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雌激素介導(dǎo)下Wnt/β-catenin信號(hào)通路調(diào)控人牙周膜干細(xì)胞成骨分化的初步探討

發(fā)布時(shí)間:2021-02-08 02:59
  第一部分人牙周膜干細(xì)胞的體外分離培養(yǎng)與鑒定目的:體外分離、培養(yǎng)并純化人牙周膜干細(xì)胞(human periodontal ligament cells,hPDLSCs),通過流式細(xì)胞術(shù)檢測其細(xì)胞表面抗原標(biāo)記物,成骨成脂誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行多向潛能分化鑒定對(duì)其進(jìn)行初步鑒定,為后續(xù)實(shí)驗(yàn)研究奠定基礎(chǔ)。方法:收集西南醫(yī)科大學(xué)附屬口腔醫(yī)院口腔頜面外科門診因正畸治療需要拔除的牙體牙周健康的前磨牙,采用消化組織塊法聯(lián)合有限稀釋克隆法進(jìn)行原代培養(yǎng)并純化得到hPDLSCs。取純化后的P3代hPDLSCs進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn),采用CCK8法描繪其正常生長曲線,流式細(xì)胞術(shù)檢測其細(xì)胞表面抗原標(biāo)記物STRO-1、CD146、CD90、CD31的表達(dá);成骨和成脂誘導(dǎo)21天后分別行茜素紅染色和油紅O染色,光鏡下觀察礦化結(jié)節(jié)和脂滴形成情況。結(jié)果:原代培養(yǎng)以及有限稀釋克隆法培養(yǎng)后所得細(xì)胞形態(tài)呈長梭形,細(xì)胞貼壁呈旋渦狀排列生長。生長曲線呈近似“S”型,存在干細(xì)胞生長典型的停滯期、對(duì)數(shù)生長期和平臺(tái)期;細(xì)胞表面抗原標(biāo)記分子Stro-1、CD146、CD90、CD31 陽性表達(dá)率分別為 12.46%、99.15%、99.55%、0.49%,在特... 

【文章來源】:西南醫(yī)科大學(xué)四川省

【文章頁數(shù)】:86 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分 人牙周膜干細(xì)胞的體外分離、培養(yǎng)與鑒定
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
    結(jié)論
第二部分 雌激素介導(dǎo)下Wnt/β-catenin信號(hào)通路調(diào)控人牙周膜干細(xì)胞成骨分化
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
    結(jié)論
參考文獻(xiàn)
英漢縮略詞對(duì)照表
致謝
牙周膜干細(xì)胞成骨分化相關(guān)研究進(jìn)展(綜述)
    參考文獻(xiàn)
病例報(bào)告



本文編號(hào):3023264

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