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LPE對五種致齲菌生長及表兄鏈球菌相關(guān)酶活性的影響

發(fā)布時間:2021-06-25 22:38
  目的牙菌斑生物膜是齲病發(fā)生的基礎(chǔ)。變異鏈球菌、表兄鏈球菌和內(nèi)氏放線菌等是構(gòu)成牙菌斑生物膜的主要致齲菌。細菌通過疏水作用吸附于牙釉質(zhì)表面的獲得性膜,利用葡糖基轉(zhuǎn)移酶催化基質(zhì)中的蔗糖合成葡聚糖,葡聚糖可誘導(dǎo)牙面上細菌的粘附和聚集,促進牙菌斑形成。牙菌斑中的細菌代謝產(chǎn)酸,主要是無氧酵解中乳酸脫氫酶催化丙酮酸生成乳酸,酸的累積造成牙釉質(zhì)的局部脫礦,導(dǎo)致齲損形成。本課題組在國內(nèi)外首先開展檸檬提取物(Lemon peel extract,LPE)防齲的系列研究,LPE是由水果檸檬中提取的一種淡黃色液體,主要成分是檸檬烯及其同分異構(gòu)體(占總含量的79%)。本實驗通過研究LPE對5種致齲菌(變異鏈球菌、血鏈球菌、表兄鏈球菌、內(nèi)氏放線菌、嗜酸乳桿菌)的生長抑制作用,對表兄鏈球菌致齲相關(guān)酶(葡糖基轉(zhuǎn)移酶、乳酸脫氫酶)的活性及代謝產(chǎn)物(水不溶性多糖)的抑制作用,探討LPE抑制口腔致齲菌生長,抑制表兄鏈球菌的附著性、代謝產(chǎn)酸的作用機制,同時分析代謝酶在細菌致齲作用中的意義。方法1.LPE提取及成分分析采用水蒸氣蒸餾法提取揮發(fā)油,在一定的色譜質(zhì)譜條件下,測得檸檬揮發(fā)油成分GC.MS總離子流色譜圖(TIC)。根據(jù)... 

【文章來源】:天津醫(yī)科大學(xué)天津市 211工程院校

【文章頁數(shù)】:68 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
縮略語
前言
    研究現(xiàn)狀、成果
    研究目的、方法
一、LPE對口腔主要致齲菌生長的影響
    1.1 對象和方法
        1.1.1 材料與儀器
        1.1.2 實驗菌種和培養(yǎng)基
        1.1.3 菌液制備
        1.1.4 LPE的提取和成分分析
            1.1.4.1 LPE提取方法
            1.1.4.2 LPE成分分析
        1.1.5 LPE最低抑菌濃度
        1.1.6 菌落計數(shù)法測量LPE對五種口腔致齲菌生長的影響
        1.1.7 統(tǒng)計方法
    1.2 結(jié)果
        1.2.1 LPE成分GC-MS總離子流色譜圖及分析結(jié)果
        1.2.2 LPE對各菌的最低抑菌濃度MIC值
        1.2.3 五種致齲菌在各時間點的1gCFU/ml值
    1.3 討論
    1.4 小結(jié)
二、LPE對表兄鏈球菌葡糖基轉(zhuǎn)移酶活性和細胞外多糖含量的影響
    2.1 對象和方法
        2.1.1 材料與儀器
        2.1.2 主要試劑的配制
        2.1.3 LPE對表兄鏈球菌生長的影響
        2.1.4 GTF與WIG菌液培養(yǎng)及實驗分組
            2.1.4.1 實驗菌株及菌液制備
            2.1.4.2 LPE溶液的稀釋及實驗分組
            2.1.4.3 表兄鏈球菌菌液培養(yǎng)
        2.1.5 葡萄糖標準曲線和葡聚糖標準曲線的測定
            2.1.5.1 葡萄糖標準曲線測定
            2.1.5.2 葡聚糖標準曲線測定
        2.1.6 GTF的提取和活性測定
        2.1.7 胞外WIG含量的測定
        2.1.8 統(tǒng)計學(xué)處理
    2.2 結(jié)果
        2.2.1 LPE對表兄鏈球菌生長的影響
        2.2.2 葡萄糖標準曲線和葡聚糖標準曲線測定
        2.2.3 LPE溶液對表兄鏈球菌胞外WIG含量影響的測定
        2.2.4 LPE溶液對表兄鏈球菌GTF活性與WIG含量影響的相關(guān)性分析
    2.3 討論
    2.4 小結(jié)
三、LPE對表兄鏈球菌的乳酸脫氫酶活性和產(chǎn)酸能力的影響
    3.1 對象與方法
        3.1.1 材料與儀器
        3.1.2 實驗菌株及菌液制備
        3.1.3 LPE溶液的稀釋及實驗分組
        3.1.4 菌液培養(yǎng)
        3.1.5 LPE溶液對表兄鏈球菌LDH的影響
        3.1.6 LPE溶液對表兄鏈球菌產(chǎn)酸能力的影響
        3.1.7 統(tǒng)計學(xué)處理
    3.2 結(jié)果
        3.2.1 LPE溶液對表兄鏈球菌LDH影響
        3.2.2 LPE溶液對表兄鏈球菌產(chǎn)酸能力影響
        3.2.3 LPE溶液對表兄鏈球菌LDH活性與△pH影響的相關(guān)性分析
    3.3 結(jié)論
    3.4 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻
附錄
發(fā)表論文和參加科研情況說明
綜述
    綜述參考文獻
致謝



本文編號:3250075

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