熒光PCR方法檢測(cè)金黃色葡萄球菌nuc基因及其在消毒監(jiān)測(cè)中的初步應(yīng)用
本文選題:金黃色葡萄球菌 + 實(shí)時(shí)熒光PCR。 參考:《中國消毒學(xué)雜志》2014年05期
【摘要】:目的建立金黃色葡萄球菌實(shí)時(shí)熒光PCR反應(yīng)體系,用于消毒監(jiān)測(cè)的快速檢測(cè)。方法利用金黃色葡萄球菌耐熱核酸酶nuc基因高保守序列,建立實(shí)時(shí)熒光PCR體系,評(píng)價(jià)其在消毒監(jiān)測(cè)中的應(yīng)用效果。結(jié)果建立的金黃色葡萄球菌實(shí)時(shí)熒光PCR反應(yīng)體系檢測(cè)時(shí)限短,全程1.5 h即可完成檢測(cè)。該反應(yīng)體系與其他細(xì)菌無交叉反應(yīng),重組陽性質(zhì)粒和純菌培養(yǎng)物檢測(cè)下限分別為10拷貝/反應(yīng)和35 cfu/ml。在1 880份消毒監(jiān)測(cè)中所得陽性結(jié)果與細(xì)菌培養(yǎng)法結(jié)果一致。結(jié)論所建立的金黃色葡萄球菌nuc基因?qū)崟r(shí)熒光PCR反應(yīng)體系能準(zhǔn)確檢出標(biāo)本中金黃色葡萄球菌,該方法快速、特異、靈敏。
[Abstract]:Objective to establish a real-time fluorescent PCR reaction system for rapid detection of Staphylococcus aureus. Methods using the high conserved sequence of nuc gene of Staphylococcus aureus thermostable nuclease, a real-time fluorescent PCR system was established to evaluate its application in disinfection monitoring. Results the detection time of the real-time fluorescent PCR reaction system for Staphylococcus aureus was short and the detection could be completed within 1.5 hours. There was no cross reaction between the reaction system and other bacteria. The detection limits of recombinant positive plasmid and pure culture were 10 copies / reaction and 35 cfur / ml, respectively. The positive results of 1 880 samples were consistent with the results of bacterial culture. Conclusion the real-time fluorescent PCR reaction system of Staphylococcus aureus nuc gene can be used to detect Staphylococcus aureus accurately. The method is rapid, specific and sensitive.
【作者單位】: 廣東省廣寧縣疾病預(yù)防控制中心;廣東省肇慶市疾病預(yù)防控制中心;
【基金】:廣東省肇慶市科技創(chuàng)新計(jì)劃項(xiàng)目(2007E284)
【分類號(hào)】:R187
【參考文獻(xiàn)】
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【共引文獻(xiàn)】
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本文編號(hào):1893747
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