口腔黏膜黏附給藥系統(tǒng)因能提供長時間的局部作用而帶來更具針對性的治療,同時能減少給藥劑量以及系統(tǒng)毒副作用,而成為治療口腔潰瘍的主要手段。目前,口腔黏膜黏附制劑中輔料的選擇與修飾已成為研究的熱點——增強給藥系統(tǒng)的黏附強度;抑制口腔內(nèi)酶活性,提高藥物穩(wěn)定性;增強藥物在口腔黏膜處的滲透擴(kuò)散作用。黏膜黏附材料的功能性愈發(fā)受到學(xué)者們的重視。白及多糖作為一種天然的高分子材料,近年來因其獨特的材料性能和藥理活性而備受關(guān)注。一方面,白及多糖曾用作抗生素、基因的載體以及創(chuàng)面敷料,表現(xiàn)出作為載體材料的優(yōu)良性能;而在促創(chuàng)面愈合、抗?jié)�、抗炎、抗氧化、免疫調(diào)節(jié)、抗纖維化和抗衰老等活性應(yīng)用方面,白及多糖同樣表現(xiàn)出了其極高的藥用價值。根據(jù)以往研究中白及多糖所表現(xiàn)出的理化特性以及藥理活性,提示白及多糖在作為黏附材料的同時,具有潛在的促口腔潰瘍愈合活性。雖然無論是從材料性能方面還是生物活性方面來說,白及多糖都已經(jīng)受到足夠的重視,但是鮮有文獻(xiàn)將兩者相結(jié)合,同時凸顯白及多糖多方面的應(yīng)用價值。而目前也尚未見關(guān)于白及多糖用于治療口腔黏膜損傷的報道。綜上,課題組選擇將兼具藥理活性以及生物材料特性的新型高分子材料白及多糖制備成口腔黏附片,用以探究白及多糖對口腔潰瘍愈合的影響,以期對治療口腔潰瘍給藥系統(tǒng)的開發(fā)提供一些思路。目的本研究以白及多糖為原料,制備為口腔黏膜黏附片,考察其對口腔潰瘍愈合的影響。對白及多糖的理化性質(zhì)及結(jié)構(gòu)進(jìn)行分析;篩選優(yōu)化口腔黏附片的處方配比及制備工藝,并對其相關(guān)制劑學(xué)特征進(jìn)行表征;分別從體外抗炎、抗菌、抗氧化以及體內(nèi)動物模型幾方面,綜合對白及多糖的藥理活性進(jìn)行探究。方法1.通過本課題組研究的提取純化工藝得到白及多糖,并通過紫外光譜掃描法、苯酚-硫酸法、考馬斯亮藍(lán)法、葡聚糖凝膠色譜法以及PMP柱前衍生化法對白及多糖的理化性質(zhì)進(jìn)行表征。2.應(yīng)用GC、FT-IR、NMR、GC-MS等,結(jié)合高碘酸氧化、降解、甲基化等化學(xué)手段對白及多糖的結(jié)構(gòu)特征進(jìn)行分析。3.采用3~2的析因設(shè)計,以白及多糖和甘油的濃度作為自變量,以口腔黏附片的抗張強度、體外黏附力和溶脹率作為因變量,對其處方進(jìn)行優(yōu)化。并對優(yōu)化后黏附片的折疊耐力、表面pH值、流變學(xué)行為、結(jié)晶結(jié)構(gòu)、微觀結(jié)構(gòu)及熱力學(xué)性質(zhì)進(jìn)行測定分析。4.采用CCK-8法考察白及多糖對巨噬細(xì)胞的毒性影響,并選擇脂多糖誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞的體外炎癥模型對白及多糖的抗炎活性進(jìn)行評價。5.通過白及多糖對DPPH自由基、羥基自由基、超氧陰離子自由基的清除實驗對多糖抗氧化活性進(jìn)行評價。6.通過瓊脂擴(kuò)散法研究白及多糖對幽門螺旋桿菌的體外抗菌作用。7.將白及多糖口腔黏附片應(yīng)用于醋酸誘導(dǎo)的兔口腔潰瘍模型,以創(chuàng)面愈合率及黏膜的切片染色作為觀察指標(biāo),探究白及多糖對口腔潰瘍愈合的影響。結(jié)果1.白及多糖經(jīng)紫外光譜掃描后在260 nm和280 nm處均未出現(xiàn)明顯的吸收峰;白及多糖中蛋白質(zhì)含量及總多糖含量的測定表明白及多糖中不含蛋白質(zhì),其總多糖含量為63.46%;白及多糖的相對分子質(zhì)量Mw和Mn分別為3.73×10~5g/mol和6.75×10~4 g/mol;白及多糖單糖組成及摩爾比為:甘露糖:葡萄糖=2.946:1。2.白及多糖經(jīng)高碘酸鈉氧化,223 nm處吸光值呈逐漸下降趨勢,在5天后氧化液的吸光值降至0.494,并達(dá)到穩(wěn)定。標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為Y=0.0389x+0.0017(R~2=0.9995)。