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fibromodulin在正常牙周組織、炎性牙齦組織和牙周損傷愈合過程中的分布與表達(dá)

發(fā)布時(shí)間:2020-11-07 14:14
   近年來,對于牙周疾病的病因?qū)W和病理學(xué)的研究,已經(jīng)深入到微生物、免疫和生物化學(xué)等領(lǐng)域,但是牙周病的治療方面總是落后于病因病理方面的探討,達(dá)不到與后者相當(dāng)?shù)乃健TS多學(xué)者致力于牙周愈合和再生的研究,期望更深地了解牙周組織的活動,探討使受損的牙周組織再生的方法,為牙周病的治療提供新的思路。蛋白多糖被認(rèn)為是一種有用的工具,可以用來控制細(xì)胞的某些活動,而這些活動是傷口成功愈合的關(guān)鍵。因此,蛋白多糖可能在牙周組織中起調(diào)節(jié)作用,有助于損傷牙周組織的愈合。 fibromodulin是富含亮氨酸的小的間質(zhì)蛋白多糖中的一種,與其同家族的蛋白多糖主要有biglycan,decorin和lumican等。這類蛋白多糖結(jié)構(gòu)相似,與膠原關(guān)系密切,并能在細(xì)胞外基質(zhì)中發(fā)揮協(xié)調(diào)作用,參與組織活動的調(diào)節(jié)。對fibromodulin的研究,在身體的其他組織已經(jīng)比較深入,已知這種蛋白多糖廣泛分布于鞏膜、肌腱、角膜、關(guān)節(jié)軟骨、皮膚、主動脈等多種組織的細(xì)胞外基質(zhì)中,在組織自身穩(wěn)定、損傷愈合、炎癥和某種病理?xiàng)l件下(如纖維變性)行使重要功能,然而這些研究少有涉及牙周組織領(lǐng)域。本研究的目的是揭示fibromodulin在正常牙周組織、炎性牙齦組織和牙周損傷愈合過程中的免疫定位,同時(shí)將與fibromodulin關(guān)系密切的蛋白多糖biglycan,decorin及Ⅰ型、Ⅲ型膠原,同其進(jìn)行比較,推測fibromodulin在牙周組織中的作用。 實(shí)驗(yàn)分四部分進(jìn)行。 第一部分: 目的:研究fibromodulin在正常牙周組織中的分布和表達(dá),認(rèn)識fibromodulin在牙周組織自身穩(wěn)定中的作用。 方法: 1.用免疫組織化學(xué)方法,對正常Lewis鼠磨牙牙周組織的fibromodulin的組織分布和細(xì)胞定位進(jìn)行評價(jià)。 2.培養(yǎng)人類牙周細(xì)胞(牙跟成纖維細(xì)胞,牙周韌帶成纖維細(xì)胞和成骨細(xì)胞)。 3.采用逆轉(zhuǎn)錄一聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù),對人類牙周細(xì)胞中fibromodulin的表達(dá)進(jìn)行測 定,并憑借NIH凝膠分析軟件對fibromodulin進(jìn)行進(jìn)一步的半定量分析。 4.同時(shí)對decorin,biglyean,I型膠原,Ixx型膠原做同樣的實(shí)驗(yàn),并與fibromo血lin 相比較。 結(jié)果: 1.fibromodulin分布于牙跟上皮基底上區(qū)、牙釀和牙周韌帶成纖維細(xì)胞及其基質(zhì)? 近口腔牙跟面的區(qū)域和牙周韌帶一牙槽骨、牙周韌帶一牙骨質(zhì)界面有強(qiáng)陽性表達(dá)。 2.與fibromodulin來自同一家族的decorin和biglycan,顯示與fibromo血lin不同的 分布和與膠原纖維的聯(lián)系。decorin強(qiáng)陽性表達(dá)于牙齲組織跟溝附近的區(qū)域。biglycan則 在牙跟上皮著色明顯。 3.從mRNA的表達(dá)來看,fibromodulin在成骨細(xì)胞中強(qiáng)烈表達(dá),decorin和biglyean 也有類似表現(xiàn)。I型、m型膠原的mRNA在牙跟成纖維細(xì)胞中表達(dá)水平高于成骨細(xì)胞和 牙周韌帶成纖維細(xì)胞。 結(jié)論:fibrornodulin在牙周組織和細(xì)胞中的特殊分布和表達(dá),提示fibromoduhn可能 與其他小蛋白多糖相互作用,調(diào)節(jié)膠原纖維的網(wǎng)絡(luò)形成,并可能參與牙槽骨和牙骨質(zhì)礦 化口 第二部分: 目的:研究fibromoduhn在人類炎性牙跟組織中的分布和表達(dá),探討fibrom。血lin 在炎癥狀態(tài)的牙靚組織中所起的作用。 方法: 1.從人類健康牙靚、牙跟炎和牙周炎患者的牙釀組織中取樣。 2.用免疫組織化學(xué)的方法,觀察fibromodulin在正常牙靚和炎性牙釀中的分布和表 達(dá)。 結(jié)果: 1.fibromodulin在健康牙跟上皮呈中度著色,在牙踉結(jié)締組織中無明顯表達(dá)。 2.在炎性牙跟組織中,牙眼成纖維細(xì)胞和牙跟結(jié)締組織基質(zhì)呈現(xiàn)fibromo血lin強(qiáng)著 色形式。 結(jié)論:fibromodulin在炎性牙斂組織中表達(dá)增強(qiáng),可能是受炎癥誘導(dǎo),與其他基質(zhì)成 II 分相互作用,參與牙齲組織的炎癥愈合過程。 第三部分: 目的:研究fibromodulin在牙周損傷愈合中的分布和表達(dá),了解fibromodulin在牙 周損傷愈合期間其時(shí)間上和空間上的定位,探討它在牙周損傷愈合過程膠原纖維生成中 與其他小蛋白多糖biglycan和decorin的關(guān)系。 方法: 1.建立牙周損傷愈合動物模型。選用成年鼠作為實(shí)驗(yàn)對象,損傷下領(lǐng)右側(cè)磨牙的牙 周組織(包括牙槽骨),同時(shí)也損傷下領(lǐng)左側(cè)磨牙的牙周組織(不包括牙槽骨),定時(shí)跟 蹤觀察28天至損傷愈合。 2.HE染色顯示牙周損傷愈合的組織形態(tài)學(xué)表現(xiàn)。 3.采用免疫組織化學(xué)分析方法對不同時(shí)間內(nèi)愈合組織中的fibromodulin,biglycan, decorin,I型膠原和m型膠原進(jìn)行觀察。 結(jié)果: 1.HE染色顯示,牙周損傷后第1天,炎性細(xì)胞滲透入牙跟組織和跟溝,根側(cè)損傷 區(qū)周圍形成纖維蛋白團(tuán)塊。牙周損傷后第3天和第5天,肉芽組織開始形成,成纖維細(xì) 胞樣細(xì)胞密度很高;移行的牙眼上皮覆蓋損傷區(qū);新近形成的膠原纖維呈束狀分布。牙 周損傷后第7天和第14天之間,新的牙周韌帶形成。牙周損傷后第14天,上皮附著牙 根表面;新骨開始形成。 2.免疫組織化學(xué)染色顯示,在牙周損傷愈合早期,fibromodulin與膠原纖維束關(guān)系 密切,分布于結(jié)締組織I型膠原纖維分布區(qū)。higlycall與上皮再生緊密相關(guān)。dscorin主 要位于上皮下區(qū),與fibromodulin
【學(xué)位單位】:武漢大學(xué)
【學(xué)位級別】:博士
【學(xué)位年份】:2004
【中圖分類】:R781.4
【部分圖文】:

