發(fā)布時(shí)間：2021-03-19 16:54

　　[目的]探索牙齦間充質(zhì)干細(xì)胞作為骨組織工程種子細(xì)胞的可行性,以及TGF-β抑制劑SB431542對(duì)牙齦間充質(zhì)干細(xì)胞體外增殖和體內(nèi)外成骨分化的影響。[方法]收集臨床種植二期手術(shù)及口腔頜面外科阻生智齒拔除術(shù)中切除的健康廢用牙齦組織,進(jìn)行原代細(xì)胞的分離培養(yǎng)。應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)（Flow Cytometry,FCM）檢測(cè)間充質(zhì)干細(xì)胞表面標(biāo)志物CD73、CD90及造血干細(xì)胞表面標(biāo)志物CD34、CD45的表達(dá),并檢測(cè)其成骨定向分化能力,進(jìn)行其為間充質(zhì)干細(xì)胞的生物學(xué)鑒定;通過(guò)CCK-8增殖實(shí)驗(yàn)檢測(cè)GMSCs的增殖能力以及1 μM SB431542對(duì)GMSCs增殖的影響;細(xì)胞隨機(jī)分為三組:空白組細(xì)胞給予間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基、對(duì)照組細(xì)胞給予干細(xì)胞成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)基、實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞給予添加1 μM SB431542的間充質(zhì)干細(xì)胞成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)基,進(jìn)行成骨分化的誘導(dǎo);茜素紅染色檢測(cè)三組細(xì)胞在添加不同培養(yǎng)基體外培養(yǎng)21天后的礦化結(jié)節(jié)形成情況,拍照并利用Image Pro Plus 6.0軟件進(jìn)行圖形分析,利用GraphPad Prism 7軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析;通過(guò)RT-PCR（Real-Time Polymerase Chai... 

【文章來(lái)源】：南京大學(xué)江蘇省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：45 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１原代培養(yǎng)結(jié)果（Ａ．原代培養(yǎng)組織塊Ｂ．原代培養(yǎng)４ｄ細(xì)胞從組織爬出Ｃ．形態(tài)、大小均一，??

南京大學(xué)碩士學(xué)位論文???ＣＤ７３（９９．４％）、ＣＤ９０（９９．７％）均呈陽(yáng)性表達(dá)，造血干細(xì)胞表面標(biāo)志物ＣＤ３４（０．２％）、??Ｃ?Ｄ?４?５?（０．１?％）陰性表達(dá)，檢測(cè)結(jié)果顯示表面標(biāo)志物的表達(dá)水平和間充質(zhì)來(lái)源的干??細(xì)胞特征符合。??

?ＣＣＫ８增殖實(shí)驗(yàn)：ＳＢ４３１５４２對(duì)ＧＭＳＣｓ增殖無(wú)明顯影響??．４?ＲＴ－ＰＣＲ檢測(cè)各成骨相關(guān)基因的表達(dá)??ＰＣＲ檢測(cè)結(jié)果顯示，實(shí)驗(yàn)組ＡＬＰ、ＯＣＮ、Ｒｕｎｘ２、ＯＰＮ、ＣＯＬ基因的表達(dá)水平均高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義〇Ｐ＜０．０５）；茜素示：添加ＳＢ４３１５４２的ＧＭＳＣｓ礦化結(jié)節(jié)形成量高于對(duì)照組和空白計(jì)學(xué)意義〇Ｐ＜０．０５）。??＊?？?＊??＊??＊???１００?－１??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
[1]BMP-Smad信號(hào)通路在成骨與破骨細(xì)胞生成中的作用[D]. 李安娜.山東大學(xué) 2014



本文編號(hào)：3089899