【摘要】： 【目的】 研究復方鄰苯二甲醛對醫(yī)院感染菌的殺滅效果,并通過檢測MRSA中耐消毒劑基因qacA/B,比較有無該基因時消毒劑對其殺滅效果的差別以發(fā)現(xiàn)陽性菌株是否對復方鄰苯二甲醛產(chǎn)生抗性;通過測定漏出蛋白質、DNA的含量初步探討復方鄰苯二甲醛對醫(yī)院感染菌的作用機理。 【方法】 1實驗方法 以耐甲氧西林的金黃色葡萄球菌(MRSA)、耐甲氧西林凝固酶陰性的葡萄球菌(MRCNS)、甲氧西林敏感的金黃色葡萄球菌(MSSA)、產(chǎn)ESBLs(超廣譜β內酰胺酶)的肺炎克雷伯菌、銅綠假單胞菌、大腸埃希菌、鮑曼不動桿菌、陰溝腸桿菌、嗜麥芽窄食單胞菌、白色念珠菌、熱帶念珠菌等醫(yī)院感染菌為試驗菌株,以復方鄰苯二甲醛為試驗用消毒劑,在20±1℃條件下,進行中和劑鑒定試驗,懸液定量殺菌試驗;運用PCR法對MRSA進行耐消毒劑基因qacA/B的檢測并對有無該基因的菌株分別進行懸液定量殺菌試驗;檢測菌藥混合液中漏出蛋白質、DNA含量。 2統(tǒng)計方法 懸液定量殺菌試驗中,以點計數(shù)法計數(shù)對照組和試驗組的存活菌落數(shù),分別進行對數(shù)轉換后,兩者相減,計算對數(shù)降低值。采用SPSS 13.0軟件,對復方鄰苯二甲醛殺菌及其影響因素試驗數(shù)據(jù)進行重復測量設計的方差分析,并用Excel 2003作線圖分析。 【結果】 1復方鄰苯二甲醛對微生物殺滅作用的研究 含OPA100 mg/L、50mg/L、25 mg/L的復方鄰苯二甲醛溶液作用3min對肺炎克雷伯菌平均殺滅對數(shù)值分別為6.77、3.53、1.19;對銅綠假單胞菌的平均殺滅對數(shù)值分別為6.90、4.58、2.74;對熱帶念珠菌的平均殺滅對數(shù)值分別為6.78、2.94、0.38。 含OPA50mg/L、25mg/L、12.5 mg/L的復方鄰苯二甲醛溶液作用3min對鮑曼不動桿菌的平均殺滅對數(shù)值分別為6.80、2.31、1.77;對嗜麥芽窄食單胞菌的平均殺滅對數(shù)值分別為7.16、3.56、1.34;對MRCNS的平均殺滅對數(shù)值分別為6.66、4.03、2.02;對白色念珠菌的平均殺滅對數(shù)值分別為7.12、2.39、0.24;對陰溝腸桿菌的平均殺滅對數(shù)值分別為7.00、2.44、0.31;對MSSA的平均殺滅對數(shù)值分別為7.08、2.50、1.25。 含OPA50mg/L、25mg/L、12.5 mg/L的復方鄰苯二甲醛溶液作用5min對大腸埃希菌的平均殺滅對數(shù)值分別為6.87、3.70、1.89;對MRSA (qacA/B陽性)的平均殺滅對數(shù)值分別為6.30、4.82、1.93;對MRSA (qacA/B陰性)的平均殺滅對數(shù)值分別為5.77、3.98、2.09。 2 MRSA中耐消毒劑基因qacA/B的檢測及苯扎溴銨、單品鄰苯二甲醛、復方鄰苯二甲醛分別對陽性、陰性菌株殺滅效果比較 通過PCR從24株MRSA中檢出4株耐消毒劑基因qacA/B陽性;250mg/L、125mg/L、62.5 mg/L的苯扎溴銨作用3min,對MRSA(qacA/B陽性)的平均殺滅對數(shù)降低值分別為5.74、3.64、3.02,對MRSA(qacA/B陰性)的平均殺滅對數(shù)降低值分別為7.38、5.74、4.04,差別具有統(tǒng)計學意義(P0.05);50mg/L、25mg/L、12.5 mg/L的單品鄰苯二甲醛作用5min,對MRSA(qacA/B陽性)的平均殺滅對數(shù)降低值分別為5.15、2.96、0.85,對MRSA(qacA/B陰性)的平均殺滅對數(shù)降低值分別為5.32、3.00、1.03,差別無顯著性(P0.05);50mg/L、25mg/L、12.5 mg/L的復方鄰苯二甲醛作用5min,對MRSA(qacA/B陽性)的平均殺滅對數(shù)降低值分別為6.30、4.82、1.93,對MRSA(qacA/B陰性)的平均殺滅對數(shù)降低值分別為5.77、3.98、2.09,差別有顯著性(P0.05),但結合線圖認為沒有差別。 3 MRSA、產(chǎn)ESBLs(超廣譜β內酰胺酶)的肺炎克雷伯菌、白色念珠菌經(jīng)復方鄰苯二甲醛作用后蛋白質、DNA漏出情況。 各種試驗菌經(jīng)含OPA100 mg/L、50mg/L、25 mg/L、12.5 mg/L的復方鄰苯二甲醛溶液作用1min、3min、5 min、10 min、15 min后均未見有蛋白質和DNA漏出。 【結論】 在20±1℃,復方鄰苯二甲醛可快速、高效滅活各種常見的醫(yī)院感染菌,包括攜帶耐消毒劑基因qacA/B的MRSA,雖對復方中的苯扎溴銨存在抗性,對復方鄰苯二甲醛卻不存在耐藥性;蛋白質漏出試驗、DNA漏出試驗結果表明復方鄰苯二甲醛并不是通過破壞菌體結構導致內容物漏出來滅活細菌的。
【圖文】：

M：分子量標記；P：陽性對照；N：陰性對照；1、2、6、7：標本陽性；3、4、5、8：標本陰性圖 1 qacA/B 基因 PCR 電泳圖單品鄰苯二甲醛、復方鄰苯二甲醛分別對 qacA/B果試驗甲氧西林的金黃色葡萄球菌試驗中以 MRSA(耐消鑒定試驗代表菌，按照中和劑鑒定試驗的判定標吐溫 80 的 TPS（1％胰蛋白胨氯化鈉溶液）可以有明該中和劑及其濃度是合適的（表 40）。
【學位授予單位】：福建醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2007
【分類號】：R187

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本文編號：2556725