經(jīng)計算得1 mol的糖殘基消耗0.95 mol的高碘酸鈉,并生成0.175mol的甲酸。Smith降解產(chǎn)物中檢測出葡萄糖、甘露糖、赤蘚醇及甘油;根據(jù)GC-MS結(jié)果,推斷白及多糖的糖苷鍵構(gòu)型主要包含了Man-(1→、→2)-Glc-(1→、→2)-Glc-(1→、→3)-Glc-(1→、→4)-Man-(1→、→4)-Glc-(1→;FT-IR及NMR的結(jié)果表明,白及多糖中含有多糖普遍存在的特征化學(xué)基團(tuán),且氫譜及碳譜中有大量β-1,4-吡喃糖相關(guān)的化學(xué)位移信號。3.經(jīng)3~2析因設(shè)計分析,Y_1(抗張強度)的常數(shù)和回歸系數(shù):Y_1=4.18-0.32X_1+0.057X_2-0.8X_1X_2-0.31X_1~2+2.04X_2~2;Y_2(體外黏附力)的常數(shù)和回歸系數(shù):Y_2=1.68-0.01X_1+0.035X_2-0.11X_1X_2-0.46X_1~2+0.085X_2~2;Y_3(溶脹率)的常數(shù)和回歸系數(shù):Y_3=30.92+0.25X_1-5.31X_2;優(yōu)化白及多糖口腔黏附片的抗張強度為6.318±0.52 N/mm~2,體外黏附力為1.797±0.02 N,溶脹率為24.63±2.53%,即使折疊300次之后也沒有出現(xiàn)斷裂或裂縫,表面pH在6.7到7.0之間波動;掃描電鏡分析結(jié)果表明黏附片呈現(xiàn)出多孔的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu);流變學(xué)行為研究表明多糖凝膠具有假塑性流動行為,黏附片復(fù)溶后的凝膠和多糖凝膠的表觀粘度分別為400.9 mPa·s和405.23 mPa·s;X-射線衍射的分析表明,白及多糖內(nèi)部的結(jié)晶性較弱,屬于無定型結(jié)構(gòu),而制備為黏附片后X-射線衍射圖譜中峰強度明顯增強;DSC/TGA顯示,白及多糖在升溫過程中出現(xiàn)了三次失重及分解。4.細(xì)胞毒性實驗結(jié)果表明,在不同濃度(25~800μg/mL)的白及多糖溶液下,RAW264.7細(xì)胞的存活率分別為99.14±6.99%、101.64±6.04%、106.48±5.66%、98.79±6.97%、123.34±2.31%、104.63±10.25%。選取NO、TNF-α、IL-1β作為檢測指標(biāo),對白及多糖口腔黏附片的體外抗炎活性進(jìn)行評價,結(jié)果表明,白及多糖具有一定的抗炎活性。5.體外抗氧化實驗結(jié)果顯示,當(dāng)多糖的濃度從0.5 mg/mL變化到8 mg/mL時,DPPH的清除率從14.25±3.18%增加到了51.72±2.59%;羥基自由基的清除率從13.10±2.45%增加到了34.80±2.99%;而超氧陰離子自由基的清除率的變化相對穩(wěn)定,范圍為21.05±0.91%~24.15±0.49%。6.體外抗菌實驗結(jié)果表明,白及多糖口腔黏附片對幽門螺旋桿菌的抑菌圈直徑為6.25±0.94 mm。7.體內(nèi)實驗結(jié)果表明,在第7天時,空白組和給藥組的愈合率分別為30.4±8.47%和50.31±6.86%;在第12天時,給藥組與空白組的創(chuàng)面均已愈合。結(jié)論1.對白及多糖的理化性質(zhì)以及結(jié)構(gòu)特征進(jìn)行了表征與分析。2.處方及工藝優(yōu)化后制備的白及多糖黏附片具有足夠的韌性與黏附力,適宜的溶脹率與pH值,結(jié)晶性增強,熱力學(xué)穩(wěn)定,吸水后仍能保持其固有的流動性,體現(xiàn)了白及多糖作為生物黏附材料的優(yōu)良性能。3.白及多糖生物相容性好,安全性高,具有一定的抗炎、抗氧化以及抗菌活性,并且能促進(jìn)口腔潰瘍的愈合,說明白及多糖是一種較為理想的口腔黏膜黏附材料,兼具促口腔潰瘍愈合的潛力,這對治療口腔潰瘍給藥系統(tǒng)的開發(fā)具有十分重要的意義。
【學(xué)位單位】：成都中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：R318.08;R781.5
【部分圖文】：

