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間歇/持續(xù)應(yīng)用PTH(1-34)對髁突軟骨細胞雙重效應(yīng)的研究

發(fā)布時間:2021-10-31 18:30
  下頜骨不對稱畸形是最常見的顱頜面畸形之一,目前尚無一種最佳的治療方法。髁突軟骨內(nèi)成骨是哺乳動物出生后其下頜骨主要的生長發(fā)育方式,軟骨內(nèi)成骨有兩個重要的過程:軟骨細胞的增殖分化;及成骨細胞、破骨細胞等參與的骨形成。PTH是由甲狀旁腺分泌的,維持機體鈣磷代謝的重要激素之一。目前研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn)PTH對骨形成具有雙重作用,但PTH是否對軟骨細胞的增殖分化也具有雙重調(diào)控作用尚不清楚。本研究通過下述三部分實驗,應(yīng)用免疫組化、細胞增殖檢測、ALP活性檢測、礦化結(jié)節(jié)染色和real-time PCR等方法,比較了間歇/持續(xù)應(yīng)用PTH刺激原代髁突軟骨細胞后其增殖、分化等方面的變化,為將來有可能應(yīng)用PTH調(diào)控髁突軟骨內(nèi)成骨,達到治療下頜骨不對稱畸形的目的,提供實驗及理論依據(jù)。第一部分髁突軟骨細胞的分離、培養(yǎng)和鑒定目的:探討髁突軟骨的分離培養(yǎng)方法,獲得具有良好增殖分化能力的髁突軟骨細胞。方法:取24h內(nèi)雌性新生大鼠,采用改良胰酶和Ⅱ型膠原酶聯(lián)合酶消化法分離髁突軟骨細胞,體外培養(yǎng)所分離的軟骨細胞。于軟骨細胞接種第3天,即爬片細胞剛開始融合時,及細胞培養(yǎng)第10天分別行Ⅱ膠原、Ⅹ膠原免疫組化染色。細胞活力分析儀計數(shù)儀... 

【文章來源】:武漢大學(xué)湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:128 頁

【學(xué)位級別】:博士

【文章目錄】:
中文摘要
英文摘要
引言
文獻綜述一 PTH對骨代謝雙重效應(yīng)的研究進展
文獻綜述二 PTH, PTHrP和PTH/PTHrP受體在軟骨內(nèi)成骨中作用的研究進展
實驗研究
    實驗一 髁突軟骨細胞的分離、培養(yǎng)和鑒定
        材料和方法
        結(jié)果
        討論
        附圖1
    實驗二 不同濃度PTH對髁突軟骨細胞作用的研究
        材料和方法
        結(jié)果
        討論
        附圖2
    實驗三 間歇/持續(xù)應(yīng)用PTH對髁突軟骨細胞增殖分化的影響
        材料和方法
        結(jié)果
        討論
結(jié)論
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本文編號:3468637

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