發(fā)布時間：2018-11-07 08:29

【摘要】：【目的】克隆胞內(nèi)分枝桿菌肝素結(jié)合血凝素(HBHA)基因,并對其進(jìn)行生物信息學(xué)分析和原核表達(dá)。【方法】應(yīng)用巢式PCR克隆胞內(nèi)分枝桿菌HBHA基因,利用在線分析軟件對其基因序列及編碼蛋白序列進(jìn)行生物信息學(xué)分析。構(gòu)建原核表達(dá)載體pET32a-HBHA,并進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)�！窘Y(jié)果】胞內(nèi)分枝桿菌HBHA基因完整的ORF全長618bp,編碼205個氨基酸,該基因氨基酸序列與M.avium ATCC 25291有較高的相似性。HBHA蛋白為堿性、親水性蛋白質(zhì),含12個潛在的磷酸化位點,存在抗原表位,亞細(xì)胞定位主要存在于細(xì)胞核,蛋白空間結(jié)構(gòu)以α-螺旋和無規(guī)則卷曲為主。構(gòu)建了pET32a-HBHA原核表達(dá)載體,其可在原核表達(dá)系統(tǒng)中誘導(dǎo)表達(dá)大小約為38ku的HBHA重組蛋白�！窘Y(jié)論】胞內(nèi)分枝桿菌HBHA是一種抗原指數(shù)較高的堿性、親水性蛋白,可在原核表達(dá)系統(tǒng)中被表達(dá)。
[Abstract]:[objective] to clone and analyze the (HBHA) gene of Mycobacterium Intra-cell heparin binding hemagglutinin (HBHA) by bioinformatics analysis and prokaryotic expression. [methods] the HBHA gene of Mycobacterium endocytogenes was cloned by nested PCR. Bioinformatics was used to analyze the gene sequence and the coding protein sequence with online analysis software. The prokaryotic expression vector pET32a-HBHA, was constructed and induced to express. [results] the complete ORF of Mycobacterium HBHA gene was 618 BP, encoding 205 amino acids. The amino acid sequence of this gene is similar to that of M.avium ATCC 25291. The HBHA protein is alkaline and hydrophilic. It contains 12 potential phosphorylation sites and has antigenic epitopes. The spatial structure of protein was mainly 偽-helix and irregular curl. The prokaryotic expression vector of pET32a-HBHA was constructed, which could induce the expression of HBHA recombinant protein about the size of 38ku in the prokaryotic expression system. [conclusion] HBHA is a basic and hydrophilic protein with high antigen index. It can be expressed in prokaryotic expression system.
【作者單位】： 吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院;長春理工大學(xué)生命科學(xué)技術(shù)學(xué)院;
【基金】：國家科技支撐計劃項目(2007BAD55805) 國家自然科學(xué)基金項目(31272566) 吉林省科技發(fā)展計劃項目(20120235)
【分類號】：R186

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2315784