發(fā)布時(shí)間：2025-03-14 23:10

　　 目的 :初步探討外泌體(exosome)對(duì)老齡小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs衰老的影響。方法:提取年輕小鼠BMSCs來源的外泌體,作用于老齡小鼠BMSCs,并觀察其衰老現(xiàn)象的改變;分別提取年輕小鼠和老齡小鼠BMSCs來源的外泌體,進(jìn)行基因芯片分析,初步篩選并驗(yàn)證表達(dá)差異性較大的微小RNA(microRNAs,miRNAs)在老齡小鼠BMSCs衰老過程中的作用。結(jié)果:年輕小鼠BMSCs來源的外泌體作用于老齡小鼠BMSCs后,其衰老情況得到明顯改善。芯片分析結(jié)果顯示,miR-199a-3p和miR-214-3p表達(dá)的差異性最為明顯,其中老齡小鼠BMSCs轉(zhuǎn)染miR-199a-3p-mimics后,可明顯緩解其衰老狀態(tài)。結(jié)論:年輕小鼠BMSCs來源的外泌體可明顯減緩老齡小鼠BMSCs的衰老情況,外泌體中所含的miR-199a-3p可能在緩解細(xì)胞衰老過程中起到了重要的調(diào)節(jié)作用,但其具體機(jī)制有待進(jìn)一步研究。

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【部分圖文】：

圖4 BMSCs來源外泌體miRNAs熱圖

圖3年輕小鼠BMSCs來源外泌體對(duì)衰老BMSCs的影響3討論

圖1 外泌體鑒定

外泌體鑒定方式主要有電鏡檢測(cè)、粒徑檢測(cè)、表面標(biāo)志蛋白檢測(cè)等（圖1）。透射電鏡掃描下觀察到囊泡為納米級(jí)囊泡，囊泡復(fù)染后呈深色，直徑在20～200nm（圖1A）；經(jīng)粒徑測(cè)量分析所得，囊泡直徑均值為146.4nm，粒徑主峰為130.2nm，直徑在20～200nm的囊泡百分比為9....

圖2 外泌體綠色熒光標(biāo)記表達(dá)情況

將年輕小鼠BMSCs來源外泌體添加至老齡小鼠BMSCs的完全培養(yǎng)基中，培養(yǎng)3h后，顯微鏡下觀察到老齡小鼠的BMSCs內(nèi)開始出現(xiàn)綠色熒光，12h后，熒光強(qiáng)度顯著性增加，幾乎所有細(xì)胞內(nèi)都能觀察到綠色熒光標(biāo)記的外泌體，而在對(duì)照組的BMSCs中沒有出現(xiàn)綠色熒光信號(hào)（圖2）。結(jié)果表明，....

圖3 年輕小鼠BMSCs來源外泌體對(duì)衰老BMSCs的影響

根據(jù)“2.4”的結(jié)果，我們進(jìn)一步改變老齡小鼠BMSCs細(xì)胞內(nèi)2個(gè)miRNAs的表達(dá)量，初步探究miR-199a-3p、miR-214-3p對(duì)老齡小鼠BMSCs衰老的影響。利用miR-199a-3pmimics和miR-214-3pmimics分別轉(zhuǎn)染老齡小鼠來源的BMSCs....

本文編號(hào)：4034762