淡色庫蚊核糖體蛋白S4基因克隆及其在溴氰菊酯抗性作用中的初步研究
本文關(guān)鍵詞：淡色庫蚊核糖體蛋白S4基因克隆及其在溴氰菊酯抗性作用中的初步研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
《南京醫(yī)科大學(xué)》 2007年
淡色庫蚊核糖體蛋白S4基因克隆及其在溴氰菊酯抗性作用中的初步研究
王衛(wèi)杰
【摘要】： 【目的】克隆淡色庫蚊核糖體蛋白S4(RPS4)基因的全長(zhǎng)序列，并研究其與蚊抗藥性的相關(guān)性。 【方法】根據(jù)本試驗(yàn)室抑制性差減雜交結(jié)合cDNA芯片篩選獲得的EST片段(GenBank accession no．BE247804)設(shè)計(jì)引物，分別與載體序列配對(duì)，通過PCR的方法，從淡色庫蚊抗性品系中分別擴(kuò)增出目的基因的5′和3′末端，分別T／A克隆于pGT載體，轉(zhuǎn)化、測(cè)序、對(duì)位拼接獲取全長(zhǎng)序列。用Clustal X、Clustal W等生物信息學(xué)軟件對(duì)編碼的氨基酸序列進(jìn)行分析。用實(shí)時(shí)熒光定量PCR驗(yàn)證RPS4基因在淡色庫蚊抗性、敏感品系不同發(fā)育階段中的差異表達(dá)。應(yīng)用基因重組方法構(gòu)建RPS4基因的原核和昆蟲表達(dá)載體；將重組的昆蟲表達(dá)載體轉(zhuǎn)入蚊C6／36細(xì)胞，經(jīng)藥物篩選獲得穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的細(xì)胞系，RT-PCR鑒定目的基因表達(dá)；用~3H-TdR摻入法檢測(cè)穩(wěn)定表達(dá)的單克隆細(xì)胞對(duì)溴氰菊酯的敏感性。 【結(jié)果】獲得淡色庫蚊RPS4基因的全長(zhǎng)cDNA序列，總長(zhǎng)度為1002 bp，，開放閱讀框?yàn)?89 bp，編碼262個(gè)氨基酸(GenBank accessionno．DQ647667)。淡色庫蚊RPS4與埃及伊蚊、岡比亞按蚊、果蠅的RPS4同源性分別為96％、91％、78％。熒光定量PCR結(jié)果顯示，RPS4基因在淡色庫蚊抗性和敏感品系的不同發(fā)育階段均有表達(dá)；在蛹和成蟲發(fā)育階段，與敏感品系相比，RPS4基因在抗性品系中高表達(dá)(P＜0.01)。成功構(gòu)建了RPS4基因的原核和昆蟲表達(dá)載體。~3H-TdR摻入法結(jié)果顯示，在一定濃度的溴氰菊酯處理下，轉(zhuǎn)染RPS4基因的細(xì)胞存活率與對(duì)照組相比，無顯著性差異(P＞0.05)。 【結(jié)論】本研究獲得了淡色庫蚊RPS4基因的全長(zhǎng)cDNA序列。該基因在淡色庫蚊溴氰菊酯抗性品系中(蛹和成蟲期)高表達(dá)，提示該基因與淡色庫蚊溴氰菊酯抗性相關(guān)，但其在細(xì)胞對(duì)抗溴氰菊酯的毒性作用中未發(fā)現(xiàn)有保護(hù)作用。
【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：南京醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2007
【分類號(hào)】：R346;R184
【目錄】：
下載全文 更多同類文獻(xiàn)
CAJ全文下載
(如何獲取全文？ 歡迎：購(gòu)買知網(wǎng)充值卡、在線充值、在線咨詢)
CAJViewer閱讀器支持CAJ、PDF文件格式
【相似文獻(xiàn)】
中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條
1 翁秋青;黃永青;劉桂榮;;重癥監(jiān)護(hù)病房嗜麥芽窄食單胞菌臨床感染及耐藥性分析[J];國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志;2011年13期
2 徐志霞;謝廣昭;徐八一;陳宏輝;黃建云;;汕頭市德國(guó)小蠊抗藥性測(cè)試[J];醫(yī)學(xué)動(dòng)物防制;2011年08期
3 張江霞;;2010年我院抗菌藥物應(yīng)用調(diào)查分析[J];中國(guó)社區(qū)醫(yī)師(醫(yī)學(xué)專業(yè));2011年20期
4 趙德軍;胡昭宇;武靜;劉彬;曹雁;田維濤;;產(chǎn)ESBLs及AmpC酶陰溝腸桿菌的檢測(cè)及耐藥性分析[J];國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志;2011年10期
5 趙方明;楊秋蘭;;微山湖區(qū)韓莊鎮(zhèn)淡色庫蚊抗藥性現(xiàn)狀監(jiān)測(cè)報(bào)告[J];中國(guó)病原生物學(xué)雜志;2011年08期
