【摘要】： 【目的】 研究復(fù)方鄰苯二甲醛對醫(yī)院感染菌的殺滅效果,并通過檢測MRSA中耐消毒劑基因qacA/B,比較有無該基因時(shí)消毒劑對其殺滅效果的差別以發(fā)現(xiàn)陽性菌株是否對復(fù)方鄰苯二甲醛產(chǎn)生抗性;通過測定漏出蛋白質(zhì)、DNA的含量初步探討復(fù)方鄰苯二甲醛對醫(yī)院感染菌的作用機(jī)理。 【方法】 1實(shí)驗(yàn)方法 以耐甲氧西林的金黃色葡萄球菌(MRSA)、耐甲氧西林凝固酶陰性的葡萄球菌(MRCNS)、甲氧西林敏感的金黃色葡萄球菌(MSSA)、產(chǎn)ESBLs(超廣譜β內(nèi)酰胺酶)的肺炎克雷伯菌、銅綠假單胞菌、大腸埃希菌、鮑曼不動(dòng)桿菌、陰溝腸桿菌、嗜麥芽窄食單胞菌、白色念珠菌、熱帶念珠菌等醫(yī)院感染菌為試驗(yàn)菌株,以復(fù)方鄰苯二甲醛為試驗(yàn)用消毒劑,在20±1℃條件下,進(jìn)行中和劑鑒定試驗(yàn),懸液定量殺菌試驗(yàn);運(yùn)用PCR法對MRSA進(jìn)行耐消毒劑基因qacA/B的檢測并對有無該基因的菌株分別進(jìn)行懸液定量殺菌試驗(yàn);檢測菌藥混合液中漏出蛋白質(zhì)、DNA含量。 2統(tǒng)計(jì)方法 懸液定量殺菌試驗(yàn)中,以點(diǎn)計(jì)數(shù)法計(jì)數(shù)對照組和試驗(yàn)組的存活菌落數(shù),分別進(jìn)行對數(shù)轉(zhuǎn)換后,兩者相減,計(jì)算對數(shù)降低值。采用SPSS 13.0軟件,對復(fù)方鄰苯二甲醛殺菌及其影響因素試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行重復(fù)測量設(shè)計(jì)的方差分析,并用Excel 2003作線圖分析。 【結(jié)果】 1復(fù)方鄰苯二甲醛對微生物殺滅作用的研究 含OPA100 mg/L、50mg/L、25 mg/L的復(fù)方鄰苯二甲醛溶液作用3min對肺炎克雷伯菌平均殺滅對數(shù)值分別為6.77、3.53、1.19;對銅綠假單胞菌的平均殺滅對數(shù)值分別為6.90、4.58、2.74;對熱帶念珠菌的平均殺滅對數(shù)值分別為6.78、2.94、0.38。 含OPA50mg/L、25mg/L、12.5 mg/L的復(fù)方鄰苯二甲醛溶液作用3min對鮑曼不動(dòng)桿菌的平均殺滅對數(shù)值分別為6.80、2.31、1.77;對嗜麥芽窄食單胞菌的平均殺滅對數(shù)值分別為7.16、3.56、1.34;對MRCNS的平均殺滅對數(shù)值分別為6.66、4.03、2.02;對白色念珠菌的平均殺滅對數(shù)值分別為7.12、2.39、0.24;對陰溝腸桿菌的平均殺滅對數(shù)值分別為7.00、2.44、0.31;對MSSA的平均殺滅對數(shù)值分別為7.08、2.50、1.25。 含OPA50mg/L、25mg/L、12.5 mg/L的復(fù)方鄰苯二甲醛溶液作用5min對大腸埃希菌的平均殺滅對數(shù)值分別為6.87、3.70、1.89;對MRSA (qacA/B陽性)的平均殺滅對數(shù)值分別為6.30、4.82、1.93;對MRSA (qacA/B陰性)的平均殺滅對數(shù)值分別為5.77、3.98、2.09。 2 MRSA中耐消毒劑基因qacA/B的檢測及苯扎溴銨、單品鄰苯二甲醛、復(fù)方鄰苯二甲醛分別對陽性、陰性菌株殺滅效果比較 通過PCR從24株MRSA中檢出4株耐消毒劑基因qacA/B陽性;250mg/L、125mg/L、62.5 mg/L的苯扎溴銨作用3min,對MRSA(qacA/B陽性)的平均殺滅對數(shù)降低值分別為5.74、3.64、3.02,對MRSA(qacA/B陰性)的平均殺滅對數(shù)降低值分別為7.38、5.74、4.04,差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);50mg/L、25mg/L、12.5 mg/L的單品鄰苯二甲醛作用5min,對MRSA(qacA/B陽性)的平均殺滅對數(shù)降低值分別為5.15、2.96、0.85,對MRSA(qacA/B陰性)的平均殺滅對數(shù)降低值分別為5.32、3.00、1.03,差別無顯著性(P0.05);50mg/L、25mg/L、12.5 mg/L的復(fù)方鄰苯二甲醛作用5min,對MRSA(qacA/B陽性)的平均殺滅對數(shù)降低值分別為6.30、4.82、1.93,對MRSA(qacA/B陰性)的平均殺滅對數(shù)降低值分別為5.77、3.98、2.09,差別有顯著性(P0.05),但結(jié)合線圖認(rèn)為沒有差別。 3 MRSA、產(chǎn)ESBLs(超廣譜β內(nèi)酰胺酶)的肺炎克雷伯菌、白色念珠菌經(jīng)復(fù)方鄰苯二甲醛作用后蛋白質(zhì)、DNA漏出情況。 各種試驗(yàn)菌經(jīng)含OPA100 mg/L、50mg/L、25 mg/L、12.5 mg/L的復(fù)方鄰苯二甲醛溶液作用1min、3min、5 min、10 min、15 min后均未見有蛋白質(zhì)和DNA漏出。 【結(jié)論】 在20±1℃,復(fù)方鄰苯二甲醛可快速、高效滅活各種常見的醫(yī)院感染菌,包括攜帶耐消毒劑基因qacA/B的MRSA,雖對復(fù)方中的苯扎溴銨存在抗性,對復(fù)方鄰苯二甲醛卻不存在耐藥性;蛋白質(zhì)漏出試驗(yàn)、DNA漏出試驗(yàn)結(jié)果表明復(fù)方鄰苯二甲醛并不是通過破壞菌體結(jié)構(gòu)導(dǎo)致內(nèi)容物漏出來滅活細(xì)菌的。
【圖文】：

