發(fā)布時間：2021-03-05 01:18

　　實驗?zāi)康谋緦嶒炛荚谘芯客ㄟ^激活和抑制經(jīng)典Wnt信號通路對人牙周膜干細(xì)胞成骨分化的影響以及在此過程中Hippo信號通路的表達(dá)變化;探討經(jīng)典Wnt信號通路介導(dǎo)Hippo信號通路調(diào)控PDLSCs成骨分化的分子機制,揭示兩種信號通路在干細(xì)胞成骨分化方面的交叉調(diào)控作用,為口腔組織再生工程中種子細(xì)胞優(yōu)化提供理論依據(jù)。實驗方法1.利用組織塊貼壁法分離獲得原代人牙周膜干細(xì)胞;使用流式細(xì)胞術(shù)檢測干細(xì)胞表面標(biāo)志物的表達(dá)水平;細(xì)胞經(jīng)成骨和成脂誘導(dǎo)后檢測其多向分化潛能;2.用人重組蛋白Wnta3a,DKK-1處理hPDLSCs,分別激活、阻斷經(jīng)典Wnt信號通路,q-PCR及Western blot檢測經(jīng)典Wnt信號通路中β-catenin、Wnt3a、LRP5、DVL、Axin及GSK3β的表達(dá)情況,ALP染色、茜素紅染色及AKP半定量分析PDLSCs成骨能力改變;檢測Hippo信號通路中TAZ、Mob、LATS1及磷酸化TAZ、Mob、LATS1的變化;熒光素酶報告系統(tǒng)檢測經(jīng)典Wnt信號通路轉(zhuǎn)錄區(qū)域TCF/LEF活性和Hippo信號通路轉(zhuǎn)錄區(qū)域TEAD活性;3.通過慢病毒轉(zhuǎn)染,過表達(dá)TAZ（oeTAZ）和敲... 

【文章來源】：山東大學(xué)山東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：56 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－１?ｈＰＤＬＳＣｓ?（Ｐ４）原代及傳代培養(yǎng)??（Ａ）光鏡下見組織塊周圍細(xì)胞呈長梭形輻射狀生長??

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本文編號：3064303