放大倍數(shù),牙齒,結(jié)締組織,上皮


圖1一2正常牙眼組織的組織學(xué)表現(xiàn)(HE染色放大倍數(shù):200X)T牙齒;GC牙馥結(jié)締組織;GE牙馥上皮圖1一3牙跟組織的對照組織切片(免疫組織化學(xué)染色放大倍數(shù):200x)T牙齒;GC牙翻結(jié)締組織;GE牙馥上皮

免疫組織化學(xué)染色,放大倍數(shù),對照組,牙齒


20()4.4錢虹:fibromodulin在正常牙周組織、炎性牙馥組織和牙周損傷愈合過程中的分布與表達(dá)圖1一2正常牙眼組織的組織學(xué)表現(xiàn)(HE染色放大倍數(shù):200X)T牙齒;GC牙馥結(jié)締組織;GE牙馥上皮圖1一3牙跟組織的對照組織切片(免疫組織化學(xué)染色放大倍數(shù):200x)T牙齒;GC牙翻結(jié)締組織;GE牙馥上皮

免疫組織化學(xué)染色,樹突狀細(xì)胞,基底層,放大倍數(shù)


武漢大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)院博士學(xué)位論文2004.4圖1一五brornodulin在牙凝上皮和牙敘結(jié)締組織中的分布,其中勵(lì)拍modulin在靠近口腔面處比靠近牙面處有更強(qiáng)的表達(dá)(免疫組織化學(xué)染色放大倍數(shù):20(jX)T牙齒;GC牙凝結(jié)締組織;GE牙眼上皮圖1一fibromodulin在牙叔上皮的分布,其中基底層樹突狀細(xì)胞有明顯的陽性著色(箭頭所示),基底膜細(xì)胞表達(dá)免疫陰性(免疫組織化學(xué)染色放大倍數(shù):40()x)GC牙跟結(jié)締組織;GE牙齲上皮
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本文編號:2874056

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