目的慢性牙周炎是危害牙周支持組織的慢性感染性炎癥,能引起牙槽骨丟失,甚至導(dǎo)致牙齒脫落。越來越多的研究表明,長鏈非編碼RNA（long non-coding RNAs,lncRNAs）是牙周炎發(fā)生發(fā)展過程中的重要調(diào)控分子。本研究旨在探討lncRNA-01126在牙周炎過程中的生物學(xué)作用和機(jī)制。方法1.通過lncRNA表達(dá)譜芯片篩選牙周炎患者與健康人牙齦組織中差異表達(dá)的lncRNA,并用Q-PCR技術(shù)驗(yàn)證。采用結(jié)扎法建立牙周炎小鼠模型及P.g處理牙周膜細(xì)胞后,進(jìn)一步驗(yàn)證lncRNA-01126的表達(dá)。2.在牙周膜細(xì)胞中分別過表達(dá)和敲低lncRNA-01126后研究lncRNA-01126對牙周膜細(xì)胞的生物學(xué)的影響。通過CCK8實(shí)驗(yàn)檢測lncRNA-01126對牙周膜細(xì)胞增殖能力的影響、應(yīng)用細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)和Transwell實(shí)驗(yàn)檢測lncRNA-01126對牙周膜細(xì)胞遷移能力的影響、以及應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)檢測lncRNA-01126對牙周膜細(xì)胞凋亡能力的影響。3.采用蛋白質(zhì)印跡（Western Blot,WB）技術(shù)檢測lncRNA-01126參與調(diào)控的相關(guān)信號通路,并用信號通路抑制劑進(jìn)一步驗(yàn)證其功... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

【文章頁數(shù)】：59 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

lncRNA芯片中的差異基因A：牙周炎與正常牙齦組織中差異表達(dá)的基因；B：Q-PCR驗(yàn)證lncRNA-01126、lncRNA-545726、lncRNA-KLLPlncRNA-FIFH

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文18圖2小鼠牙周炎模型驗(yàn)證lncRNA-01126表達(dá)A：Micro-CT分析小鼠牙槽骨丟失；B：小鼠牙周炎模型牙齦組織lncRNA-01126表達(dá)；C：小鼠牙周炎模型牙齦組織相關(guān)炎癥因子表達(dá)Figure2.ToverifytheexpressionoflncRNA-01126inmousemodelofperiodontitis.(A)AnalysisofthelossofalveolarboneinmicebyMicro-CT.(B)ExpressionoflncRNA-01126ingingivaltissueinmousemodelofperiodontitis.(C)Expressionsofrelatedinflammationfactorsingingivaltissueinmousemodelofperiodontitis.3.3LPS-PG促進(jìn)hPDLCslncRNA-01126表達(dá)增加我們采用酶消化法提取正畸牙中的hPDLCs，經(jīng)細(xì)胞形態(tài)及免疫熒光染色鑒定hPDLCs表型。提取的hPDLCs形態(tài)呈長梭形（圖3A），表達(dá)Vimentin，不表達(dá)Keratin（圖3B）。1μg/mlLPS-PG分別刺激hPDLCs24h，48h，72h后，Q-PCR檢測lncRNA-01126的表達(dá)明顯增高。綜上，通過體內(nèi)實(shí)驗(yàn)和體外實(shí)驗(yàn)均發(fā)現(xiàn)lncRNA-01126在牙周炎過程中表達(dá)顯著增高，與lncRNA芯片結(jié)果一致。

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文19圖3hPDLCS的鑒定及l(fā)ncRNA-01126在hPDLCS中的表達(dá)A：hPDLCS的形態(tài)學(xué)特征；B：hPDLCS的免疫熒光染色；C：LPS-PG感染hPDLCS后lncRNA-01126的表達(dá)Figure3.IdentificationofhPDLCsandexpressionoflncRNA-01126inhPDLCs.(A)MorphologyofhPDLCs.(B)ImmunofluorescencestainingofhPDLCs.(C)TheexpressionoflncRNA-01126ofLPS-PGinfectedwithhPDLCs.4討論牙周炎是一種慢性炎癥，在牙周炎早期主要臨床表現(xiàn)可能僅僅是牙齦的紅腫及炎癥反應(yīng)，但一旦忽視牙周炎，其可能發(fā)展至牙槽骨骨質(zhì)丟失，牙齒松動甚至脫落。牙周炎的傳統(tǒng)治療方法包括手術(shù)治療和非手術(shù)治療。盡管牙周治療的整體

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]骨細(xì)胞研究的最新進(jìn)展[J]. 王剛,陸超鋒,李敏,應(yīng)航,童培建.  中國骨傷. 2016(01)
[2]Hedgehog信號通路與骨質(zhì)疏松癥[J]. 羅明,黃宏興,黃紅,李澤鈿,賴圓圓.  中國骨傷. 2014(02)
[3]長鏈非編碼RNA在腫瘤中的研究進(jìn)展[J]. 何冬梅,吳紅,高楊軍,胡小毛.  暨南大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)與醫(yī)學(xué)版). 2012(02)



本文編號：3069609