目的:探究表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯（EGCG）對(duì)牙源性角化囊腫（OKC）上皮細(xì)胞增殖、凋亡的影響及其可能的分子機(jī)制。方法:采用冷酶消化法,從牙源性角化囊腫囊壁組織分離得到上皮細(xì)胞,在角化細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基中進(jìn)行原代細(xì)胞培養(yǎng)。免疫熒光染色法鑒定原代上皮細(xì)胞表面標(biāo)志物廣譜角蛋白（CK）、角蛋白10（CK10）、角蛋白14（CK14）以及間充質(zhì)細(xì)胞表面標(biāo)志物波形蛋白（Vimentin）。分別用0、20、40、80、160、320μmol/L EGCG溶液處理細(xì)胞24、48、72 h,CCK-8法檢測(cè)各組細(xì)胞的增殖率。實(shí)驗(yàn)分組設(shè)計(jì)為對(duì)照組（0μmol/L）,EGCG低、中、高濃度組（20、160、320μmol/L）,分別處理細(xì)胞48 h,流式細(xì)胞術(shù)PI單染色法檢測(cè)各組細(xì)胞周期分布情況;FITC-Annexin V/PI雙染色法檢測(cè)細(xì)胞凋亡情況。實(shí)時(shí)熒光定量PCR、Western免疫印跡法檢測(cè)各組細(xì)胞Wnt/JNK信號(hào)通路關(guān)鍵蛋白FZD3和JNK3的表達(dá)。以正常人口腔角質(zhì)細(xì)胞（HOKs）作為對(duì)照。采用SPSS 22.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果:牙源性角化囊腫上皮細(xì)胞可在體外成功培養(yǎng)并傳代至... 

【文章來(lái)源】：青島大學(xué)山東省

【文章頁(yè)數(shù)】：97 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
引言
第一章 材料與方法
    1.1 組織及細(xì)胞來(lái)源
    1.2 材料及試劑
    1.3 試劑配制及儲(chǔ)存
    1.4 儀器設(shè)備
    1.5 OKC上皮細(xì)胞原代和傳代培養(yǎng)
    1.6 HOK細(xì)胞復(fù)蘇和傳代培養(yǎng)
    1.7 免疫熒光染色鑒定
    1.8 CCK-8 實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞增殖
    1.9 流式細(xì)胞術(shù)PI單染色檢測(cè)細(xì)胞周期分布
    1.10 FITC-Annexin V/PI雙染色檢測(cè)細(xì)胞凋亡
    1.11 實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)mRNA表達(dá)
    1.12 Western免疫印跡檢測(cè)蛋白表達(dá)
    1.13 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
第二章 結(jié)果
    2.1 OKC上皮細(xì)胞形態(tài)學(xué)特點(diǎn)
    2.2 OKC上皮細(xì)胞免疫熒光染色鑒定
    2.3 EGCG對(duì)細(xì)胞增殖的影響
    2.4 EGCG對(duì)細(xì)胞周期的影響
    2.5 EGCG對(duì)細(xì)胞凋亡的影響
    2.6 Wnt信號(hào)通路相關(guān)蛋白FZD3和JNK3在OKC上皮細(xì)胞中高表達(dá)
    2.7 EGCG下調(diào)FZD3和JNK3 的表達(dá)
第三章 討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    綜述參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間的研究成果
附錄 (20例臨床病例)
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]EGCG阻斷FZD3和MAPK10基因表達(dá)調(diào)控頜骨牙源性角化囊性瘤轉(zhuǎn)歸[J]. 楊銀輝,王耀鐘,袁榮濤,賈暮云,林錫江.  口腔醫(yī)學(xué). 2017(05)
[2]EGCG開(kāi)窗灌洗治療頜骨牙源性角化囊性瘤的臨床療效[J]. 楊銀輝,袁榮濤,孔麗,王科,賈暮云.  口腔醫(yī)學(xué). 2016(09)
[3]牙源性角化囊性瘤惡變1例[J]. 許來(lái)青,鄭廣寧,羅晶晶,吳紅兵,劉媛媛,郭文豪.  華西口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2015(06)
[4]Wnt信號(hào)通路相關(guān)基因在頜骨牙源性角化囊性瘤中的表達(dá)及意義[J]. 孔麗,王炳超,袁榮濤,賈暮云,王科.  上�？谇会t(yī)學(xué). 2015(01)
[5]開(kāi)窗減壓術(shù)治療頜骨巨大囊性病變的臨床研究[J]. 辛俊彤,袁榮濤,卜令學(xué),賈暮云,李寧毅.  口腔醫(yī)學(xué). 2011(04)
[6]Identification of Known and Novel PTCH Mutations in Both Syndromic and Non-syndromic Keratocystic Odontogenic Tumors[J]. Shuang Pan,Li-li Xu,Li-sha Sun,Tie-jun Li* Department of Oral Pathology,Peking University School and Hospital of Stomatology,Beijing,China.  International Journal of Oral Science. 2009(01)
[7]人口腔黏膜角化上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)及生物學(xué)特性研究[J]. 胡秀蓮,王興,林野,邱立新.  中國(guó)口腔頜面外科雜志. 2004(03)



本文編號(hào)：3633535