目的:本研究旨在探討D-甲硫氨酸可能通過影響c-di-GMP的形成而分散牙齦卟啉單胞菌生物膜的作用機制,為牙周炎和種植體周圍炎的治療提供新的策略。方法:D-甲硫氨酸以不同濃度(0、5、10、15、20、25、30、35、40、45m M)溶解于細胞培養(yǎng)基和細菌培養(yǎng)基,通過CCK-8細胞增殖實驗獲得對小鼠成纖維細胞無細胞毒性的D-甲硫氨酸濃度范圍。通過生長曲線、最小抑菌濃度實驗(Minimum inhibitory concentration,MIC)、最小殺菌濃度實驗(Minimum bactericidal concentration,MBC)評估D-甲硫氨酸對牙齦卟啉單胞菌細菌活性的影響;通過結(jié)晶紫染色實驗、胞外多糖實驗和掃描電鏡(Scanning Electron Microscope,SEM)評估D-甲硫氨酸對牙齦卟啉單胞菌生物膜形成的抑制作用和成熟生物膜的裂解作用。通過高效液相色譜儀檢測D-甲硫氨酸作用后,牙齦卟啉單胞菌生物膜內(nèi)c-di-GMP的含量,探討D-甲硫氨酸對牙齦卟啉單胞菌生物膜的作用機制。結(jié)果:1.D-甲硫氨酸≤40m M時,對L929細胞增殖無影響。2.D-甲硫...

【文章頁數(shù)】：45 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
前言
中文摘要
ABSTRACT
文中常用縮寫中英文對照
第1章 引言
    1.1 牙周炎與種植體周圍炎的致病因素
    1.2 牙齦卟啉單胞菌的致病性
    1.3 D-氨基酸對細菌和細菌生物膜的影響
    1.4 本課題的研究目的
第2章 材料與方法
    2.1 材料
        2.1.1 細胞和菌種來源
        2.1.2 主要試劑
        2.1.3 主要儀器設備
    2.2 實驗方法
        2.2.1 D-甲硫氨酸細胞培養(yǎng)基和細菌培養(yǎng)基的配制
        2.2.2 D-甲硫氨酸對小鼠成纖維細胞增殖的影響
        2.2.3 D-甲硫氨酸對牙齦卟啉單胞菌細菌活性的影響
        2.2.4 結(jié)晶紫染色評估不同濃度D-甲硫氨酸對牙齦卟啉單胞菌生物膜生物量的影響
        2.2.5 胞外多糖實驗評估不同濃度D-甲硫氨酸對牙齦卟啉單胞菌生物膜胞外多糖的影響
        2.2.6 掃描電子顯微鏡觀察牙齦卟啉單胞菌形態(tài)及生物膜結(jié)構(gòu)
        2.2.7 D-甲硫氨酸對成熟的牙齦卟啉單胞菌生物膜的作用
        2.2.8 D-甲硫氨酸對牙齦卟啉單胞菌生物膜內(nèi)c-di-GMP的影響
        2.2.9 數(shù)據(jù)分析
第3章 實驗結(jié)果
    3.1 D-甲硫氨酸對L929細胞增殖的影響
    3.2 不同濃度D-甲硫氨酸對牙齦卟啉單胞菌生物膜形成的抑制作用
        3.2.1 不同濃度D-甲硫氨酸對牙齦卟啉單胞菌細菌活性的影響
        3.2.2 結(jié)晶紫染色法評估D-甲硫氨酸對牙齦卟啉單胞菌生物膜生物量的影響
        3.2.3 胞外多糖實驗評估不同濃度D-甲硫氨酸對牙齦卟啉單胞菌生物膜胞外多糖的影響
        3.2.4 掃描電子顯微鏡觀察D-甲硫氨酸作用下牙齦卟啉單胞菌形態(tài)及生物膜的結(jié)構(gòu)
    3.3 D-甲硫氨酸對成熟牙齦卟啉單胞菌生物膜的裂解作用
        3.3.1 結(jié)晶紫染色法評估D-甲硫氨酸對成熟牙齦卟啉單胞菌生物膜生物量的影響
        3.3.2 胞外多糖實驗評估 D-甲硫氨酸對成熟牙齦卟啉單胞菌生物膜
        3.3.3 掃描電子顯微鏡觀察D-甲硫氨酸作用下牙齦卟啉單胞菌生物膜的結(jié)構(gòu)及形態(tài)變化
    3.4 D-甲硫氨酸對牙齦卟啉單胞菌生物膜內(nèi)c-di-GMP的影響
第4章 討論
第5章 結(jié)論
參考文獻
作者簡介及在學期間所取得的科研成果
致謝



本文編號：3981117