研究目的:通過(guò)構(gòu)建舌癌阿霉素耐藥細(xì)胞系（Tca8113/ADM）,用蛋白印跡技術(shù)檢測(cè)Tca8113/ADM及親本細(xì)胞系Tca8113的去整合素-金屬蛋白酶15（Adamalysin15,ADAM15）蛋白表達(dá)水平,并分析其與Tca8113耐藥性的關(guān)系,從腫瘤耐藥的角度對(duì)舌癌的耐藥與腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白ADAM15的關(guān)系進(jìn)行初步探討。方法:1、用人的舌鱗狀細(xì)胞癌Tca8113細(xì)胞,采用藥物濃度梯度遞增法,阿霉素持續(xù)誘導(dǎo),歷時(shí)15個(gè)月,成功構(gòu)建舌癌Tca8113/ADM細(xì)胞系。2、舌癌Tca8113親本細(xì)胞系作為對(duì)照組,阿霉素耐藥細(xì)胞系Tca811/ADM作為實(shí)驗(yàn)組。用Western Blotting技術(shù)檢測(cè)Tca8113/ADM及Tca8113親本細(xì)胞系的ADAM15蛋白表達(dá)水平,并分析其與舌癌Tca8113耐藥性的關(guān)系。結(jié)果:1、采用藥物濃度梯度遞增法持續(xù)給藥誘導(dǎo),連續(xù)培養(yǎng)15個(gè)月后,舌癌Tca8113細(xì)胞能夠在含1.2ug/mlADM的培養(yǎng)液穩(wěn)定生長(zhǎng)。此時(shí)其耐藥指數(shù)約為22.61。光鏡下Tca8113/ADM細(xì)胞比親本細(xì)胞胞體較大、較圓,胞核不規(guī)則,細(xì)胞內(nèi)的顆粒增多,倍增時(shí)間延長(zhǎng)。2、T... 

【文章來(lái)源】：廣西醫(yī)科大學(xué)廣西壯族自治區(qū)

【文章頁(yè)數(shù)】：49 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

舌癌Tca8113阿霉素耐藥細(xì)胞及親本細(xì)胞的生物學(xué)特性改變A：親本Tca8113舌癌細(xì)胞生長(zhǎng)呈典型的上皮樣細(xì)胞生長(zhǎng)方式，細(xì)胞間分界清楚，為“鋪

2 Tca8113/ADM 舌癌耐藥細(xì)胞針對(duì)阿霉素的 IC50以及耐藥倍數(shù)（RI）的情況：Tca8113/ADM 舌癌耐藥細(xì)胞 IC50為 90.01ug/ml，其親本細(xì)胞的 IC50為3.982ug/ml；耐藥倍數(shù)（RI）為 22.61。3 Western Blot檢測(cè)結(jié)果：舌癌Tca8113親本細(xì)胞系及Tca8113/ADM細(xì)胞系，其ADAM15蛋白的表達(dá)水平，用Westernblot法檢測(cè)，在分子量約100KD處可見(jiàn)清晰條帶，條帶上方約115KD處可見(jiàn)一非特異性蛋白條帶，欠清晰。Tca8113/ADM細(xì)胞表達(dá)量大，Tca8113細(xì)胞表達(dá)量較少。用ImageJ軟件對(duì)掃描圖進(jìn)行圖像分析，圖 3 Tca8113 親本與耐藥舌癌細(xì)胞生長(zhǎng)曲線Fig 3 The growth curve of Tca8113 parental cell line andTca8113/ADM cell line of tongue cancer

圖4 ADAM15、內(nèi)參GAPDH蛋白在不同組中的表達(dá) expression of ADAM15 protein in differe與耐藥細(xì)胞組ADAM15/GAPDH灰度平均值（x ± 灰度平均值 0.244±0.231 1.217±0.494灰度平均值是親本細(xì)胞組的4.98倍，完全隨機(jī)本細(xì)胞組灰度平均值差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

【參考文獻(xiàn)】：
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