6 磨國(guó)鑫;管希周;崔俊昌;佘丹陽;陳良安;;65株鮑曼不動(dòng)桿菌的臨床分布和耐藥特征分析[J];軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院學(xué)報(bào);2011年07期
7 陳劍;孫彥春;李新鋼;;逆轉(zhuǎn)腫瘤細(xì)胞對(duì)TRAIL耐藥的研究進(jìn)展[J];國(guó)際神經(jīng)病學(xué)神經(jīng)外科學(xué)雜志;2011年03期
8 余艷芳;惠燕霞;林玉萍;;262株肺炎克雷伯菌感染的臨床分析[J];國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志;2011年08期
9 李文波;溫志震;金風(fēng)玲;王輝;錢興玲;劉麗華;;銅綠假單胞菌的臨床分布及β-內(nèi)酰胺酶耐藥表型研究[J];國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志;2011年09期
10 ;抑制白血病抗藥性[J];中華婦幼臨床醫(yī)學(xué)雜志(電子版);2011年03期
中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條
1 付彩蘭;;農(nóng)田抗藥性雜草綜合治理[A];河南省植物保護(hù)研究進(jìn)展Ⅱ（下）[C];2007年
2 龔林根;張念環(huán);張景飛;屈惠良;;二化螟抗藥性綜合治理技術(shù)研究初報(bào)[A];水稻螟蟲災(zāi)變規(guī)律及治理對(duì)策研討會(huì)論文集[C];2001年
3 王樹禮;;抗藥性及蟲齡增長(zhǎng)對(duì)棉鈴蟲防治的影響[A];全國(guó)安全用藥技術(shù)研討會(huì)論文集[C];2001年
4 吳華新;韓敏暉;沈群超;;棉鈴蟲抗藥性的動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)及綜合治理[A];第十九屆全國(guó)植保信息交流暨農(nóng)藥械交易會(huì)論文集[C];2003年
5 馬德英;Kevin Gorman;Ian Denholm;羅萬春;;新疆B型煙粉虱的抗藥性及其治理策略[A];科技創(chuàng)新與綠色植�！袊�(guó)植物保護(hù)學(xué)會(huì)2006學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2006年
6 魯玉杰;石東;郭云峰;;儲(chǔ)糧書虱抗藥性及害蟲再猖獗的研究現(xiàn)狀與進(jìn)展[A];華中三省（河南、湖北、湖南）昆蟲學(xué)會(huì)2006年學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2006年
7 劉祥英;聶榮;劉環(huán)瑞;李瓊軒;莫濕羽;;湖南省水稻褐飛虱對(duì)氯胺磷抗藥性監(jiān)測(cè)[A];華中昆蟲研究（第6卷）[C];2010年
8 田海生;馬磊;沈波;李秀蘭;朱昌亮;;用SSH結(jié)合cDNA芯片分離、鑒定蚊蟲抗藥性相關(guān)基因[A];昆蟲學(xué)創(chuàng)新與發(fā)展——中國(guó)昆蟲學(xué)會(huì)2002年學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2002年
9 王巖;馮明鳴;劉鵬飛;劉西莉;;黃瓜霜霉病菌對(duì)烯肟菌酯敏感性及其抗藥性突變體生物學(xué)性狀研究[A];中國(guó)植物病理學(xué)會(huì)2005年學(xué)術(shù)年會(huì)暨植物病理學(xué)報(bào)創(chuàng)刊50周年紀(jì)念會(huì)論文集[C];2005年
10 楊儉美;李令媛;董波;周輝;;用比色和聚丙烯酰胺凝膠電泳法監(jiān)測(cè)家蠅抗藥性的初探[A];北京昆蟲學(xué)會(huì)成立四十周年學(xué)術(shù)討論會(huì)論文摘要匯編[C];1990年
中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫 前10條
1 存云;[N];山東科技報(bào);2005年
2 尤果;[N];江蘇科技報(bào);2001年
3 主持人：羅兵前 顧磊;[N];江蘇農(nóng)業(yè)科技報(bào);2005年
4 農(nóng)文;[N];中華合作時(shí)報(bào);2006年
5 博種;[N];經(jīng)濟(jì)日?qǐng)?bào).農(nóng)村版;2006年
6 實(shí)習(xí)生 初穎宇;[N];科技日?qǐng)?bào);2011年
