【摘要】：腸出血性大腸桿菌(EHEC)是世界上食源性疾病的重要誘因。人類感染EHEC具有潛在的重大威脅并可能引起一系列的并發(fā)癥，包括腹瀉、出血性腸炎(HC)、溶血性尿毒綜合征(HUS)等。EHEC的血清型很多，O157∶H7是與人類疾病相關(guān)的最常見的血清型。該菌已經(jīng)在世界上引起多次爆發(fā)。我國江蘇、安徽兩省曾于1999和2000年發(fā)生大腸桿菌O157∶H7感染性腹瀉爆發(fā)流行，并且范圍擴大東北、華北及華東地區(qū)。由該菌引起的疾病已成為21世紀嚴重威脅人類生命和健康的傳染病，因此對該菌進行流行病學(xué)調(diào)查，查明該菌的傳染源、傳播途徑和傳播范圍，為該病的預(yù)防和治療提供科學(xué)依據(jù)具有重要的意義。 1．大腸桿菌O157的分離鑒定與表型特征分析 目的 了解重慶市及三峽庫區(qū)大腸桿菌O157的家畜帶菌情況及其生化特性和對抗菌藥物的敏感性。方法 采集重慶市六個區(qū)縣家畜糞便和污水樣品1504份，接種mEC+n增菌肉湯，37℃振搖孵育6h，取增菌液接種CT-SMAC平板，37℃培養(yǎng)18h，挑取可疑菌落，，經(jīng)血清學(xué)檢驗、PCR擴增和微量生化實驗確認，最后用藥敏試紙測試其對常用抗生素的敏感性。結(jié)果 在1504份樣品中共檢出11株O157，其中O157∶H7 7株，O157∶H? 4株；對分離菌株做藥物敏感性試驗，發(fā)現(xiàn)它們對青霉素、氨芐西林、桿菌肽、頭孢呋肟、紅霉素、慶大霉素、四環(huán)素等存在不同程度的耐藥。結(jié)論 本次調(diào)查是首次對重慶市及三峽庫區(qū)大腸桿菌O157的家畜帶菌情況進行較全面的調(diào)查，查明了該菌的傳染源，對菌株的表型特征進行了研究。 2．大腸桿菌O157毒力與黏附相關(guān)基因的檢測 目的 了解分離菌株攜帶毒力及黏附相關(guān)基因的情況。方法 用聚合酶鏈式反應(yīng)擴增stx1、stx2、eaeA、ehxA、EspA和Tccp基因。結(jié)果 所有O157∶H7菌株擴增出eaeA、ehxa、EspA和Tccp基因，但沒有擴增出stx1和stx2基因；4株O157∶H?菌株，均沒有擴增出stx2、eaeA、ehxA、EspA和Tccp基因，且只有BYY119擴增出stx1基因。結(jié)論 由于所有菌株缺失stx2基因，重慶市及三峽庫區(qū)大腸桿菌O157致病力相對較低。 3．腸出血性大腸桿菌O157∶H7的聚合酶鏈反應(yīng)-限制性片段長度多態(tài)性(PCR-RFLP)分析 目的 從基因水平了解分離菌株的多態(tài)性。方法 選用限制性內(nèi)切酶Hinc Ⅱ和EcoR Ⅱ?qū)Ψ蛛x的O157∶H7菌株eaeA基因進行酶切，選用限制性內(nèi)切酶HaeⅢ、Hinf Ⅰ、EcoR Ⅱ和Rsa Ⅰ對分離的O157∶H7菌株ehxA基因進行酶切，最后對這兩個基因進行PCR-RFLP分析。結(jié)果 所有分離菌株的eaeA基因和ehxA基因選用限制性內(nèi)切酶酶切之后所得酶切片段數(shù)目和大小與標準菌株的eaeA基因和ehxA基因選用限制性內(nèi)切酶酶切之后所得酶切片段數(shù)目和大小相同。結(jié)論 重慶市及三峽庫區(qū)大腸桿菌O157∶H7在基因水平較為保守，多態(tài)性較為單一。 4．產(chǎn)志賀毒素大腸桿菌(STEC)stx2a和stx2b血清抗體的檢測 目的 了解重慶市及三峽庫區(qū)STEC攜帶stx2基因的情況。方法 在兩個屠宰場采集商品
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【學(xué)位授予單位】：西南大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2006
【分類號】：R181.3

【引證文獻】

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前1條

1 趙明禮;牛源性致病性大腸桿菌的分離鑒定及E.coli O157:H7生物學(xué)特性研究[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2013年

本文編號：2410739