第一章：5-氮唑-2’-脫氧胞苷(5-Aza-dc)對ACC-2、ACC-3和ACC-M細胞株RUNX3表達的影響 腺樣囊性癌(adenoid cystic carcinoma，ACC)是涎腺中最為常見的惡性腫瘤之一，約占所有涎腺上皮性腫瘤的10％，其臨床特點是生長緩慢，但侵襲性較強，易侵犯神經(jīng)及血管，遠處轉移率高達40％。然而目前對該腫瘤的高侵襲性和遠處轉移的具體機制仍缺乏了解。人類Runt相關轉錄因子-3(human runt-related transcriptionfactor-3，RUNX3)是在胃癌中新發(fā)現(xiàn)的抑癌基因，由該基因甲基化引起的表達減少或缺失與胃癌的高侵襲性和遠處轉移密切相關，而在一些腫瘤細胞株中這種甲基化狀態(tài)可以被DNA甲基化的逆轉錄酶5-氮唑-2’-脫氧胞苷(5-Aza-dc)在體外環(huán)境中逆轉�；赗UNX3基因與腫瘤轉移的相關性，因而對RUNX3基因及蛋白在涎腺腺樣囊性癌細胞株中的表達情況作一探討。 實驗一分別用RT-PCR、免疫熒光化學和Western blot檢測ACC-2、ACC-3和ACC-M細胞在5-Aza-dc處理前后的RUNX3的表達 無菌條件...

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【學位級別】：博士

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縮略詞中英文對照
主要實驗設備和儀器
目錄
引言
第一章 5-氮唑-2’-脫氧胞苷對ACC-2、ACC-3和ACC-M細胞株RUNX3表達的影響
    1.1 研究背景
    1.2 實驗材料和方法
        1.2.1 實驗材料
        1.2.2 細胞復蘇和培養(yǎng)
        1.2.3 RT-PCR檢測5-Aza-dc處理前后腺樣囊性癌細胞株中RUNX3 mRNA的表達
        1.2.4 激光共聚焦檢測5-Aza-dc處理前后腺樣囊性癌細胞株中RUNX3蛋白的定位表達
        1.2.5 Western blot檢測5-Aza-dc處理前后腺樣囊性癌細胞株中RUNX3蛋白的表達
    1.3 實驗結果
        1.3.1 RT-PCR結果
        1.3.2 激光共聚焦結果
        1.3.3 Western blot結果
    1.4 討論
    參考文獻
第二章 涎腺腺樣囊性癌中RUNX3基因啟動子CpG島甲基化的演進規(guī)律和關鍵位點
    2.1 研究背景
    2.2 實驗材料和方法
        2.2.1 標本獲取及處理
        2.2.2 實時定量甲基化特異性PCR(qMSP)法檢測RUNX3基因CpG島10個位點甲基化狀態(tài)
        2.2.3 Logistic ANOVA模型的建立
        2.2.4 Western blot檢測腺樣囊性癌和匹配正常涎腺組織RUNX3蛋白的表達
    2.3 實驗結果
        2.3.1 Real-time qMSP結果及與臨床病理因素的相關性
        2.3.2 Logistic ANOVA模型分析甲基化結果
        2.3.3 Western blot結果
        2.3.4 RUNX3基因甲基化、蛋白表達與臨床病理因素之間的相關性
    2.4 討論
    參考文獻
第三章 RUNX3在涎腺腺樣囊性癌和正常涎腺中的表達及與患者預后的相關性
    3.1 研究背景
    3.2 實驗材料和方法
        3.2.1 熒光定量RT-PCR檢測正常涎腺和腺樣囊性癌組織中RUNX3 mRNA的表達
        3.2.2 RUNX3蛋白表達的免疫組織化學檢測
        3.2.3 Western blot檢測RUNX3蛋白的表達
    3.3 實驗結果
        3.3.1 RUNX3 mRNA表達的熒光定量PCR結果
        3.3.2 RUNX3蛋白表達的免疫染色結果
        3.3.3 RUNX3蛋白表達的Western blot結果
        3.3.4 RUNX3蛋白表達的與臨床病理特征的關系
        3.3.5 RUNX3蛋白表達的與患者預后的相關性
    3.4 討論
    參考文獻
全文總結
綜述(一) RUNX3基因在腫瘤發(fā)生發(fā)展中的作用機制研究進展
    參考文獻
綜述(二) RUNX3蛋白胞漿異位表達在腫瘤形成中的作用機制研究進展
    參考文獻
博士期間發(fā)表和待發(fā)表的論文
個人簡介



本文編號：3943900