M：分子量標(biāo)記；P：陽性對照；N：陰性對照；1、2、6、7：標(biāo)本陽性；3、4、5、8：標(biāo)本陰性圖 1 qacA/B 基因 PCR 電泳圖單品鄰苯二甲醛、復(fù)方鄰苯二甲醛分別對 qacA/B果試驗(yàn)甲氧西林的金黃色葡萄球菌試驗(yàn)中以 MRSA(耐消鑒定試驗(yàn)代表菌，按照中和劑鑒定試驗(yàn)的判定標(biāo)吐溫 80 的 TPS（1％胰蛋白胨氯化鈉溶液）可以有明該中和劑及其濃度是合適的（表 40）。
【學(xué)位授予單位】：福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2007
【分類號】：R187

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)會(huì)議論文 前1條

1 孫東波;王建發(fā);林玉才;張敏;林云成;武瑞;;復(fù)方鄰苯二甲醛對消毒指標(biāo)菌及豬源致病菌消毒效果的研究[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)家畜內(nèi)科學(xué)分會(huì)2009年學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2009年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前4條

1 李曉娜;復(fù)方鄰苯二甲醛殺滅醫(yī)院感染菌效果及其殺菌機(jī)理研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2007年

2 王詠龍;康威達(dá)消毒劑殺滅醫(yī)院感染菌的效果及其殺菌機(jī)理的研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2003年

3 陳菁;復(fù)方鄰苯二甲醛的研制及殺菌效果觀察[D];福建醫(yī)科大學(xué);2005年

4 黃輝萍;復(fù)方鄰苯二甲醛的消毒性能及消毒機(jī)理研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2006年

，

本文編號：2556725