本實(shí)驗(yàn)通過(guò)口腔鱗狀細(xì)胞癌的原代培養(yǎng)建立OSCCs原代培養(yǎng)模型,引進(jìn)SCC-9舌鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞系進(jìn)行CD44特異性免疫熒光抗體標(biāo)記流式細(xì)胞術(shù)分選出CD44⁺的腫瘤細(xì)胞,并鑒定CD44⁺的腫瘤細(xì)胞為腫瘤干細(xì)胞樣細(xì)胞。結(jié)果如下:①嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作,成功建立了OSCCs原代培養(yǎng)的模型;②原代培養(yǎng)模型中分選出CAFs,CAFs對(duì)腫瘤生長(zhǎng)微環(huán)境（Cell niche）的調(diào)節(jié)起到重要作用;③在SCC-9舌鱗癌細(xì)胞系中CD44可以作為分選腫瘤干細(xì)胞的特異性表面標(biāo)志物;④SCC-9中CD44⁺的腫瘤干細(xì)胞樣細(xì)胞所占的比例約為30%;⑤CD133在CD44⁺的腫瘤細(xì)胞中表達(dá)相對(duì)較高,可能成為分選口腔鱗狀細(xì)胞癌的另一個(gè)特異性表面標(biāo)志物;⑥干細(xì)胞基因Oct-4和原癌基因BMI-1在CD44⁺的OSCCs表達(dá)明顯升高,可能在維持口腔鱗狀細(xì)胞癌腫瘤干細(xì)胞性發(fā)揮了重要作用;⑦Ezrin在CD44⁺的OSCCs表達(dá)明顯升高,與CD44密切相關(guān),Ezrin作為連接CD44與細(xì)胞骨架結(jié)構(gòu)的橋... 

【文章來(lái)源】：吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：91 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

培養(yǎng)第三天，組織塊周?chē)?xì)胞生長(zhǎng)情況

培養(yǎng)第五天，混合生長(zhǎng)情況

諗嘌?戀?5 天后獲得了相對(duì)純化的 OSCCs 和 CAFs（如圖3、圖 4）；2)形態(tài)學(xué)觀察 OSCCs 呈四方形或多角形，呈“鋪路石”樣，細(xì)胞間可見(jiàn)細(xì)胞間橋連接（如圖 3）；3)CAFs 呈梭形，比一般的成纖維細(xì)胞體積大，細(xì)胞較伸展，生長(zhǎng)較多時(shí)細(xì)胞可以相互重疊生長(zhǎng)，細(xì)胞間無(wú)間橋連接（如圖 4、圖 5）。圖 1 培養(yǎng)第三天，組織塊周?chē)?xì)胞生長(zhǎng)情況Fig1 Representative images of tumor tissue cells including OSCCs and CAFs cultured inIMDM supplemented with 10% blood serum at the third day.第09期 吳國(guó)民：口腔鱗狀細(xì)胞癌腫瘤干細(xì)胞的分選和鑒定 E072-140-25

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]兩種人鼻咽癌活檢組織上皮細(xì)胞原代培養(yǎng)方法比較[J]. 王瑢,何英,梁莉,曾芳芳,李侖.  南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2010(12)
[2]Ezrin、E-cadherin在食管鱗癌中的表達(dá)及臨床意義[J]. 翟建文,楊曉剛,楊福申,胡基剛,華文霞.  癌癥. 2010(03)
[3]Isolation and Identification of Cancer Stem Cells from Human Osteosarcom by Serum-free Three-dimensional Culture Combined with Anticancer Drugs[J]. 周松,李鋒,肖駿,熊偉,方忠,陳文堅(jiān),牛鵬彥.  Journal of Huazhong University of Science and Technology（Medical Sciences）. 2010(01)
[4]Isolation and Identification of Cancer Stem-Like Cells from Murine Melanoma Cell Lines[J]. Jun Dou 1,4, ,Meng Pan 1,2,4 ,Ping Wen 1 ,Yating Li 1 ,Quan Tang 1 ,Lili Chu 1 ,Fengshu Zhao 1 , Chuilian Jiang 1 ,Weihua Hu 1 ,Kai Hu 1 and Ning Gu 3,1Department of Pathogenic Biology and Immunology,School of Basic Medical Science,Southeast University,Nanjing 210009,China; 2Jiangsu Province Hospital,Nanjing 210029,China; 3 Biological Science of Medical Engineering,Southeast University,Nanjing 210096,China; 4These authors contributed equally to the study;.  Cellular & Molecular Immunology. 2007(06)
[5]浸潤(rùn)性乳腺導(dǎo)管癌組織中Ezrin和鈣粘素E的表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系[J]. 李瓊,吳明富,宋安萍,魏軍成,徐剛,盧運(yùn)萍,馬丁.  癌癥. 2006(03)



本文編號(hào)：3219349