樣品分子量分布曲線圖

12圖 1-2 單糖標(biāo)準(zhǔn)品和白及多糖的液相色譜圖Figure 1-2 The HPLC chromatogram of the standard sugar and BSP

15圖 1-3 標(biāo)準(zhǔn)品和白及多糖 Smith 降解產(chǎn)物的氣相色譜圖re 1-3The GC chromatographyof derivatives fromSmith hydrolysates of the standard a從 GC 結(jié)果可以看出，Smith 降解產(chǎn)物中檢測出葡萄糖和甘露糖，說明分未被 NaIO4氧化，因此可能存在 1→3 連接的糖苷鍵；同時，在降解測到赤蘚醇，表明糖鏈中可能存在 1 → 4，1 → 4,6 位鍵合的己糖；結(jié)測出甘油，說明白及多糖中可能含有 1 →、1 → 6、1 → 2、1 → 2,6 類鍵。該結(jié)果與對氧化產(chǎn)物的分析結(jié)果一致，但與文獻(xiàn)不同[12,11]，后者報th 降解產(chǎn)物中未發(fā)現(xiàn)葡萄糖和甘露糖。這表明白及多糖作為雜多糖，具雜的結(jié)構(gòu)，并且結(jié)構(gòu)可能因不同的提取和純化方式而發(fā)生改變。
【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 蔡錦源;梁瑩;吳慶華;胡嘉豪;梁豪榮;韋坤華;;白及多糖的提取工藝及其生物活性研究[J];食品工業(yè);2018年01期

2 臺琪瑞;殷秀惠;;白及多糖的提取與分析[J];中國藥業(yè);2014年22期

3 趙永偉;王艷宏;;白及多糖的研究進(jìn)展[J];中國中醫(yī)藥科技;2015年04期

4 劉福強;王艷萍;韓丹;畢亞靜;李洪斌;劉革;劉天嬌;;白及多糖的提取及其相對分子質(zhì)量測定和結(jié)構(gòu)研究[J];中成藥;2013年10期

5 張寒;郝保華;徐花榮;楊瑞瑞;;白及多糖的提取工藝的研究[J];陜西中醫(yī);2007年02期

6 劉佳琪;可燕;蔣嘉燁;栗源;陳師黎;吳怡;干仲元;;白及多糖對酪氨酸酶活性及黑色素生成的影響[J];上海中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報;2018年05期

7 陳景耀;張衛(wèi)明;芮海云;陸長梅;蔣繼宏;吳國榮;;白及多糖硫酸酯化前后理化性質(zhì)和結(jié)構(gòu)的比較研究[J];中草藥;2006年10期

8 萬芳;張冕;李瑤瑤;;白及多糖琥珀酸酯的抗氧化活性分析[J];臨床合理用藥雜志;2018年13期

9 劉煜;韓偉;;超聲輔助提取白及多糖的研究[J];機(jī)電信息;2017年32期

10 瞿燕;張晨;廖禎誠;胡鈴莉;何瑤;;白及多糖應(yīng)用于醫(yī)用生物材料的探討[J];中藥與臨床;2017年05期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前2條

1 羅仕華;白及微球?qū)嶒炑芯縖D];華中科技大學(xué);2012年

2 陳黎;鄂西北白及產(chǎn)地適宜性與品質(zhì)評價研究[D];湖北中醫(yī)藥大學(xué);2014年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 陳俊可;基于白及多糖修飾Bsp-GO止血敷料的制備與性能研究[D];西南民族大學(xué);2019年

2 廖禎誠;基于“藥輔合一”的雙重特點研究白及多糖口腔黏附片制備工藝及促口腔潰瘍愈合作用[D];成都中醫(yī)藥大學(xué);2019年

3 胡鈴莉;新型白及多糖可溶性微針的制備、表征及其初步釋藥性能研究[D];成都中醫(yī)藥大學(xué);2019年

4 張慧;白及多糖對乙醇型胃黏膜損傷保護(hù)作用的研究[D];陜西師范大學(xué);2018年

5 王尚萍;黃花白及多糖結(jié)構(gòu)解析及其抗腫瘤活性研究[D];陜西師范大學(xué);2017年

6 張燕;白及多糖酸水解動力學(xué)研究[D];蘇州大學(xué);2010年

7 彭芳;白及多糖注射液的藥代動力學(xué)研究[D];蘇州大學(xué);2010年

8 殷殷;白及多糖的可控乙�；男匝芯縖D];蘇州大學(xué);2010年

9 王維;白及堿提多糖理化性質(zhì)及相關(guān)藥理作用的探究[D];陜西師范大學(xué);2015年

10 陳怡憓;白及多糖/羥丙基殼聚糖/珍珠層粉復(fù)合材料促下頜骨缺損修復(fù)的動物實驗研究[D];山東大學(xué);2015年

本文編號：2878167