7 天康;[N];新疆科技報(bào)(漢);2005年
8 ;[N];吉林農(nóng)村報(bào);2006年
9 馬海燕 陳紅霞;[N];中國(guó)綠色時(shí)報(bào);2006年
10 ;[N];蘇州日?qǐng)?bào);2006年
中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條
1 公茂慶;蚊抗藥性相關(guān)基因克隆與功能研究及用RNAi抑制蚊抗藥性的初步研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2005年
2 胡小邦;視蛋白基因的克隆及其與抗藥性/耐藥性關(guān)系的研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2007年
3 潘程遠(yuǎn);雞樅菌與淡色庫蚊及家蠅中漆酶編碼基因的克隆與表達(dá)[D];浙江大學(xué);2009年
4 陳琳;淡色庫蚊擊倒抗性（kdr）相關(guān)鈉離子通道基因多態(tài)性研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2010年
5 周丹;淡色庫蚊酚氧化酶proPOA3基因克隆及其與溴氰菊酯抗性關(guān)系的研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2012年
6 譚文彬;蚊核糖體蛋白L39基因克隆及初步功能的研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2007年
7 田海生;用SSH結(jié)合cDNA芯片分離、鑒定淡色庫蚊溴氰菊酯抗性相關(guān)基因*[D];南京醫(yī)科大學(xué);2001年
8 王波;血紅素加氧酶-1活性變化對(duì)腫瘤細(xì)胞體外抗藥性、體內(nèi)生長(zhǎng)影響的研究[D];中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2010年
9 賀驥;淡色庫蚊核糖體蛋白L22基因(RPL22)克隆及其與溴氰菊酯抗性關(guān)系的研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2009年
10 高鵬;反義核酸逆轉(zhuǎn)乳腺癌細(xì)胞多藥耐藥的研究[D];山東大學(xué);2004年
中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條
1 郝順華;蚊抗藥性相關(guān)新基因—mdr的初步研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2010年
2 顧春波;煙蚜的抗藥性檢測(cè)及機(jī)理研究[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2005年
3 胡燕;煙草黑脛病菌對(duì)烯酰嗎啉的抗性風(fēng)險(xiǎn)研究[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2007年
4 帥霞;桃蚜Myzus persicae（Sulzer）對(duì)兩種殺蟲劑的抗藥性選育及其機(jī)理研究[D];西南農(nóng)業(yè)大學(xué);2005年
5 羅伏林;山羊線蟲的丙硫咪唑抗藥性快速檢測(cè)方法研究與四川省山羊線蟲的抗藥性調(diào)查[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2005年
6 張莉;江蘇地區(qū)棉花煙粉虱種群研究[D];揚(yáng)州大學(xué);2008年
7 郭小芳;6株生防放線菌的生物學(xué)習(xí)性及防病抑菌作用研究[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2005年
8 鐘立軍;吉林省部分地區(qū)雞球蟲病流行病學(xué)調(diào)查及抗藥性研究[D];吉林大學(xué);2005年
9 陳利納;不同品系煙粉虱對(duì)辛硫磷和阿克泰抗性機(jī)理研究[D];河北農(nóng)業(yè)大學(xué);2006年
10 許傳勇;膀胱組織中MDR1和MRP基因表達(dá)研究[D];青島大學(xué);2005年
本文關(guān)鍵詞：淡色庫蚊核糖體蛋白S4基因克隆及其在溴氰菊酯抗性作用中的初步研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
本文編號(hào)：171707
本文鏈接：http://sikaile.net/yixuelunwen/liuxingb/171707.html
