本文關(guān)鍵詞：ID1在涎腺腺樣囊性癌發(fā)生發(fā)展中的作用及功能

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【摘要】：腺樣囊性癌(adenoid cystic carcinoma,ACC)是口腔頜面部常見(jiàn)的唾液腺惡性腫瘤之一,它浸潤(rùn)性極強(qiáng),術(shù)后易復(fù)發(fā),是頭頸部最具破壞性和不可預(yù)見(jiàn)性的腫瘤[1]。因而尋找有效的治療靶標(biāo)對(duì)于改善涎腺腺樣囊性癌的治療及預(yù)后至關(guān)重要。DNA結(jié)合抑制因子1(inhibitor of DNA binding 1,ID1),該基因可編碼螺旋-環(huán)-螺旋蛋白(HLH),HLH蛋白可抑制DNA結(jié)合及轉(zhuǎn)錄激活能力,在細(xì)胞生長(zhǎng)、衰老和分化等生物學(xué)過(guò)程中發(fā)揮重要作用。研究表明,在多種腫瘤中都有發(fā)現(xiàn)ID1基因的異常表達(dá),ID1發(fā)揮著類似于癌基因的作用,參與了腫瘤的生長(zhǎng)、分化、侵襲及轉(zhuǎn)移。本課題通過(guò)基因測(cè)序和生物學(xué)信息分析發(fā)現(xiàn)涎腺腺樣囊性癌的差異表達(dá)基因ID1,進(jìn)而研究ID1在涎腺腺樣囊性癌發(fā)生發(fā)展中的作用及功能。研究分為兩個(gè)部分,分述如下:一、涎腺腺樣囊性癌差異表達(dá)基因篩選及其臨床意義目的:篩選涎腺腺樣囊性癌中差異表達(dá)基因并分析其臨床意義。方法:對(duì)涎腺腺樣囊性癌高、低轉(zhuǎn)移細(xì)胞(SACC-M、SACC-2)提取細(xì)胞總RNA,送至蘇州眾信生物有限公司采用第二代基因測(cè)序技術(shù)進(jìn)行RNA測(cè)序,對(duì)測(cè)序結(jié)果進(jìn)行生物學(xué)信息分析,篩選SACC細(xì)胞的差異表達(dá)基因。采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)ID1在SACC細(xì)胞中的表達(dá)量,驗(yàn)證測(cè)序結(jié)果。通過(guò)收集68例涎腺腺樣囊性癌組織和50例對(duì)應(yīng)的癌旁正常組織標(biāo)本,采用免疫組化染色實(shí)驗(yàn)研究ID1在涎腺腺樣囊性癌臨床樣本中的表達(dá)情況。結(jié)果:基因測(cè)序結(jié)果顯示ID1在SACC-M細(xì)胞中的表達(dá)明顯高于SACC-2。GO富集分析顯示SACC-M相對(duì)SACC-2表達(dá)上調(diào)的基因大部分都是和細(xì)胞移動(dòng)黏附能力相關(guān)的基因,包括基因ID1。實(shí)時(shí)熒光定量PCR結(jié)果顯示ID1在SACC-M中的表達(dá)明顯高于SACC-2。免疫組化染色實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示ID1在涎腺腺樣囊性癌組織樣本中的表達(dá)明顯高于癌旁正常組織的樣本。結(jié)論:ID1在涎腺腺樣囊性癌中特異性高表達(dá),且與涎腺腺樣囊性癌的高轉(zhuǎn)移有關(guān)。二、ID1對(duì)涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞生物學(xué)行為的影響目的:研究ID1對(duì)涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞增殖、侵襲及遷移能力的影響。方法:Real-time PCR檢測(cè)si RNA轉(zhuǎn)染SACC-M細(xì)胞后ID1的表達(dá)情況。采用CCK-8法、平板克隆形成實(shí)驗(yàn)研究ID1表達(dá)被抑制后SACC-M細(xì)胞增殖能力的變化。分別使用Transwell細(xì)胞遷移及侵襲實(shí)驗(yàn)研究ID1表達(dá)下調(diào)后SACC-M細(xì)胞遷移及侵襲能力的變化。結(jié)果:Real-time PCR結(jié)果顯示si RNA干擾后ID1在SACC-M中的表達(dá)量下降。CCK-8實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明si RNA干擾組SACC-M細(xì)胞增殖能力明顯弱于陰性對(duì)照組。平板克隆形成實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示si RNA干擾ID1的表達(dá)后,SACC-M細(xì)胞增殖能力隨之下降。Transwell細(xì)胞遷移及侵襲實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明,ID1表達(dá)下調(diào)后,SACC-M細(xì)胞的遷移、侵襲能力也隨之下降。結(jié)論:ID1對(duì)涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞(SACC-M)的增殖、侵襲及遷移起促進(jìn)作用。
【關(guān)鍵詞】：涎腺腺樣囊性癌 ID1 實(shí)時(shí)熒光定量PCR si RNA
【學(xué)位授予單位】：福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R739.8
【目錄】：

• 附錄4-5
• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-9
• 前言9-11
• 第一部分 涎腺腺樣囊性癌差異表達(dá)基因篩選及其臨床意義11-30
• 材料與方法11-17
• 結(jié)果17-24
• 討論24-30
• 第二部分 ID1對(duì)涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞生物學(xué)行為的影響30-41
• 材料與方法30-33
• 結(jié)果33-37
• 討論37-41
• 結(jié)論41-42
• 參考文獻(xiàn)42-46
• 綜述46-58
• 參考文獻(xiàn)55-58
• 致謝58

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 孫麗麗;李學(xué)農(nóng);劉國(guó)炳;;Id1/Id3在子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá)及對(duì)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞生物學(xué)的作用[J];南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2013年06期

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本文編號(hào)：945199