優(yōu)于淺刺組。3.針刺環(huán)跳穴不同組織部位,可提高受損坐骨神經(jīng)內(nèi)生長(zhǎng)相關(guān)蛋白GAP-43和微管相關(guān)蛋白MAP-2的含量,促進(jìn)軸突與樹突形成,加快受損神經(jīng)的再生與恢復(fù),深刺組療效優(yōu)于淺刺組。4.受損神經(jīng)內(nèi)微環(huán)境的改善,可能是針刺促進(jìn)周圍神經(jīng)損傷再生及功能恢復(fù)的相關(guān)機(jī)制之一。
【學(xué)位授予單位】：遼寧中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R245

【參考文獻(xiàn)】

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1 武煜明;蔡恩麗;楊恩彬;唐柱生;;電針對(duì)坐骨神經(jīng)修復(fù)過程中相應(yīng)脊髓前角細(xì)胞變化的形態(tài)學(xué)觀察[J];云南中醫(yī)中藥雜志;2010年04期

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本文編號(hào)：1170839