目的： （1）通過組織塊法體外培養(yǎng)人頰黏膜成纖維細(xì)胞（HBMPs）建立細(xì)胞模型，為后續(xù)研究提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。（2）①觀察不同濃度甘草甜素對(duì)人頰黏膜成纖維細(xì)胞增殖的影響。②通過脂多糖（LPS）刺激建立人頰黏膜成纖維細(xì)胞的細(xì)胞炎癥模型，同時(shí)加入甘草甜素進(jìn)行干預(yù)，觀察白細(xì)胞介素-6（IL-6）的濃度，來探討甘草甜素對(duì)人頰黏膜成纖維細(xì)胞炎癥反應(yīng)的作用。 方法： （1）取OLP患者的正常頰黏膜，組織塊法培養(yǎng)人頰黏膜成纖維細(xì)胞，經(jīng)過傳代、分離、純化，取第四代細(xì)胞進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色，證明所得細(xì)胞為HBMFs。（2）①取生長良好的頰黏膜成纖維細(xì)胞，加入0μg/ml、25μg/ml、50μg/ml、100μg/ml、150μg/ml、200μg/ml的甘草甜素,培養(yǎng)24h、48h、72h后,經(jīng)MTT法檢測每孔的光密度值(OD)。②第4代成纖維細(xì)胞為對(duì)照組、加入脂多糖為炎癥組、同時(shí)加入脂多糖和甘草甜素為實(shí)驗(yàn)組，用ELISA法分別檢測三組IL-6的濃度。 結(jié)果： （1）通過組織塊法培養(yǎng)的人頰黏膜成纖維細(xì)胞，經(jīng)傳代、分離、純化至第四代，得到純度高、活性好的HBMPs。倒置顯微鏡下觀察，細(xì)胞呈長梭形或者星形，細(xì)胞核清晰，圓形或橢圓形居中，胞漿豐富。細(xì)胞密度高時(shí)交織排列成“網(wǎng)狀”或者“束狀”。免疫組織化學(xué)法顯示細(xì)胞抗角蛋白染色陰性，抗波形蛋白染色陽性。（2）①M(fèi)TT法結(jié)果：與0μg/ml對(duì)照組比較，除了25μg/ml組在24h時(shí)間段內(nèi)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，其余各組在各時(shí)段差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。甘草甜素對(duì)人頰黏膜成纖維細(xì)胞的生長有抑制作用，在一定范圍內(nèi)隨藥物濃度增加和作用時(shí)間延長而增強(qiáng)，具有明顯的時(shí)間和劑量依賴性。②ELISA法結(jié)果：對(duì)照組有微量的IL-6產(chǎn)生，炎癥組分泌IL-6明顯高于對(duì)照組,差異有顯著性(P0.05)。實(shí)驗(yàn)組IL-6分泌量明顯低于炎癥組,差異有顯著性(P0.05)。結(jié)論： （1）人頰部固有層的主要細(xì)胞為成纖維細(xì)胞，組織塊法培養(yǎng)頰黏膜成纖維細(xì)胞為后續(xù)實(shí)驗(yàn)提供細(xì)胞模型。（2）①甘草甜素對(duì)人頰黏膜成纖維細(xì)胞的生長有抑制作用。②人頰黏膜成纖維細(xì)胞經(jīng)過脂多糖促炎，炎癥因子IL-6釋放增多，體外模擬口腔扁平苔蘚（OLP）的炎癥狀態(tài)。加入甘草甜素進(jìn)行干預(yù)，IL-6的釋放顯著降低，說明甘草甜素在治療口腔扁平苔蘚的炎癥反應(yīng)中有重要作用，為臨床治療口腔扁平苔蘚提供理論依據(jù)。
【學(xué)位單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2013
【中圖分類】：R781.5
【文章目錄】：
中英文縮略詞簡表
摘要
Abstract
前言
第一部分
    一、 實(shí)驗(yàn)材料
    二、 實(shí)驗(yàn)方法
    三、 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    四、討論
第二部分
    一、 實(shí)驗(yàn)材料
    二、 實(shí)驗(yàn)方法
    三、 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    四、 討論
全文結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
附錄
攻讀學(xué)位期間發(fā)表文章情況
致謝
個(gè)人簡歷

【參考文獻(xiàn)】

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2 夏利平,麥根榮,李祥民;白細(xì)胞介素6及其受體與病毒性心肌炎關(guān)系的實(shí)驗(yàn)研究[J];中國當(dāng)代兒科雜志;2004年02期

3 柏景坪,林梅;口腔扁平苔蘚藥物治療新進(jìn)展[J];國外醫(yī)學(xué).口腔醫(yī)學(xué)分冊;2004年04期

4 李誠秀，黃能慧，李玲，羅俊;甘草甜素對(duì)抗癌藥活性及毒性的影響[J];貴陽醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);1996年03期

5 黃小霏;范聯(lián);陳國華;;手足口病患兒血清IL-6、IL-10、IL-17水平的變化及其臨床意義[J];重慶醫(yī)學(xué);2012年30期

6 張曉茹,董江波;復(fù)方甘草甜素治療兒童玫瑰糠疹100例療效觀察[J];河北醫(yī)藥;2004年04期

7 王憲英;楊劼;;復(fù)方甘草甜素的臨床應(yīng)用[J];河北醫(yī)藥;2006年08期

8 鄧守恒;楊敬寧;曹鳳軍;蔡曉軍;鄧守平;陳萍;;硒化殼聚糖促進(jìn)體外培養(yǎng)皮膚成纖維細(xì)胞增殖[J];河北醫(yī)藥;2010年07期

9 袁曉玲;;復(fù)方甘草酸苷治療扁平苔蘚25例近期療效觀察[J];黑龍江醫(yī)學(xué);2011年09期

10 劉永祥;甘草甜素在皮膚科的應(yīng)用與不良反應(yīng)[J];臨床軍醫(yī)雜志;2005年01期

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本文編號(hào)：2862276