目的：將前期課題組構(gòu)建完成的重組質(zhì)粒載體pUChtrKO加入到已篩選出的變異鏈球菌HtrA高毒力菌株（以下簡稱高毒力株）中,通過基因同源重組來構(gòu)建高毒力變異鏈球菌HtrA基因缺陷株（以下簡稱HtrA缺陷株）,將構(gòu)建完成的HtrA缺陷株和高毒力株分別進(jìn)行培養(yǎng)計數(shù),評價二者轉(zhuǎn)化力的差異,判斷兒童口腔變異鏈球菌的致齲性是否受HtrA的調(diào)控,為乳牙齲的防治找到新靶點。方法：①構(gòu)建HtrA基因缺陷株：將已篩選出的高毒力菌株常規(guī)復(fù)蘇,厭氧培養(yǎng),制備感受態(tài)刺激肽細(xì)胞,然后加入已經(jīng)構(gòu)建完成的重組質(zhì)粒載體,應(yīng)用基因同源重組技術(shù)進(jìn)行HtrA基因缺陷株的構(gòu)建。將已經(jīng)轉(zhuǎn)化的高毒力株倍比稀釋后厭氧培養(yǎng),在光學(xué)顯微鏡下觀察細(xì)菌形態(tài)并生化鑒定。②trA基因缺陷株的鑒定：根據(jù)HtrA的基因序列來設(shè)計HtrA基因的引物HtrF/HtrR并進(jìn)行PCR擴(kuò)增,再對紅霉素抗性基因引物P1/P2, HtrA基因上游引物序列合并紅霉素抗性基因引物HtrAUF/P1, HtrA基因下游引物序列合并紅霉素抗性基因引物HtrAUR/P2進(jìn)行PCR擴(kuò)增,并將已經(jīng)進(jìn)行了PCR擴(kuò)增的四個基因片段以含有HtrA基因的變異鏈球菌標(biāo)準(zhǔn)株DNA作為參... 

【文章來源】：西南醫(yī)科大學(xué)四川省

【文章頁數(shù)】：45 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
前言
材料與方法
結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
英漢縮略詞對照表
致謝
抑制變異鏈球菌生長方法的研究進(jìn)展（綜述）
    參考文獻(xiàn)


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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