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湖南懷化市乙腦病毒傳播循環(huán)研究

發(fā)布時間:2017-03-28 01:11

  本文關(guān)鍵詞:湖南懷化市乙腦病毒傳播循環(huán)研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:日本腦炎病毒(JEV)是在世界上最重要的病毒性腦炎病原體之一。盡管通過疫苗接種和改善個人衛(wèi)生,已經(jīng)大大減少了乙腦病例數(shù)量,但它仍然是一個公共衛(wèi)生問題。研究顯示,2006-2009年期間每年全球約有67900例乙腦病例發(fā)生,其中50%(約33,900例)發(fā)生在中國。我國湖南省自50年代起一直是乙腦的流行區(qū),1951~2000年乙腦年平均發(fā)病率為5.82/10萬,在2013年7月湖南省公布的乙腦報告病例中,懷化市報告乙腦發(fā)病數(shù)列居前位。懷化市位于湖南省西部偏南,屬中亞熱帶季風(fēng)氣候區(qū),四季分明,光熱資源豐富,雨量充沛,為三帶喙庫蚊的繁殖提供了良好的孳生環(huán)境。近年來,極少有研究針對該地區(qū)的乙腦媒介三帶喙庫蚊的密度、季節(jié)消長等生態(tài)學(xué)特征進(jìn)行詳細(xì)調(diào)查且對該地區(qū)乙腦病毒流行株缺乏深入研究。本研究,通過對懷化地區(qū)蚊蟲多樣性特征、三帶喙庫蚊種群季節(jié)消長、攜帶病原體情況的調(diào)查,了解該地區(qū)主要傳播媒介的種群分布特征、目前流行的乙腦病毒株的基因型別及分子特征,為該地區(qū)乙腦的防控和流行趨勢的預(yù)測提供重要的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。通過蚊蟲種群密度現(xiàn)場調(diào)查,掌握了當(dāng)?shù)匚孟x種群密度及季節(jié)消長等資料,運(yùn)用RT-PCR的方法,分段設(shè)計(jì)引物、擴(kuò)增、測序、拼接,得到了蚊和豬體內(nèi)乙型腦炎病毒序列,采用最大簡約法、最大似然法和貝葉斯法,對蚊蟲和豬體內(nèi)分離湖南懷化株病毒基因與目前Genbank中登錄的覆蓋基因Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型、Ⅳ型和Ⅴ型5個基因型別的乙腦病毒序列進(jìn)行系統(tǒng)進(jìn)化分析,獲得如下結(jié)果。湖南懷化蚊種構(gòu)成比較簡單,三帶喙庫蚊和中華按蚊均為當(dāng)?shù)氐膹V布種,特別是在豬圈和人居環(huán)境采集的蚊蟲以三帶喙庫蚊構(gòu)成比最高,占總捕獲蚊蟲數(shù)的94.2%~98.6%。三帶喙庫蚊活動時間較長,季節(jié)分布曲線呈單峰狀態(tài),8月下旬出現(xiàn)高峰期,9月上旬密度開始下降。本研究首次從懷化地區(qū)自然界乙腦傳播循環(huán)的關(guān)鍵環(huán)節(jié)——媒介蚊蟲和豬體內(nèi)分離到乙腦病毒,蚊蟲感染乙腦病毒的最低感染率分別為1:3858 and1:2381,豬的乙腦病毒感染率為16.42%,經(jīng)鑒定,湖南懷化地區(qū)蚊蟲和豬體內(nèi)分離的乙腦病毒均為基因Ⅲ型乙腦病毒。新分離蚊蟲體內(nèi)湖南懷化株病毒株與JEV SA14、SA-14株具有基因序列同源性。湖南懷化豬源性JEV病毒株在進(jìn)化關(guān)系上與臺灣分離株TIPI、日本分離株Ja GAr01和中國福建分離株YLG株親緣關(guān)系最近。盡管懷化蚊蟲體內(nèi)分離乙腦病毒與SAl4-14-2株氨基酸比對結(jié)果顯示,在序列E基因區(qū)段存在11個氨基酸位點(diǎn)差異,位于E304和E335位點(diǎn),能影響病毒抗原抗體結(jié)合的半胱氨酸則未發(fā)生變化,沒有發(fā)生決定抗原性的關(guān)鍵位點(diǎn)改變,因此懷化株乙腦病毒抗原性與疫苗株SA-14-14-2沒有差異,同時,由于乙腦病毒抗原性相關(guān)的關(guān)鍵位點(diǎn)未發(fā)生改變,因此理論上當(dāng)前使用的疫苗株SA-14-14-2能夠保護(hù)我國湖南懷化株乙腦病毒的感染。新分離蚊蟲體內(nèi)湖南懷化株株乙腦病毒與JEV SA14、SA-14株具有基因序列同源性。湖南懷化豬源性JEV病毒株在進(jìn)化關(guān)系上與臺灣分離株TIPI、日本分離株Ja GAr01和中國福建分離株YLG株親緣關(guān)系最近。
