目的：本實(shí)驗(yàn)通過觀察不同濃度的17β-雌二醇對(duì)體外培養(yǎng)人牙髓細(xì)胞增殖、礦化、細(xì)胞周期以及堿性磷酸酶活性的影響，以探討17β-雌二醇對(duì)人牙髓細(xì)胞生物學(xué)特性的影響及作用機(jī)制，為將17β-雌二醇作為一種新型的誘導(dǎo)劑應(yīng)用于人牙髓組織的修復(fù)再生提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法：選取因正畸或阻生新鮮拔除的健康、完整、無齲、無隱裂年輕恒牙，在無菌條件下取出牙髓組織，采用組織塊酶消化法獲取人牙髓細(xì)胞并進(jìn)行原代培養(yǎng)。當(dāng)細(xì)胞生長至鋪滿孔底80％時(shí)進(jìn)行傳代，從而獲得大量可供實(shí)驗(yàn)用的種子細(xì)胞。取第4代對(duì)數(shù)生長期人牙髓細(xì)胞爬片，用SABC法進(jìn)行波形蛋白和角蛋白免疫組化染色鑒定細(xì)胞來源，倒置顯微鏡下觀察。將處于對(duì)數(shù)生長期的第4代人牙髓細(xì)胞用0.25%的胰蛋白酶消化后，制成細(xì)胞懸液，以10⁴cells/ml分別接種于五個(gè)96孔培養(yǎng)板，每板余出一列培養(yǎng)孔不加液，其余各孔每孔液量150μl，培養(yǎng)24h。觀察細(xì)胞貼壁情況良好后，棄上清液，PBS緩沖液清洗3次，吸干，將細(xì)胞隨機(jī)分為5個(gè)實(shí)驗(yàn)組、1個(gè)對(duì)照組和1個(gè)空白對(duì)照組，每組選6個(gè)孔。實(shí)驗(yàn)組：在相應(yīng)的有細(xì)胞孔內(nèi)加入150μl用含2%活性碳吸附胎牛血清的無酚紅高糖DM... 

【文章來源】：河北醫(yī)科大學(xué)河北省

【文章頁數(shù)】：45 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
前言
材料與方法
結(jié)果
附圖
附表
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述 雌激素類物質(zhì)對(duì)細(xì)胞生物學(xué)特性影響的研究進(jìn)展
    參考文獻(xiàn)
致謝
個(gè)人簡歷


【參考文獻(xiàn)】：
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