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顳下頜關(guān)節(jié)滑膜間充質(zhì)干細胞的實驗研究

發(fā)布時間:2021-03-07 18:31
  實驗一 顳下頜關(guān)節(jié)滑膜間充質(zhì)干細胞的分離與培養(yǎng) 目的 研究滑膜間充質(zhì)干細胞的分離與培養(yǎng)。方法用2mg/mL的Ⅰ型膠原酶消化獲得滑膜細胞,待細胞匯合后用有限稀釋法進行單細胞克隆,篩選出滑膜間充質(zhì)干細胞(SMSCs)。對SMSCs作細胞周期,免疫組織化學(xué),流式細胞儀的檢測與鑒定。結(jié)果體外培養(yǎng)的SMSCs,形成葵花樣細胞集落,胞漿突起明顯,相互連接成網(wǎng)狀,免疫染色為波形蛋白陽性與角蛋白陰性。流式細胞儀檢測發(fā)現(xiàn)有CD44、VCAM-1和ICAM-1的表達,但未檢測到CD8,CD34,等表面分子的表達。結(jié)論 經(jīng)體外純化的單克隆的SMSCs可以表現(xiàn)為成纖維細胞的特性,表明來源于外胚層,且具有自我增殖與多向分化的特征。 實驗二 顳下頜關(guān)節(jié)滑膜間充質(zhì)干細胞成骨潛能的實驗研究 目的 研究滑膜間充質(zhì)干細胞的成骨潛能。方法用2mg/mL的Ⅰ型膠原酶消化獲得滑膜細胞,待細胞匯合后用有限稀釋法進行單細胞克隆,篩選出滑膜間充質(zhì)干細胞(SMSCs)。取第三代SMSCs進行成骨誘導(dǎo),每天觀察細胞形態(tài),并于培養(yǎng)7天后檢測ALP活性和骨橋蛋白的表達,RT-PCR檢測成骨細胞特異轉(zhuǎn)錄因子—核心結(jié)合因... 

【文章來源】:武漢大學(xué)湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:110 頁

【學(xué)位級別】:博士

【部分圖文】:

顳下頜關(guān)節(jié)滑膜間充質(zhì)干細胞的實驗研究


sMsc生長曲線

細胞,組圖,細胞內(nèi),轉(zhuǎn)染


ProteininsuPernatantLaneZ空載體pcDN八3.1轉(zhuǎn)染組圖8一3ELISA法檢測細胞內(nèi)nMP一1Fig.8一3TheexPressionofnMP一1ProteinindeteetedbyEIJSAmethod.的表達cyt0Plasmwas

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圖8一2Westemblot顯示細胞上Fig.8一2TheexPressionofnMP一1Lan”1pcDN戶。.1一Timp一1轉(zhuǎn)染組Lane3正常培養(yǎng)的SMSCsTIMP一1基因的表達ProteininsuPernatantLaneZ空載體pcDN八3.1轉(zhuǎn)染組圖8一3ELISA法檢測細胞內(nèi)nMP一1Fig.8一3TheexPressionofnMP一1ProteinindeteetedbyEIJSAmethod.的表達cyt0Plasmwas

【參考文獻】:
期刊論文
[1]顳下頜關(guān)節(jié)盤前移位和盤穿孔滑液明膠酶測定及臨床意義[J]. 許強,龍星,劉俊杰.  中華口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2002(06)
[2]顳下頜關(guān)節(jié)紊亂病的命名、診斷分類及治療原則[J]. 馬緒臣,張震康.  中華口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2002(04)
[3]顳下頜關(guān)節(jié)盤前移位和穿孔的關(guān)節(jié)內(nèi)窺鏡研究[J]. 龍星,李金榮,汪傳鐸,何三綱.  口腔醫(yī)學(xué)縱橫. 1999(04)
[4]透明質(zhì)酸對關(guān)節(jié)軟骨的影響及作用機制[J]. 吳慧玲.  國外醫(yī)學(xué).口腔醫(yī)學(xué)分冊. 1999(01)
[5]損傷性和骨關(guān)節(jié)炎性滑膜細胞成骨作用的體外研究[J]. 鄧廉夫,柴本甫,齊進.  中華骨科雜志. 1997(11)
[6]體外培養(yǎng)滑膜細胞形態(tài)學(xué)和吞噬作用的觀察[J]. 范冷艷,吳晉寶,張健民,徐曉明,何正瑞,朱建國,張蕙心.  解剖學(xué)雜志. 1987(02)



本文編號:3069597

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