發(fā)布時(shí)間：2024-03-31 12:02

　　第一章：5-氮唑-2’-脫氧胞苷(5-Aza-dc)對(duì)ACC-2、ACC-3和ACC-M細(xì)胞株RUNX3表達(dá)的影響 腺樣囊性癌(adenoid cystic carcinoma，ACC)是涎腺中最為常見的惡性腫瘤之一，約占所有涎腺上皮性腫瘤的10％，其臨床特點(diǎn)是生長(zhǎng)緩慢，但侵襲性較強(qiáng)，易侵犯神經(jīng)及血管，遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移率高達(dá)40％。然而目前對(duì)該腫瘤的高侵襲性和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的具體機(jī)制仍缺乏了解。人類Runt相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子-3(human runt-related transcriptionfactor-3，RUNX3)是在胃癌中新發(fā)現(xiàn)的抑癌基因，由該基因甲基化引起的表達(dá)減少或缺失與胃癌的高侵襲性和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，而在一些腫瘤細(xì)胞株中這種甲基化狀態(tài)可以被DNA甲基化的逆轉(zhuǎn)錄酶5-氮唑-2’-脫氧胞苷(5-Aza-dc)在體外環(huán)境中逆轉(zhuǎn)。基于RUNX3基因與腫瘤轉(zhuǎn)移的相關(guān)性，因而對(duì)RUNX3基因及蛋白在涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞株中的表達(dá)情況作一探討。 實(shí)驗(yàn)一分別用RT-PCR、免疫熒光化學(xué)和Western blot檢測(cè)ACC-2、ACC-3和ACC-M細(xì)胞在5-Aza-dc處理前后的RUNX3的表達(dá) 無(wú)菌條件...

【文章頁(yè)數(shù)】：98 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
致謝
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主要實(shí)驗(yàn)設(shè)備和儀器
目錄
引言
第一章 5-氮唑-2’-脫氧胞苷對(duì)ACC-2、ACC-3和ACC-M細(xì)胞株RUNX3表達(dá)的影響
    1.1 研究背景
    1.2 實(shí)驗(yàn)材料和方法
        1.2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.2.2 細(xì)胞復(fù)蘇和培養(yǎng)
        1.2.3 RT-PCR檢測(cè)5-Aza-dc處理前后腺樣囊性癌細(xì)胞株中RUNX3 mRNA的表達(dá)
        1.2.4 激光共聚焦檢測(cè)5-Aza-dc處理前后腺樣囊性癌細(xì)胞株中RUNX3蛋白的定位表達(dá)
        1.2.5 Western blot檢測(cè)5-Aza-dc處理前后腺樣囊性癌細(xì)胞株中RUNX3蛋白的表達(dá)
    1.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        1.3.1 RT-PCR結(jié)果
        1.3.2 激光共聚焦結(jié)果
        1.3.3 Western blot結(jié)果
    1.4 討論
    參考文獻(xiàn)
第二章 涎腺腺樣囊性癌中RUNX3基因啟動(dòng)子CpG島甲基化的演進(jìn)規(guī)律和關(guān)鍵位點(diǎn)
    2.1 研究背景
    2.2 實(shí)驗(yàn)材料和方法
        2.2.1 標(biāo)本獲取及處理
        2.2.2 實(shí)時(shí)定量甲基化特異性PCR(qMSP)法檢測(cè)RUNX3基因CpG島10個(gè)位點(diǎn)甲基化狀態(tài)
        2.2.3 Logistic ANOVA模型的建立
        2.2.4 Western blot檢測(cè)腺樣囊性癌和匹配正常涎腺組織RUNX3蛋白的表達(dá)
    2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.3.1 Real-time qMSP結(jié)果及與臨床病理因素的相關(guān)性
        2.3.2 Logistic ANOVA模型分析甲基化結(jié)果
        2.3.3 Western blot結(jié)果
        2.3.4 RUNX3基因甲基化、蛋白表達(dá)與臨床病理因素之間的相關(guān)性
    2.4 討論
    參考文獻(xiàn)
第三章 RUNX3在涎腺腺樣囊性癌和正常涎腺中的表達(dá)及與患者預(yù)后的相關(guān)性
    3.1 研究背景
    3.2 實(shí)驗(yàn)材料和方法
        3.2.1 熒光定量RT-PCR檢測(cè)正常涎腺和腺樣囊性癌組織中RUNX3 mRNA的表達(dá)
        3.2.2 RUNX3蛋白表達(dá)的免疫組織化學(xué)檢測(cè)
        3.2.3 Western blot檢測(cè)RUNX3蛋白的表達(dá)
    3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.3.1 RUNX3 mRNA表達(dá)的熒光定量PCR結(jié)果
        3.3.2 RUNX3蛋白表達(dá)的免疫染色結(jié)果
        3.3.3 RUNX3蛋白表達(dá)的Western blot結(jié)果
        3.3.4 RUNX3蛋白表達(dá)的與臨床病理特征的關(guān)系
        3.3.5 RUNX3蛋白表達(dá)的與患者預(yù)后的相關(guān)性
    3.4 討論
    參考文獻(xiàn)
全文總結(jié)
綜述(一) RUNX3基因在腫瘤發(fā)生發(fā)展中的作用機(jī)制研究進(jìn)展
    參考文獻(xiàn)
綜述(二) RUNX3蛋白胞漿異位表達(dá)在腫瘤形成中的作用機(jī)制研究進(jìn)展
    參考文獻(xiàn)
博士期間發(fā)表和待發(fā)表的論文
個(gè)人簡(jiǎn)介



本文編號(hào)：3943900