目的研究伴放線放線桿菌牙周局部感染和全身感染對正常/高脂飲食新西蘭兔組織器官炎癥反應(yīng)的影響，為探討牙周病與高脂血癥相互關(guān)系的相關(guān)分子生物學機制提供理論依據(jù)。 方法實驗一：采用高脂飼料喂養(yǎng)6周建立新西蘭兔高脂血癥模型，兔前磨牙絲線結(jié)扎加牙周接種伴放線放線桿菌（Aa）維持8周，建立牙周病模型，分組為A組（ND）：正常飲食，B組（HFD）：高脂飲食，C組（Aa）：局部接種Aa，D組（HFD+Aa）：高脂飲食+局部接種Aa。采用鱟試劑、紅外線光譜檢測試劑盒提取Aa LPS，55ng/kg注射LPS，一周三次持續(xù)8周建立內(nèi)毒素入血模型。實驗二：分組為A組（ND）：正常飲食+注射生理鹽水，B組（HFD）：高脂飲食+注射生理鹽水，C組（ND+Aa-LPS）：正常飲食+Aa-LPS，D組（HFD+Aa-LPS）：高脂飲食+Aa-LPS，E組（ND+Ec-LPS）：正常飲食+Ec-LPS，F(xiàn)組（HFD+Ec-LPS）：高脂飲食+Ec-LPS。實驗動物14周后實施安樂死，取下頜骨做骨喪失的形態(tài)學分析；采血測量TC、TG、HDL-C、LDL-C的變化，并用Elisa試劑盒檢測兔外周血中CRP、TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10、INF-γ、MCP-1等炎癥因子的水平；取主動脈、心肌、肺、肝、腎組織，做HE染色、TNF-α免疫組化染色，采用Realtime-PCR檢測組織中TNF-α、IL-1β、CRP、IL-6、IL-10、MMP-9、MCP-1。實驗三：實驗動物分為四組：A組（ND）：正常飲食，B組（HFD）：高脂飲食，C組（Aa）：注射Aa菌懸液，D組（HFD+Aa）：高脂飲食+注射Aa菌懸液，菌懸液濃度為1.0×108CFU/ml、0.1ml/kg，對照組注射PBS，一周三次持續(xù)8周。第14周測量血清中炎癥因子。實驗四：實驗動物建立牙周炎模型后耳源靜脈注射IL-10（0.1μg/kg），24h后測量血清中炎癥因子。 結(jié)果實驗一：高脂飲食伴牙周感染的新西蘭兔較其他各組動物呈現(xiàn)更高的炎癥因子表達和牙槽骨喪失，而且牙周局部Aa感染促進了不同組織器官的病理進程。實驗二：全身注射Aa-LPS時，高脂血癥動物早期炎癥因子表達較正常飲食動物低，而長期慢性Aa-LPS刺激后，高脂飲食新西蘭兔其外周血炎癥因子和不同組織炎癥因子表達均較正常飲食動物高。實驗三：長期Aa菌血癥感染后，D組動脈粥樣硬化程度明顯較其他各組高，且各炎癥因子表達明顯升高。實驗四：0.1μg/kg IL-10注射能短暫抑制牙周炎引起的全身反應(yīng)。 結(jié)論Aa局部或全身感染均可上調(diào)炎癥因子，導致兔血脂代謝紊亂，從而加重高脂血癥對組織器官炎癥反應(yīng)。不同組織器官對Aa感染的反應(yīng)各不相同，Aa感染可能是全身疾病發(fā)生發(fā)展的危險因素。高脂血癥可使機體對細菌感染的敏感性增強并造成免疫失調(diào)，表現(xiàn)在早期抗炎和促炎因子的分泌遲鈍，以及長期慢性的感染后調(diào)整炎癥因子的能力下降，分泌量升高。IL-10可短暫抑制牙周炎引起的全身炎癥反應(yīng)。
【學位單位】：福建醫(yī)科大學
【學位級別】：博士
【學位年份】：2013
【中圖分類】：R781.4
【部分圖文】：

表 1-2 實驗動物體重變化（Mean ± SD, Kg）Week ND HFD Aa HFD+Aa0 2.63±0.04 2.77±0.01 2.58±0.44 2.69±0.101 2.68±0.06 2.80±0.02 2.73±0.40 2.75±0.112 2.74±0.11 2.91±0.14 2.80±0.32 2.70±0.073 2.79±0.10 2.98±0.09 2.83±0.07 2.83±0.084 2.85±0.08 3.08±0.08 2.85±0.11 2.85±0.105 2.89±0.07 3.16±0.08 2.92±0.05 2.91±0.106 2.96±0.07 3.25±0.09 2.98±0.05 2.93±0.097 3.01±0.07 3.34±0.11 3.00±0.07 3.1±0.048 3.06±0.13 3.38±0.11 3.03±0.11 3.2±0.07

表 1-3 實驗動物血清血脂比較（x ± s, mmol/L）Group TG TCHO LDL-C HDL-CND 0.78±0.21 1.28±0.12 0.27±0.03 0.64±0.14HFD 3.94±1.36 16.67±7.90 15.01±9.04 2.06±0.07Aa 1.19±0.43 1.75±0.17 0.57±0.36 0.56±0.01HFD+Aa 12.05±2.05 28.15±4.17 17.60±6.79 1.22±0.06

28圖 1-9 實驗動物血清炎癥因子比較4. 牙周損害程度的評估4.1 肉眼觀察至 14 周實驗結(jié)束時，A、B 組所有牙牙周情況良好，無明顯炎性改變。經(jīng)過牙周結(jié)扎及接種 Aa，C、D 組牙周組織，尤其是結(jié)扎處周圍出現(xiàn)嚴重紅腫，有較多食物殘留牙菌斑較多，探診出血明顯，牙周袋較深，部分實驗牙甚至出現(xiàn)松動現(xiàn)象。
【參考文獻】

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1 游曉慶;牙周致病菌Pg-LPS對組織特異性單核/巨噬細胞炎癥因子表達影響的實驗研究[D];福建醫(yī)科大學;2011年

本文編號：2859447