【關(guān)鍵詞】:三帶喙庫蚊 乙型腦炎 湖南 中國
【學(xué)位授予單位】:中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:R512.32;R181.3
【目錄】:
  • 縮略詞表5-6
  • 中文摘要6-8
  • 英文摘要8-10
  • 前言10-13
  • 材料和方法13-26
  • 1.實(shí)驗(yàn)材料13-15
  • 1.1 蚊蟲13
  • 1.2 豬腦13
  • 1.3 病毒13
  • 1.4 實(shí)驗(yàn)動物13
  • 1.5 誘蚊燈13
  • 1.6 主要試劑13
  • 1.7 常用溶液13-15
  • 1.8 主要儀器15
  • 2. 實(shí)驗(yàn)方法15-26
  • 2.1 蚊蟲種群構(gòu)成調(diào)查[25]15-18
  • 2.2 豬腦樣本采集18
  • 2.3 RT-PCR檢測病毒18-21
  • 2.4 序列比對及系統(tǒng)進(jìn)化分析21-23
  • 2.5 乙腦病毒的分離23-24
  • 2.6 蚊蟲多樣性分析24
  • 2.7 基因分型與進(jìn)化分析24-26
  • 結(jié)果26-63
  • 1.湖南懷化市蚊蟲多樣性分析26-32
  • 1.1 蚊蟲種類構(gòu)成26-27
  • 1.2 蚊蟲多樣性27-32
  • 2. 湖南懷化市蚊蟲和豬感染乙腦病毒的研究分析32-35
  • 2.1 三帶喙庫蚊乙腦病毒自然感染的研究32-33
  • 2.2 三帶喙庫蚊乙腦病毒地理分布的研究33-34
  • 2.3 豬乙腦病毒自然感染的研究34-35
  • 3. 湖南懷化蚊蟲體內(nèi)乙腦病毒序列測定與分子生物學(xué)鑒定35-47
  • 3.1 新分離蚊蟲體內(nèi)湖南懷化株病毒的C/PrM和E基因序列測定和分析35-41
  • 3.2 新分離蚊蟲體內(nèi)湖南懷化株病毒全基因組序列測定和分析41-47
  • 4.豬源性乙型腦炎病毒分離株基因序列測定和分析47-63
  • 4.1 豬源性乙型腦炎病毒分離株基因序列測定47
  • 4.2 基因分型與進(jìn)化分析47-50
  • 4.3 新分離湖南懷化豬源性乙腦病毒株C/PrM核苷酸及氨基酸同源性分析50-53
  • 4.4 新分離湖南懷化豬源性乙腦病毒株E基因的核苷酸及氨基酸差異位點(diǎn)分析53-59
  • 4.5 新分離湖南懷化豬源性乙腦病毒株病毒基因比較分析59-63
  • 討論63-67
  • 1. 湖南懷化市蚊蟲多樣性分析63-64
  • 2. 湖南懷化市蚊蟲和豬感染乙腦病毒情況與型別及流行株分析64
  • 3. 湖南懷化市蚊蟲和豬體內(nèi)分離乙腦病毒E基因特征分析64-67
  • 結(jié)論67-68
  • 參考文獻(xiàn)68-71
  • 致謝71-72
  • 個人簡介72-73
  • 附錄73-85
  • 1. 蚊蟲體內(nèi)湖南懷化株病毒全基因組序列73-80
  • 2. 豬體內(nèi)湖南懷化株病毒全基因組序列80-85

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 郭綬衡,李俊華;湖南省50年來流行性乙型腦炎流行病學(xué)分析[J];疾病控制雜志;2002年01期


  本文關(guān)鍵詞:湖南懷化市乙腦病毒傳播循環(huán)研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號:271426

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