目的研究A-PRF和i-PRF對人牙齦成纖維細胞（HGFs）增殖分化作用的機制,比較A-PRF和i-PRF生長因子的釋放量（PDGF-BB、TGF-β1、EGF）以及A-PRF和i-PRF對HGFs增殖、遷移作用的影響。方法1.制備A-PRF及i-PRF均需抽取10ml靜脈全血,以1500r/min離心14分鐘得到A-PRF,以700r/min離心3分鐘得到i-PRF,待A-PRF、i-PRF中的生長因子釋放一周后,收集富含生長因子的培養(yǎng)液并配制A-PRF、i-PRF條件培養(yǎng)基。2.采用組織塊貼壁法培養(yǎng)原代HGFs,選取對數(shù)生長期且生長狀態(tài)良好的細胞進行實驗,在倒置相差顯微鏡下觀察細胞形態(tài)進行細胞形態(tài)學(xué)鑒定,通過鼠抗人波形蛋白染色及鼠抗人角蛋白染色進行細胞來源鑒定。3.通過酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測A-PRF、i-PRF在1、3、7天生長因子的釋放量（EGF、PDGF-BB、TGF-β1）;分別使用A-PRF、i-PRF條件培養(yǎng)基培養(yǎng)HGFs 7天,通過qRT-PCR方法檢測與軟組織愈合相關(guān)基因的表達（COL1a2、FN1、TGF-β、PDGF）;通過細胞增殖實驗及DAPI免疫熒光染色法,探... 

【文章來源】：蘭州大學(xué)甘肅省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：59 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

HGFs抗波形蛋白染色，×100

1 HGFs P0 代，×100 圖 1.2 HGFs P3 代，×100 圖 1.3 HGFs P3 代，F(xiàn)igure 1 HGFs ×1002 HGFs 的鑒定細胞貼壁生長，且為長梭形，從形態(tài)學(xué)上初步認定為 HGFs；鼠抗人波形蛋白（Vimentin）染色陽性，胞漿染為棕黃色，著色分布染為藍色（如圖 2.1 所示），鼠抗人角蛋白（cytokeratin）染色陰性被著色（如圖 2.2 所示），結(jié)合細胞形態(tài)學(xué)鑒定，可判斷細胞來源于中驗所需的 HGFs。

蘭州大學(xué)碩士學(xué)位論文 A-PRF/i-PRF 對人牙齦成纖維細胞增殖分化作用的機制研究4.2 實驗結(jié)果4.2.1 酶聯(lián)免疫吸附試驗酶聯(lián)免疫吸附試驗結(jié)果顯示，A-PRF 和 i-PRF 中均含有大量 EGF、PDGF-BB、TGF-β1，第 1 天到第 7 天的釋放量逐漸減少，第 7 天的釋放量仍然維持在一個較高水平，但 A-PRF 與 i-PRF 在 1、3、7 天生長因子的釋放量存在一定差異(P＜0.05)（如圖 3 所示）。

【參考文獻】：
期刊論文
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